影响木薯叶片蛋白质双向电泳图谱的因素分析     

安飞飞  张振文  郑永清  李庚虎 《热带作物学报》2011,31(5):33-37

以木薯华南205为试材,采用苯酚抽提法提取叶片蛋白质,并通过双向电泳技术研究影响木薯叶片蛋白电泳分析图谱的主要因素。结果表明：pH 4～7的IPG胶条可提高特定范围蛋白质点的分辨率;上样量200 μg可得到较好的双向电泳图谱。本研究不仅为进一步研究木薯叶片蛋白电泳分析提供技术手段,同时也为分析木薯块根、茎和繁殖器官的蛋白质提供参考。  相似文献   

水稻花粉总蛋白质双向凝胶电泳方法建立及应用     

文李  刘盖  李绍清  李国民  陶钧  朱英国 《中国水稻科学》2007,21(1):13-19

采用石英砂加液氮研磨方法破碎花粉,然后用两种不同的方法提取水稻花粉总蛋白质,之后采用固相pH梯度等电聚焦/SDS PAGE 双向凝胶电泳对红莲型细胞质雄性不育水稻单核期花粉总蛋白质进行了分离。通过银染显色, PDQuest 2DE软件可识别约1 000~1 500个蛋白质点。其中TCA 丙酮提取法更适合提取花粉总蛋白质进行双向凝胶电泳分离,并可获得分辨率和重复性较好的双向电泳图谱。对红莲型细胞质雄性不育水稻的不育系单核期和二核期花粉总蛋白进行了双向电泳分离,通过比较两个时期花粉蛋白质电泳图谱后发现,二核期的花粉蛋白质较单核期花粉蛋白质数目减少,并且部分蛋白质表达量下降。  相似文献   

大豆叶片蛋白质双向电泳技术的改良     

顾宪鹏  罗秋兰  高继国  李文滨 《大豆科学》2011,30(4):663-667

以大豆叶片为材料,比较分析了3种蛋白质的提取方法,讨论了等电聚焦时间和染色方法等关键因素对双向电泳的影响,同时选择不同的IPG胶条,设定了第1向等电聚焦和第2向SDS-PAGE电泳的电泳程序及参数.结果表明:采用TCA-丙酮沉淀法提取蛋白质,选择pH 4 ～7( 17 cm) IPG胶条,适当延长和改变等电聚焦的第2步...  相似文献   

长白山鸡爪苓子实体的组织分离培养及其酯酶同工酶分析     

许广波  金敏  梁运江  李艳茹  李太元 《延边大学农学学报》2013,(4):284-288

以鸡爪苓子实体为分离材料,对子实体的不同部位进行组织分离,并对分离得到的纯培养菌株进行酯酶同工酶分析,结果表明,菌柄基部是最佳分离部位,菌株萌发成活率最高;分离材料与产地的不同使得分离菌株之间的EST同工酶谱带表达有明显的差异。  相似文献   

用DGGE法初步解析茯砖茶渥堆发酵过程中真菌群落的结构     

刘石泉  胡治远  赵运林 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2014,40(5)

