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991.
本试验旨在研究蛋氨酸水平对羔羊体况发育、消化道组织形态及血清抗氧化指标的影响。试验选取12对7日龄断母乳的湖羊双胞胎公羔,采用配对试验设计,分为对照(CON)组和低蛋氨酸(LM)组,1对双胞胎羔羊分到不同的组中。试验分2个阶段进行,第1阶段(8~56日龄),CON组羔羊饲喂基础代乳粉和基础开食料;LM组羔羊饲喂的代乳粉和开食料在CON组基础上分别全部扣除(0.70%和0.40%)额外添加的蛋氨酸,其余营养水平保持一致。第2阶段(57~84日龄),2组羔羊停止饲喂代乳粉且饲粮均为基础开食料。在56和84日龄,各选取6对双胞胎羔羊进行屠宰,分离消化道组织,采集血清样品。结果表明:1)在采食量方面,LM组羔羊对蛋氨酸采食量在8~56日龄、8~84日龄阶段均极显著低于CON组(P0.01),而干物质采食量却均显著高于CON组(P0.05);在体尺指标方面,56日龄,LM组除体重、体斜长、胸围和体长指数显著低于CON组(P0.05)外,其他体况发育指标2组间均无显著性差异(P0.05);84日龄,2组间体况发育指标均无显著性差异(P0.05)。2)56日龄,LM组羔羊的瘤胃乳头宽度显著低于CON组(P0.05),2组羔羊的其他消化道形态发育指标差异不显著(P0.05)。3)56日龄,LM组羔羊血清中超氧化物歧化酶活性极显著低于CON组(P0.01);84日龄,LM组羔羊血清中除谷胱甘肽过氧化物酶活性显著低于CON组(P0.05)外,2组羔羊的其他血清抗氧化指标差异均不显著(P0.05)。结果提示,饲粮低蛋氨酸水平抑制了羔羊体况(体重、体斜长、胸围、体长指数)发育及瘤胃乳头宽度的增加,同时降低了机体血清中超氧化物歧化酶活性,然而却提高了干物质采食量;提高饲粮蛋氨酸水平后,羔羊体况发育及消化道组织形态发育也随之得到补偿,但机体抗氧化防御系统仍未得到完全改善。  相似文献   
992.
为了解广西地区猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)流行毒株的遗传进化情况,对2014年-2016年来自广西各地的部分PRRSV阳性病料进行Nsp2和ORF5基因的扩增和测序分析.结果获得34个Nsp2基因序列和45个ORF5基因序列,均属于美洲型毒株.Nsp2基因间核苷酸序列的同源性为91.8%~100%,与PRRSV美洲型毒株VR-2332、CH-1a、JXA1及NADC30株核苷酸序列的同源性分别为81.3%~84.3%、88.9%~92.1%、94.3%~99.3%和73.5%~75.1%,而与PRRSV欧洲型毒株LV株核苷酸序列的同源性为51.5%~53.2%.ORF5基因间核苷酸序列的同源性为82.8%~100%,与PRRSV美洲型毒株VR-2332、CH-1a、JXA1及NADC30株核苷酸序列的同源性分别为83.7%~99.5%、85%~95%、83.8%~99.7%和83.2%~86.4%,而与PRRSV欧洲型毒株LV株核苷酸序列的同源性为62.4%~64.5%.基于Nsp2和ORF5基因推导的氨基酸序列绘制的遗传进化树中,广西地区的毒株主要分布在以JXA1为代表的Ⅳ亚群.表明当前广西PRRSV流行毒株以JXA1株为代表的高致病性美洲型毒株为主,各毒株Nsp2和ORF5基因序列存在一定的差异,尚未发现欧洲型毒株和美洲型NADC30类毒株.  相似文献   
993.
Ralstonia solanacearum is a phytopathogenic bacterium that colonizes the xylem vessels of host plants leading to a lethal wilt disease. Although several studies have investigated the virulence of R. solanacearum on adult host plants, infection studies of this pathogen on the seedling stages of hosts are less common. In a preliminary observation, inoculation of R. solanacearum F1C1 on 6‐ to 7‐day‐old tomato seedlings by a simple leaf‐clip strategy resulted in a lethal pathogenic condition in seedlings that eventually killed