全文获取类型
收费全文 | 15275篇 |
免费 | 786篇 |
国内免费 | 1831篇 |
专业分类
林业 | 284篇 |
农学 | 1727篇 |
基础科学 | 50篇 |
946篇 | |
综合类 | 6519篇 |
农作物 | 953篇 |
水产渔业 | 780篇 |
畜牧兽医 | 5541篇 |
园艺 | 750篇 |
植物保护 | 342篇 |
出版年
2024年 | 239篇 |
2023年 | 770篇 |
2022年 | 887篇 |
2021年 | 904篇 |
2020年 | 712篇 |
2019年 | 898篇 |
2018年 | 450篇 |
2017年 | 705篇 |
2016年 | 826篇 |
2015年 | 817篇 |
2014年 | 886篇 |
2013年 | 870篇 |
2012年 | 1286篇 |
2011年 | 1195篇 |
2010年 | 1114篇 |
2009年 | 1068篇 |
2008年 | 1108篇 |
2007年 | 750篇 |
2006年 | 603篇 |
2005年 | 496篇 |
2004年 | 363篇 |
2003年 | 273篇 |
2002年 | 169篇 |
2001年 | 104篇 |
2000年 | 112篇 |
1999年 | 80篇 |
1998年 | 61篇 |
1997年 | 37篇 |
1996年 | 30篇 |
1995年 | 14篇 |
1994年 | 28篇 |
1993年 | 8篇 |
1992年 | 6篇 |
1991年 | 4篇 |
1990年 | 6篇 |
1989年 | 4篇 |
1988年 | 2篇 |
1987年 | 1篇 |
1985年 | 1篇 |
1983年 | 1篇 |
1981年 | 1篇 |
1955年 | 3篇 |
排序方式: 共有10000条查询结果,搜索用时 31 毫秒
991.
用RT-PCR方法从H5N1亚型禽流感病毒(AIV)A/Duck/Zhejiang/12/00中获得NA基因,将目的基因定向克隆到原核表达载体pET-32a中,将序列测定和双酶切验证准确的阳性重组质粒转化大肠杆菌BL21,用IPTG诱导,经SDS-PAGE和Western-blot分析,结果显示,重组蛋白得到了可溶性表达,表达的蛋白质分子质量为33ku;该蛋白可以与禽流感H5N1亚型阳性血清反应,具有良好的免疫原性;ELISA检测结果表明,用此纯化蛋白作为包被抗原检测H5N1亚型AIV神经氨酸酶抗体具有良好的灵敏性。 相似文献
992.
993.
天然多酶复合物对提高营养物质消化率的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
1商业酶制剂生产饲料用酶制剂通常是由细菌或真菌的一种或多种催化剂成分组成。用于生产酶制剂的细菌品系通常在某些方面是经过基因修饰的,因而它们能过量表达所需的酶,使得动物饲料用酶制剂的成本下降。典型的饲料用酶制剂产品是由多种有针对性地降解日粮配方中原料的单一酶的 相似文献
994.
动物乳腺生物反应器(mammary gland bioreactor),又称动物个体乳腺表达系统,它属于转基因动物的范畴,其核心内容是通过各种转基因技术,将乳腺组织特异性启动子驱动的外源基因,在动物乳腺组织高效表达,在乳汁中生产目的产品。它是20世纪90年代初才出现的生物技术,通过回收奶就可以提取有重要价值的生物活性蛋白。在一般情况下,这种特异性表达方式更安全、可靠。本文主要简单介绍动物乳腺生物反应器的一些基本情况,以及我国的研究和产业化发展情况。1动物乳腺生物反应器的基本情况1.1定义乳腺生物反应器一般指用重组DNA技术和转基因技术,将… 相似文献
995.
996.
997.
半胱亚磺酸脱羧酶(CSD)基因在大鼠睾丸组织中的表达及其序列分析 总被引:1,自引:0,他引:1
试验根据大鼠肝脏牛磺酸生物合成关键酶——半胱亚磺酸脱羧酶(CSD)基因已知核苷酸序列,设计了1对特异的寡核苷酸引物,对提取的睾丸组织总RNA进行RT-PCR扩增,扩增出468 bp的DNA片段,在国际上首次证明CSD基因在大鼠睾丸组织中存在表达,即牛磺酸可在大鼠睾丸组织中生物合成。测定了扩增的睾丸组织CSD基因核苷酸序列,并与已知肝脏CSD基因核苷酸序列及其对应的氨基酸序列作了同源性分析。结果表明:睾丸组织CSD基因核苷酸序列同已知肝脏CSD基因核苷酸序列的同源性为99.8%,其对应氨基酸序列的同源性为100%。 相似文献
998.
999.
LI Wenjun HUANG Huilan YANG Huihu XIE Zimin CUI Huiyi HUANG Shujian ZHANG Xuelian 《中国畜牧兽医》2007,47(9):2953-2959
The aims of the experiment was to optimize the prokaryotic expression system of σC protein,prepare polyclonal antibody against σC protein of novel duck reovirus (NDRV),and evaluate the titer of the antibody.The σC gene of NDRV-DH13 strain was amplified by RT-PCR,ligated into pET-30a(+) and pET-32a(+) expression vector,constructed prokaryotic expression plasmid,which were transformed into E.coli BL21(DE3) and the expression of the σC protein were induced by IPTG.The proteins expression were analyzed by SDS-PAGE.The recombinant protein without His tag was purified by digestion,and the recombinant protein with His-tagged was purified by Ni-NTA column.Then the polyclonal antibody was obtained from rabbits which had been immunized by the purified protein without His tag.Anti-His-labeled mAb and NDRV-σC positive serum were used as primary antibodies to evaluate antibodies specificity,the antibodies titer was detected by indirect ELISA (iELISA).SDS-PAGE results showed that the molecular weight of the expression on recombinant proteins were 34 and 37 ku respectively,the proteins were highly expression.Western blotting showed that they had the specific reaction and the prepared antibodies had higher affinity with σC protein,the titer were about 1:25 600 by iELISA detection.This study successfully constructed and optimized the prokaryotic expression system of the polyclonal antibody against σC protein,laid a foundation for the further study of σC protein and the research of genetically engineered vaccine. 相似文献
1000.