秦川牛FABP4基因重组腺病毒载体的构建与鉴定     

魏胜娟  昝林森  王洪宝  成功  季舒涵  王虹  付常振  姜碧杰 《中国农业科学》2013,46(7):1434-1440

【目的】旨在通过构建秦川牛FABP4基因的重组腺病毒载体,为在细胞水平研究FABP4基因的功能和作用机制做准备。【方法】根据GenBank收录的牛FABP4基因mRNA序列设计引物,PCR扩增并克隆测序。将目的基因连接到穿梭载体pAdTrack-CMV上并用PmeⅠ线性化后,转化含有腺病毒骨架载体pAdEasy-1的E. coli BJ5183感受态细胞进行同源重组,得到重组质粒pAd-FABP4,并用PacⅠ酶切鉴定。将经过PacⅠ线性化的pAd-FABP4转染HEK 293A细胞进行病毒包装和扩增,TCID50法测定病毒滴度。【结果】经测序鉴定本次克隆的FABP4 序列与GenBank收录的一致。 酶切鉴定、绿色荧光观察、PCR及测序检测均证明,重组腺病毒载体构建成功并获得重组腺病毒AD-FABP4,病毒滴度为1.58×109 PFU•mL-1。【结论】成功构建了秦川牛FABP4基因重组腺病毒载体并获得高滴度的重组腺病毒。  相似文献   

基于语言迁移理论的英语学习方法研究     

王立国 《吉林农业科技学院学报》2013,(1):75-77,95

近年来,语言迁移理论对语言领域研究的重要作用已经得到了国内外众多学者的证实。由于中英文化的差异,中国学生在英语语音、语汇、语法等方面的学习上出现了非常严重的汉语负迁移现象。本文针对此类问题提出文化导入．对比分析和实践训练三种对策,希望有助于学习英语者学习质量的提升。  相似文献   

土壤氮素迁移转化研究进展   总被引：3，自引：0，他引：3  

谢云  王延华  杨浩 《安徽农业科学》2013,41(8):3442-3444,3462

氮是植物必需的营养元素,但过量施用氮肥会造成水体富营养化和氧化亚氮的释放。对土壤氮素的迁移和转化的研究是当前的热点。综述了国内外土壤氮素迁移转化的研究进展,并对未来研究方向进行了展望。  相似文献   

Skp2基因的研究进展     

李勇  彭克美  李奎 《湖北农业科学》2013,52(3)

Skp2被称为S期激酶相关蛋白,属于F-box蛋白家族成员,在蛋白泛素化降解过程中可作为SCFSkp2复合物的重要成分起识别底物蛋白的作用,主要通过降解细胞周期调节蛋白介导细胞周期调控和细胞增殖.为更全面地了解Skp2的研究进展及开展其在动物科学与医学领域的研究,从Skp2基因的结构、功能、与人类肿瘤致病机理、转录调控和启动子方面的关系进行了综述.  相似文献   

甜玉米果皮厚度主基因+多基因遗传效应分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘鹏飞  蒋峰  乐素菊 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2013,41(7):43-48

【目的】研究甜玉米果皮厚度的遗传模式,为甜玉米品质改良和分子标记辅助选择提供理论依据。【方法】以果皮厚度有显著差异的甜玉米自交系T4和T19为亲本配制杂交组合,用主基因+多基因混合遗传模型及P1、P2、F1、B1、B2和F2共6个世代联合分析的方法,对甜玉米果皮厚度性状进行分析。【结果】果皮厚度的最适遗传模型为D-2,即1对加性主基因+加性-显性多基因混合遗传;主基因遗传率大于相应分离世代的多基因遗传率,B1、B2、F2群体的主基因遗传率分别为59.65%,55.17%和65.24%,多基因遗传率分别为37.84%,41.40%和32.65%,主基因的加性效应值为-27.186 4,多基因的加性效应值为0.289 5,显性效应值为5.742 3。【结论】甜玉米果皮厚度以主基因遗传为主,育种中既要重视利用主基因,也要考虑多基因对性状的影响。  相似文献   

铁皮石斛鲨烯合酶基因的克隆及其组织表达模式分析     

张岗  唐志书  周莉英 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2013,41(9):151-158