为研究茯砖茶发花过程中真菌群落的结构和种类,对茯砖茶渥堆发酵过程中不同时间段黑毛茶样品中真菌群落的18S rDNA高变区进行扩增,对真菌18S rDNA变性梯度凝胶电脉(DGGE)图谱中的条带进行回收、克隆、测序和序列比对。结果表明:茯砖茶渥堆发酵过程中的真菌类型丰富,有好干性酵母(Wallemia sebi)、假丝酵母菌(Candida sp.)、热带假丝酵母(Candida tropicalis)、路德酵母(Lodderomyces sp.)、汉逊德巴利酵母(Debaryomyces hansenii)、毕赤酵母(Pichia kudriavzevii)、酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)、隐球酵母(Cryptococcus sp.)、牧草红酵母(Rhodotorula graminis)、阿姆斯特丹散囊菌(Eurotium amstelodami)、灰绿曲霉(Aspergillus glaucus)、米赫根毛霉(Rhizomucor miehei)、微小根毛霉(Rhizomucor pusillus)、白地霉(Galactomyces geotrichum)、安大略假单胞菌(Candida ontarioensis)、真皮毛孢子菌(Trichosporon dermatis)、斜卧青霉(Penicillium decumbens)、曲霉(Aspergillus penicillioides)等真菌存在;以渥堆24 h为分界点,真菌群落结构在分界点前后变化较大;真菌群落多样性指数在渥堆0~16 h呈升高趋势,16~24 h略有降低,24 h后继续升高,在渥堆后40 h上升到最高水平2.348,而渥堆40~48 h仍然维持在较高水平;在整个渥堆过程中,优势菌路德酵母、汉逊德巴利酵母和次优势菌阿姆斯特丹散囊菌均有出现,在渥堆后期出现了次优势菌好干性酵母、汉逊德巴利酵母和酿酒酵母;比对结果表明,渥堆过程中同时存在3株好干性酵母菌和7株阿姆斯特丹散囊菌,说明在渥堆发酵过程中优势菌种存在多样性。本研究结果表明,采用DGGE指纹图谱能全面、真实地反映茯砖茶渥堆发酵过程中真菌群落的结构和多样性变化。  相似文献   

低温胁迫下小麦幼穗中差异表达蛋白质的鉴定     

程西永  呼晓贤  李海霞  董中东  任妍  陈树林  詹克慧  许海霞 《麦类作物学报》2016,36(10):1342-1349

为探究低温胁迫下小麦幼穗中胁迫响应差异表达蛋白,采用IEF/SDS-PAGE双向凝胶电泳及质谱技术,以低温敏感品种SW601和低温不敏感品种陇麦157为材料,对常温生长、0℃低温胁迫12h和72h的幼穗全蛋白进行了分析。结果表明,在pH 4~7时,SW601和陇麦157各处理幼穗蛋白图谱中均可重复检测到800~900个有效蛋白质点;低温胁迫12h、72h后,SW601和陇麦157中上调表达的蛋白点分别有120个和101个,下调表达的蛋白点分别有92个和60个。对2种胁迫处理下均差异表达且Ratio2的54个蛋白点进行质谱分析,成功鉴定出43个差异蛋白。经数据库搜索匹配和蛋白质鉴定,这43个差异蛋白分别属于胁迫应激/防御相关蛋白、光合作用蛋白、蛋白代谢相关蛋白、碳水化合物代谢相关蛋白、信号传导相关蛋白、能量产生和运输相关蛋白和未知功能蛋白等7类蛋白。其中,抗坏血酸过氧化物酶、Cu/Zn超氧化物歧化酶和胚胎后期发育富集(LEA)同源蛋白14-A等蛋白的表达量在低温不敏感材料陇麦157中变化显著,而在低温敏感材料SW601中没有表达,这可能与小麦幼穗在低温逆境下的代谢调控和低温敏感特性有一定关系。  相似文献   

鱼糜制品中基因组DNA提取方法的比较   总被引：2，自引：0，他引：2  

陈赟  汪之和 《湖北农业科学》2007,46(4):520-522

将分别采用普通酚-氯仿抽提法和试剂盒(柱吸附法)提取DNA的两种方法加以比较,以确定最适提取鱼糜制品DNA的方法.将鱼肉和鱼糜制品作为原料,用两种方法提取基因组DNA,利用分光光度计测定其A260与A280的吸光值,计算比率估计核酸的纯度,并利用琼脂糖凝胶电泳观察DNA片段在凝胶中的位置;并用线粒体16S rRNA基因PCR扩增产物鉴定所提取的基因组DNA.  相似文献   

不同年限毛竹林土壤固氮菌群落结构和丰度的演变   总被引：1，自引：0，他引：1  

何冬华  沈秋兰  徐秋芳  陈俊辉  程敏  毛新伟  李永春 《土壤学报》2015,52(4):934-942

应用变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)和荧光定量PCR(real time fluorescent quantitative PCR,q PCR)方法研究了不同年限毛竹林土壤固氮菌群落结构和丰度的变化。结果表明:土壤p H、有机质、有效磷、速效钾和铵态氮含量在马尾松林改造成毛竹林5 a后明显提高,而后逐渐降低,并趋于稳定;土壤固氮菌多样性和nif H基因丰度也呈现相似的趋势。条带测序分析表明,毛竹林土壤固氮菌均为不可培养的固氮菌,与慢生根瘤菌(Bradyrhizobium sp.)具有较高的相似度。冗余分析结果表明,不同栽培年限毛竹林地土壤固氮菌群落组成发生了明显变化,长期栽培毛竹林引起的土壤养分变化对土壤固氮菌多样性具有重要影响。  相似文献   

