镰形扇头蜱巨噬细胞移动抑制因子的克隆、表达及酶活性分析     

王玉俭  郑倩  宋冠华  钟平生 《黑龙江畜牧兽医》2023,(8):67-71

为了探究镰形扇头蜱巨噬细胞移动抑制因子(Rhipicephalus haemaphysaloides macrophage migration inhibitory factor, RhMIF)基因的功能，试验采用RT-PCR方法对RhMIF基因开放阅读框进行扩增，运用大肠杆菌表达体系对RhMIF蛋白进行体外重组表达，随后对纯化后的RhMIF重组蛋白进行互变异构酶活性分析。结果表明：RhMIF基因开放阅读框大小为351 bp,编码116个氨基酸；RhMIF重组蛋白在大肠杆菌上清液中成功表达，大小为17.4 ku; RhMIF重组蛋白具有互变异构酶活性。说明本试验通过大肠杆菌表达体系成功表达了具有酶活性的RhMIF重组蛋白。  相似文献   

鸭坦布苏病毒感染诱导禽巨噬细胞M1型极化     

耿宁蔚  郭志云  吕泽昊  李靖  李宁 《山东畜牧兽医》2023,(11):20-23

鸭坦布苏病毒（DTMUV）自2010年4月暴发以来，给全球养鸭业带来了巨大的经济损失。巨噬细胞作为关键的免疫细胞，其不同功能的极化表型对宿主的免疫反应和抗微生物感染非常重要。禽巨噬细胞作为DTMUV感染的关键靶细胞，本研究通过荧光定量PCR、亚硝酸盐实验等对DTMUV感染禽巨噬细胞HD11后的极化表型进行分析。结果表明，DTMUV感染后能显著诱导HD11细胞发生M1型极化，刺激产生大量的促炎细胞因子。  相似文献   

黄芪多糖对巨噬细胞天然免疫调节的研究进展     

刘倩  郭志廷  张康  王学智  张景艳  李建喜 《中国畜牧兽医》2022,49(5):1746-1756

天然免疫系统是机体的第一道免疫防御屏障，在抵抗病原微生物感染的过程中起着关键性作用。如何通过药物或饲料添加剂激发畜禽天然免疫防御功能，从而最大程度地诱导机体保护性机制和减轻感染引起的炎症损伤，已成为应对当下养殖环境中病原微生物肆虐、抗生素耐药的可持续性解决方案之一。黄芪多糖(Astragalus polysaccharides，APS)作为一类生物大分子成分，是免疫活性最强的一类物质，具有免疫调节、抗病毒、抗应激、抗氧化、抗肿瘤等多种生物学作用，在临床应用中可有效提高幼龄动物的天然免疫防御功能，增强多种疫苗的保护效力及生长性能，因而其对机体天然免疫系统的调节作用及机制是近年来的研究热点。然而受产地、提取纯化方法及复杂化学结构的影响，对APS活性作用的深入研究与开发利用受到了一定的限制。作者介绍了APS现有的提取技术及存在的单糖组分，重点阐述了其对天然免疫主要效应细胞-巨噬细胞极化、功能、炎症因子表达的双向调节作用及对巨噬细胞相关Toll 样受体(Toll-like receptors，TLRs)信号通路干预的研究进展，并指出了当前研究存在的问题与不足，以期为APS免疫调节机制的深入研究提供参考，为其在畜禽养殖中的推广应用提供科学依据。  相似文献   

肺泡巨噬细胞极化及分泌外泌体介导猪急性肺损伤的研究进展     

王鑫鑫  李言蹊  付子政  赵冬冬  林树梅 《动物医学进展》2023,(4):95-98

急性肺损伤(acute lung injury, ALI)是由多种病理性因素引发的肺部炎症反应，在养猪业中的发病率呈上升趋势，给患病猪造成了极大的痛苦，同时也给养殖户造成了巨大的经济亏损，严重的急性肺损伤可造成患病猪死亡，存活猪也可能因肺纤维化发展成为急性呼吸窘迫综合征。在急性肺损伤的发病过程中，肺泡巨噬细胞发挥着重要的作用，巨噬细胞分化的时间和方向决定了疾病的严重程度和结局。外泌体作为细胞间的一种信号通讯介质，在巨噬细胞的增殖、分化中具有重要的作用。论文通过阐述外泌体介导急性肺损伤的发病机制及肺泡巨噬细胞分泌的外泌体在急性肺损伤中的作用，以期为生猪养殖生产中相关疾病防控提供参考。  相似文献   