【目的】克隆珍稀濒危兰科药用植物铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)鲨烯合酶(Squalene synthase,SS)基因(DoSS),并对其进行生物信息学与组织表达模式分析,为研究其生物学功能提供参考。【方法】采用RT-PCR和RACE技术,获得DoSS基因全长序列;利用生物信息学软件预测DoSS蛋白的理化性质、结构域及亚细胞定位等分子特性;用DNASTAR 6.0和MEGA 4.0分别进行DoSS蛋白氨基酸多序列比对和进化关系分析;借助qPCR检测DoSS基因的组织表达模式。【结果】成功克隆获得铁皮石斛鲨烯合酶基因,命名为DoSS(GenBank注册号JX272631),其cDNA全长1 735bp,编码一条由410个氨基酸组成的多肽,分子质量46.99ku,等电点7.13;DoSS蛋白含有鲨烯/八氢番茄红素合成酶保守结构域(44-315位氨基酸);DoSS与其他多种植物SS基因的编码蛋白同源性很高(61%~75%),与水稻、玉米等单子叶植物的亲缘关系较近;DoSS基因为组成型表达,在根中的表达量最大,为叶的12.41倍;茎次之,为叶的1.87倍。【结论】成功克隆得到1个鲨烯合酶基因(DoSS)全长cDNA;DoSS基因的(在根中高)表达特征暗示,其可能在铁皮石斛根的生长发育中发挥重要的调控功能。  相似文献   

卷烟纸透气度与克重对烟用香料在主流烟气中转移行为的影响     

杨君  储国海  胡安福  王骏  胡军  曾世通  白新亮 《云南农业大学学报(自然科学版)》2013,28(2):230-236

 为考察不同透气度、克重数卷烟纸在不同相对湿度下对香料在卷烟主流烟气中转移行为的影响,分别采用同时蒸馏萃取,溶剂萃取和气相色谱—质谱（GC/MS）对抽吸后主流烟气（MS）粒相转移率进行研究,并对数据进行了显著性检验分析和灰色关联分析。结果表明：（1）沸点相对较高,分子量较大的香味成分的转移率与不同卷烟纸透气度和克重数在α=0.05水平上无显著性差异,说明这些香味成分基本不受卷烟纸透气度和克重数的影响;（2）在所选择参数范围内,平均主流烟气（MS）粒相转移率随卷烟纸透气度的增加呈减小的趋势,随卷烟纸克重数的增加呈“V”变化趋势;（3）卷烟纸透气度对主流烟气（MS）粒相平均转移率的影响要大于湿度的影响,而受卷烟纸克重数与湿度的影响均相当。因此在保持卷烟产品的区域稳定性时,要考虑各香料在主流烟气中的转移行为的影响。  相似文献   

水稻籼粳杂种F_1不育性研究新进展     

周起先  杨淑珂  朱文银  陈峰  姜明松 《山东农业科学》2013,45(8)

水稻籼粳杂种不育性是亚种间杂种优势利用的主要障碍。本文首先就影响亚种间杂种F1不育的主要因素及两个主要基因遗传模式进行总结;然后详细综述了相关育性基因的鉴定、定位和克隆等方面研究成果;最后综述了有关克服籼粳亚种间杂种不育性的两个代表性观点,并提出自己简单的看法。  相似文献   

柱状黄杆菌对草鱼TLRs基因表达水平的影响     

隗黎丽  吴华东  熊六凤 《大连水产学院学报》2013,28(4)

用柱状黄杆菌Flavobacterium columnare G4株感染草鱼Ctenopharyngodon idella,分别在感染1、4、7d后提取感染组和对照组草鱼鳃、脾脏、肝脏、肠道和头肾5种组织的总RNA,并采用半定量RT-PCR方法检测不同组织中Toll样受体3(TLR3)、Toll样受体7(TLR7)和Toll样受体22(TLR22)3个抗病毒免疫基因的表达变化.结果表明:注射柱状黄杆菌7d后,TLR3在草鱼鳃、肝脏、肠道和头肾4种组织中的表达显著上调(P＜0.05);注射柱状黄杆菌4d和7d后,TLR7和TLR22在5种组织中的表达均显著上调(P＜0.05);而注射柱状黄杆菌1d后,TLR22在鳃、脾脏和肝脏组织中的相对表达量就显著上调(P＜0.05).研究表明,TLR3、TLR7和TLR22基因在机体应对细菌感染的免疫反应过程中发挥着重要的作用.  相似文献   

灵芝lz-8基因乳酸菌表达载体的构建与表达及免疫特性     

曲宁宁  陈萍  孙鑫泽  张雪  刘琼 《吉林农业大学学报》2013,35(4)

克隆灵芝Iz-8基因并进行原核表达,通过动物试验检测其生理活性.根据GenBank公布的Iz-8基因的DNA序列设计引物,从灵芝菌丝中提取灵芝总DNA,PCR扩增k-8基因并连接到乳酸菌食品级表达载体pNZ8149,转化乳酸乳球菌NZ3900,于30℃Nisin诱导3h,SDS-PAGE进行蛋白表达分析.将工程菌菌悬液给小鼠灌胃,对其碳廓清试验等免疫指标进行检测.结果表明:扩增到的Iz-8基因序列全长330 bp,构建了原核表达载体pNZ8149-Iz-8,LZ-8蛋白在NZ3900中得到表达.NZ3900/pNZ8149-Iz-8菌悬液对小鼠各项免疫指标有明显的调节作用.  相似文献