Fractionation of soil humic acids by preparative polyacrylamide gel electrophoresis in the presence of concentrated urea     

Saiful Karim 《Soil Science and Plant Nutrition》2013,59(6):827-839

To separate soil humic acids (HAs) into their constituents and characterize them, polyacrylamide gel electrophoresis (PAGE) was carried out in the presence of 7 M urea using a preparative electrophoresis system. Two types of soil HAs were fractionated into nine fractions by PAGE. The dark-colored constituents were recovered from the electrophoretic fractions by precipitation on acidification, and the brown-colored constituents dissolved in the acidic solution of fast-moving fractions were recovered by adsorption onto DAX-8 resin. High-performance size-exclusion chromatography (HPSEC) confirmed that the constituents of the HAs were separated based on their molecular size by PAGE. The dark-colored constituents exhibited higher degrees of humification than did the corresponding unfractionated HAs, except for the constituents remaining in the electrophoretic gels at the end of electrophoresis. Diffuse reflectance infrared spectroscopy revealed that the chemical properties of the dark-colored constituents changed regularly: the content of carboxyl groups decreased and the proportions of proteinous, aliphatic and polysaccharide moieties increased with increasing molecular size. The humification degrees of the constituents adsorbed onto DAX-8 resin were considerably lower than those of the corresponding unfractionated HAs. The chemical properties of the DAX-8-adsorbed constituents were different from those of the dark-colored constituents. Observation of electrophoretic fractions under blue light (470 nm) and HPSEC with fluorescence detection at an excitation wavelength of 460 nm and an emission wavelength of 520 nm showed that green fluorescent substances were largely concentrated in the smallest molecular size fractions and were partitioned into both the dark-colored precipitates and DAX-8-adsorbed fractions. The proportion of organic carbon recovered by precipitation and adsorption onto DAX-8 resin was 45–63%, indicating that substantial parts of the HA constituents were missing. The unrecovered constituents were considered to be acid-soluble, nearly colorless substances. The dissociation of the acid-soluble constituents from the acid-insoluble dark-colored constituents during the preparative PAGE of soil HAs was ascribed to disruption of hydrogen bonding and hydrophobic interactions caused by concentrated urea.  相似文献   

低能Ar+注入樱桃萝卜点点红种子后的生物学效应   总被引：3，自引：0，他引：3  

梁秋霞  曹刚强  黄群策  秦广雍  马青荣 《中国农学通报》2005,21(3):70-70

选取樱桃萝卜点点红为材料,对低能Ar+离子注入其干种子后的生物学效应进行了研究。考察了其发芽率、成活率与低能Ar+注入剂量的关系,对低能Ar+注入点点红种子后其过氧化物酶(POD)的活性进行了测定,并对POD酶谱及酯酶(Est)同工酶酶谱进行分析。研究结果表明,不同剂量的低能Ar+注入都会引起种子发芽率、成活率及不同阶段的生长和发育产生变异;在1×1017Ar+/cm2与3×1017Ar+/cm2剂量之间点点红种子的发芽率随注入剂量的增加呈现出“马鞍型”曲线的变化趋势;成活率的变化规律与发芽率的变化规律基本一致;低剂量注入时,其POD活性随剂量的增加而升高;高剂量注入时,其POD活性随剂量的增加而降低。同工酶图谱中,POD在2.5×1017Ar+/cm2和3.0×1017Ar+/cm2增加一条酶带,且1.5×1017Ar+/cm2和3.0×1017Ar+/cm2高剂量注入时有缺失现象;酯酶(Est)在1.5×1017Ar+/cm2和3.0×1017Ar+/cm2剂量注入时酶带数增加,且变深。  相似文献