these seedlings within a week post‐inoculation. This prompted testing of the effect of this inoculation technique in seedlings from different cultivars of tomato and similar results were obtained. Colonization and spread of the bacteria throughout the infected seedlings was demonstrated using gus‐tagged R. solanacearum F1C1. The same method of inoculating tomato seedlings was used with R. solanacearum GMI1000 and independent mutants of R. solanacearum GMI1000, deficient in the virulence genes hrpB, hrpG, phcA and gspD. Wildtype R. solanacearum GMI1000 was found to be virulent on tomato seedlings, whereas the mutants were found to be non‐virulent. This leaf‐clip technique, for inoculation of tomato seedlings, has the potential to be a valuable approach, saving time, space, labour and costs.  相似文献   
994.
小麦茎基腐是由多种镰孢菌侵染的世界性土传病害,亚洲镰孢菌(Fusarium asiaticum)是我国冬小麦主产区茎基腐镰孢菌的优势种群,对小麦生产造成巨大损失。本研究利用绿色荧光蛋白报告基因标记亚洲镰孢菌,研究其侵染抗感小麦的病理组织学过程,建立了茎基腐病菌与寄主互作的直观性的研究体系,对病害防治及抗病育种具有重要意义。基于PEG-CaCl_2介导原生质体转化法将gfp导入亚洲镰孢菌株CF0915,对转化子进行荧光表达、PCR验证、遗传稳定性、生长特性及致病力分析,选取与野生型表现相近的转化子进行侵染分析。结果表明,绿色荧光蛋白基因(gfp)与潮霉素基因(hyg)PCR扩增表明gfp已整合入真菌基因组中,转化子菌丝与分生孢子表现强烈绿色荧光信号,gfp能够在转化子中稳定遗传,菌落形态、生长速度及致病力与野生型菌株无显著差异;将gfp标记病菌分生孢子接种感病品种1 d后,大量孢子附着于根毛及根表皮细胞开始萌发,接种2 d后观察到抗性品种分生孢子萌发;感病品种接种3 d后,菌丝直接侵入表皮细胞或沿表皮细胞间层定殖生长,扩展至皮层组织,8 d后菌丝从根部迅速扩展至茎基部,至第10 d大量菌丝充塞根皮层细胞,叶鞘维管束也被菌丝侵染,并产生大量大型分生孢子,植株表现褐色病斑,14 d后根部及茎维管束被大量菌丝体填充,而后产生大量厚垣孢子,至25 d大部分感病品种幼苗萎蔫死亡;与感病品种相比,抗性品种在整个侵染过程中表现时间滞后。本研究对引起茎基腐病的亚洲镰孢菌侵染小麦的组织学过程观察,为病菌致病机理的阐释及抗病资源的利用提供了重要理论依据。  相似文献   
995.
稻瘟病菌Magnaporthe oryzae严重威胁水稻的产量与质量,明确稻瘟病菌与水稻互作过程及机理,对防治稻瘟病具有重要意义。本研究利用稻瘟病菌常用致病菌株GUY11和ZB25,构建了绿色荧光蛋白GFP的过量表达菌株,并通过荧光显微观察菌株侵染寄主水稻过程中侵染结构的形成与发育,包括孢子萌发、附着胞形成、侵染钉形成、侵染菌丝增殖、坏死斑形成及产孢。另外,通过比较过量表达菌株对稻瘟病高抗水稻和易感水稻的侵染过程,发现侵染过程的差异主要集中于侵染钉的穿透和侵染菌丝的定殖。本研究为分析稻瘟病菌对寄主水稻的定殖规律提供了一种有效工具。  相似文献   
996.
肌注氟苯尼考在鸭疫里氏杆菌感染鸭体内的药动学特征   总被引:1,自引:0,他引:1  