结核分枝杆菌PE26蛋白调节巨噬细胞免疫反应进而促进分枝杆菌胞内定殖     

陈凡若  党光辉  张嘉俊  鹿萍  崔宁  崔莹莹  崔子寅  刘思国 《中国预防兽医学报》2023,(5):502-509

结核分枝杆菌(MTB) PE/PPE家族蛋白介导MTB与宿主间的相互作用，调节宿主炎症反应，有助于其的存活和疾病发展。为研究PE/PPE家族中PE26蛋白的作用，本实验利用PCR扩增pe26基因片段，构建重组载体p AIN-PE26，转化耻垢分枝杆菌(Ms)构建重组菌p AIN-PE26/Ms，经western blot鉴定结果显示，p AIN-PE26/Ms正确表达重组PE26蛋白(rPE26)。利用差速离心分离p AIN-PE26/Ms亚细胞组分，经western blot鉴定结果显示，r PE26定位于p AIN-PE26/Ms细胞壁。通过p AIN-PE26/Ms的菌落形态观察和生长曲线测定，结果显示，p AIN-PE26/Ms菌体表面较p AIN/Ms对照组更粗糙，脊不规则且相对较高，褶皱不明显；p AIN-PE26/Ms生长速度较对照组极显著增加(P<0.001)。利用H37Ra感染巨噬细胞，通过q RT-PCR检测pe26转录水平，结果显示，H37Ra感染巨噬细胞后pe26转录水平极显著增加(P<0.001)。利用p AIN-PE26/Ms感染巨噬细胞，分别通...  相似文献   

太子参参须多糖对RAW264.7细胞免疫调节作用的研究     

曾丽  陈赛红  赵佳梅  陈颖清  黄一帆  张炎达  李健  马玉芳 《中国预防兽医学报》2023,(1):79-87

为研究太子参参须多糖(RPFRP)对小鼠单核巨噬细胞(RAW264.7细胞)的免疫调节作用及作用机制，本研究利用MTT法检测不同浓度RPFRP作用下的RAW264.7细胞的增殖情况，筛选出RPFRP的适宜浓度为25μg/mL～400μg/m L。将25μg/mL～400μg/m L RPFRP作用于RAW264.7细胞并于不同时间后收获细胞培养物或上清液进行后续试验。采用中性红法检测不同浓度RPFRP作用下的RAW264.7细胞的吞噬活性，结果显示：RPFRP可极显著提高RAW264.7细胞吞噬活性(P<0.01)，且该吞噬活性在PRFRP浓度为25μg/mL～200μg/mL时呈剂量依赖式升高；Griess法检测RAW264.7细胞的NO产生量，结果显示：RAW264.7细胞上清液中NO含量显著升高(P<0.05)，且呈RPFRP剂量依赖式升高；ELISA法检测RAW264.7细胞的白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量，结果显示：与空白对照组相比，RPFRP处理的RAW264.7细...  相似文献   

绵羊肺源大肠杆菌cyaA基因缺失对小鼠肺泡巨噬细胞感染的影响     

操义恒  王子杰  王巧梅  党士荣  张丽媛  马雪  张乾义  周霞  黄新  张星星  吴桐忠  钟发钢 《中国预防兽医学报》2023,(3):295-301

为研究cyaA基因编码的腺苷酸环化酶(AC)在绵羊肺源大肠杆菌XJ10感染小鼠肺泡巨噬细胞(MH-S)中的作用，本研究以绵羊肺源大肠杆菌XJ10野毒株(XJ10WT)为对照，通过荧光定量PCR检测XJ10 cyaA基因缺失株(XJ10ΔcyaA)在感染MH-S细胞过程中与黏附侵袭相关的motA、crl、fimH、pap基因的m RNA转录水平，结果显示，与XJ10WT相比，XJ10ΔcyaA在感染MH-S细胞过程中与黏附侵袭相关的motA、crl、fimH、pap基因的m RNA转录水平在感染后0和6 h时均极显著降低(P<0.001),crl和pap基因的m RNA转录水平分别在2 h和12 h时均极显著上调(P<0.001)。进一步通过吉姆萨染色观察XJ10WT和XJ10ΔcyaA黏附MH-S细胞情况，采用细胞和细菌共培养方式分析XJ10ΔcyaA对MH-S细胞的黏附及侵袭能力，并通过CCK-8法分析细菌对MH-S细胞增殖的抑制情况。结果显示，XJ10ΔcyaA和XJ10WT在感染后3 h黏附MH-S细胞的活菌数量达峰值并持续至5 h，随后逐渐下降，在感染后1 h～5 ...  相似文献