【目的】研究并比较肌注氟苯尼考在2周龄健康和鸭疫里氏杆菌感染鸭体内的药代动力学特征。【方法】240只鸭随机分为2组,各120只鸭,其中一组用鸭疫里氏杆菌腿部感染,分别以30 mg·kg~(-1)体重单剂量肌内注射氟苯尼考,采血点为给药前和给药后5、10、15、20、30、45 min和1、1.5、2、4、8、10、14 h。采用高效液相色谱法(HPLC)测定血浆氟苯尼考的浓度,采用紫外检测器检测,检测波长为223 nm,流动相为乙腈和水,其体积比为26和74,流速为1 m L·min-1,色谱柱为Agilent C18(4.6 mm×150 mm,5μm),进样量为20μL。药动学分析软件Win Nonlin 5.2.1以非房室模型拟合处理血药浓度-时间数据,计算相关的药动学参数,并用统计学软件SPSS17.0对药动学参数进行t检验统计学分析。【结果】氟苯尼考在健康鸭体内的峰浓度(Cmax)为(22.88±3.11)μg·m L-1,表观分布容积(Vd/F)为(2.39±0.81)L·kg~(-1),体清除率(ClB/F)为(0.64±0.11)L·h-1·kg~(-1),消除半衰期(t1/2β)为(2.57±0.51)h和药时曲线下面积(AUC)为(47.28±7.87)μg·m L-1·h;氟苯尼考在感染鸭体内的峰浓度(Cmax)为(19.77±1.82)μg·m L-1,表观分布容积(Vd/F)为(2.44±0.46)L·kg~(-1),体清除率(ClB/F)为(0.63±0.08)L·h-1·kg~(-1),消除半衰期(t1/2β)为(2.74±0.54)h和药时曲线下面积(AUC)为(48.11±6.62)μg·m L-1·h。统计分析氟苯尼考在健康鸭和感染鸭的药动学参数,结果表明,除了Cmax差异显著(P0.05),其他参数差异均不显著(P0.05)。【结论】两者的主要药动学参数相比较,感染鸭体内的Cmax显著低于(P0.05)健康鸭体内的C_(max),其他参数无显著性差异。氟苯尼考以30 mg·kg~(-1)体重肌内注射在健康和感染鸭体内具有吸收迅速,峰浓度高,体内分布广泛,消除较快的特点。  相似文献   
997.
【目的】奶牛乳房炎是奶牛养殖业中最为常见,同时也是带来经济损失最为严重的疾病之一,其主要病因是细菌感染。奶牛乳腺的固有免疫是抵抗病原菌入侵的第一道防线。NOD2是机体固有免疫模式识别受体核苷酸结合寡聚域(nucleotide-binding oligomerization domain,NOD)蛋白家族中的重要一员,通过识别其特异性配体胞壁酰二肽(muramyl dipeptide,MDP)——一种广泛存在于革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁中的成分,而参与抵抗多种病原菌入侵。奶牛乳腺上皮细胞(bovine mammary epithelial cells,BMEC)除泌乳以外,还是奶牛乳腺的免疫屏障。本试验欲探究MDP对BMEC体外生长状态及胞内NOD2表达量的影响。【方法】选取健康泌乳中期荷斯坦奶牛乳腺腺泡为组织原材料,采用胶原酶Ⅰ消化法结合梯度浓度胰蛋白酶纯化法分离BMEC;使用上皮细胞特异性表达的角蛋白-18(cytokeratin-18,CK-18)及成纤维细胞特异性表达的波形蛋白(Vimentin)抗体,通过免疫荧光技术对纯化后获得的细胞进行鉴定;将BMEC设为6个处理组,分别添加浓度为0(空白对照组)、1、5、10、15及20μg·mL~(-1)的MDP,24 h后显微镜下观察细胞状态,同时提取细胞RNA并反转录为cDNA,采用实时荧光定量PCR方法检测BMEC中NOD2的表达量。【结果】(1)胶原酶Ⅰ消化法结合梯度浓度胰蛋白酶纯化法分离得到的细胞CK-18免疫荧光结果为阳性,而Vimentin反应为阴性;细胞生长状态良好。(2)空白对照组、1、5及10μg·mL~(-1) MDP刺激组的BMEC生长状态良好,无任何肉眼可见变化;15μg·mL~(-1) MDP刺激组可见少量的BMEC脱落;而20μg·mL~(-1)MDP刺激组可见大量BMEC脱落,漂浮,且即使仍贴壁的细胞,其形态也发生了变化。(3)与空白对照组相比,各刺激组细胞NOD2 mRNA的表达量与MDP的刺激浓度呈正相关,即刺激时间为24 h时,随着MDP浓度的增加,BMEC中NOD2受体mRNA的表达量逐渐增加(P0.05)。【结论】成功获得了纯度较好的BMEC,该细胞生长状态良好,可以用于后续试验;虽然BMEC中NOD2受体mRNA的表达量与MDP的刺激浓度呈正相关,但在保持BMEC生长状态正常的前提下,MDP体外刺激浓度应控制在10μg·mL~(-1)以下。这些结果提示我们:当病原菌入侵乳腺时,BMEC可以通过NOD2受体途径参与免疫防御反应,但这种防御能力受细菌数量或毒力强度的影响。即在一定的细菌数量或毒力范围内,随着细菌数量的增加或毒力的增强,奶牛乳腺的免疫防御反应也增强,进而清除外来病原菌;而当细菌数量或毒力强度超过一定范围时,乳腺组织受到严重损伤,免疫防御屏障也随之崩溃,奶牛乳腺局部甚至全身将呈现出明显的临床症状。  相似文献   
998.

Objective

To assess the cardiopulmonary effects caused by reverse Trendelenburg position (RTP) at 5° and 10° in sevoflurane-anesthetized yearling steers.

Study design

Prospective, experimental study.

Animals

Eight Holstein steers aged (mean ± standard deviation) 12 ± 2 months and weighing 145 ± 26 kg.

Methods

In the first phase of the study, the individual minimum alveolar concentration (MAC) of sevoflurane was determined using electrical stimulation. In the second phase, the effects of RTP were assessed. The animals were anesthetized on three separate events separated by ≥7 days in an incomplete crossover design: control treatment using a table without tilt (RTP0); treatment with the table at 5° RTP (RTP5) and table tilted 10° RTP (RTP10). Subjects were physically restrained in dorsal recumbency on the table, which was already tilted according to each treatment. Anesthesia was induced with sevoflurane at 8% in 5 L minute–1 oxygen via face mask followed by maintenance with sevoflurane at 1.3 MAC and spontaneous breathing. Cardiopulmonary variables were obtained immediately after instrumentation (T0) and then after 30, 60, 120 and 180 minutes (T30, T60, T120 and T180, respectively).

Results

The mean sevoflurane MAC for the eight steers was 2.12 ± 0.31%. Cardiac output was lower at all time points and the systemic vascular resistance index was higher at T120 and T180 in RTP10 compared with RTP0. Oxygen consumption was lower at T0 and at T180 in RTP10 compared with RTP0 and at all time points except T30 compared with RTP5. Oxygen extraction was lower at T0 in RTP10 compared with RTP0 and RTP5, and at T60 and T180 compared with RTP5.

Conclusions and clinical relevance

RTP 5° and 10° did not improve ventilatory and oxygenation variables in sevoflurane-anesthetized steers when compared with no tilt, however the cardiovascular variables were adversely affected in RTP10.  相似文献   
999.
Data from 18 β‐carotene‐deficient Japanese Black cows were collected to clarify the effects of feeding β‐carotene‐enriched dry carrots on β‐carotene status and colostral immunoglobulin (Ig) in cows. Cows were assigned to control or carrot groups from 3 weeks before the expected calving date to parturition, and supplemental β‐carotene from dry carrots was 138 mg/day in the carrot group. Plasma β‐carotene concentrations in the control and carrot groups at parturition were 95 and 120 μg/dL, and feeding dry carrots slightly improved plasma β‐carotene at parturition. Feeding dry carrots increased colostral IgA concentrations in cows and tended to increase colostral IgG1, but colostral IgM, IgG2, β‐carotene and vitamin A were not affected by the treatment. Feeding dry carrots had no effects on plasma IgG1, IgA and IgM concentrations in cows, but plasma IgG1 concentrations decreased rapidly from 3 weeks before the expected calving date to parturition. These results indicate that feeding β‐carotene‐enriched dry carrots is effective to enhance colostral IgA and IgG1 concentrations in β‐carotene‐deficient cows.  相似文献   
1000.
Porcine edema disease (ED) is a toxemia caused by enteric infection with Shiga toxin 2e (Stx2e)‐producing Escherichia coli (STEC). ED occurs most frequently during the weaning period and is manifested as emaciation associated with high mortality. In our experimental infection with a specific STEC strain, we failed to cause the suppression of weight gain in piglets, which is a typical symptom of ED, in two consecutive experiments. Therefore, we examined the effects of deprivation of colostrum on the sensitivity of newborn piglets to STEC infection. Neonatal pigs were categorized into two groups: one fed artificial milk instead of colostrum in the first 24 h after birth and then returned to the care of their mother, the other breastfed by a surrogate mother until weaning. The oral challenge with 1011 colony‐forming units of virulent STEC strain on days 25, 26 and 27 caused suppression of weight gain and other ED symptoms in both groups, suggesting that colostrum deprivation from piglets was effective in enhancing susceptibility to STEC. Two successive STEC infection experiments using colostrum‐deprived piglets reproduced this result, leading us to conclude that this improved ED piglet model is more sensitive to STEC infection than the previously established models.  相似文献   
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