白藜芦醇和褪黑素对绵羊胎儿成纤维细胞转染及卵母细胞体外成熟的影响     

姚昱君  李广栋  吴昊  马文奎  杨海  关盛宇  吕东颖  付瑶  朱天奇  姬鹏云  谭鑫星  赵万民  连正兴  张鲁  刘国世 《中国畜牧兽医》2021,48(12):4497-4507

试验旨在利用白藜芦醇(Re)和褪黑素(MT)提高绵羊胎儿成纤维细胞电穿孔转染(电转)效率、优化卵母细胞体外成熟体系,以提高转基因动物生产效率。将绵羊胎儿成纤维细胞分为6组:对照组、添加白藜芦醇高、中、低(R^-5、R^-6、R^-7)3种浓度组及白藜芦醇和褪黑素联合添加组(R^-5M^-5、R^-6M^-7),通过电转效率和细胞凋亡情况确定电转体系优化方案;通过对细胞周期、线粒体膜电位及活性氧(ROS)的检测研究其作用机制。将绵羊卵母细胞分为对照组及白藜芦醇和褪黑素(R^-5M^-5、R^-6M^-7)联合添加组,通过绵羊卵母细胞体外成熟后卵丘细胞扩展、第一极体排出及体外受精胚胎的卵裂率检测其对卵母细胞体外成熟的作用。研究结果显示,分离的绵羊胎儿成纤维细胞P3代增殖旺盛,细胞生长曲线呈典型的S型;与对照组相比,所有试验组胎儿成纤维细胞的电转效率均显著提高(P<0.05),R^-5M^-5组电转效率最高;R^-6M^-7组显著降低细胞凋亡率(P<0.05),R^-5、R^-6、R^-5M^-5和R^-6M^-7组均显著促进细胞增殖(P<0.05);R^-6、R^-7、R^-5M^-5和R^-6M^-7组G1期细胞增加,S期细胞相对减少,但差异均不显著(P>0.05);R^-6、R^-7、R^-5M^-5和R^-6M^-7组成纤维细胞内ROS水平均显著降低(P<0.05),R^-6、R^-5M^-5和R^-6M^-7组线粒体膜电位均显著增加(P<0.05);R^-6M^-7组显著促进绵羊卵丘细胞扩展、提高卵母细胞第一极体排出率和体外受精胚胎发育能力(P<0.05)。综上,白藜芦醇和褪黑素可以优化绵羊胎儿成纤维细胞电转体系,提高卵母细胞体外成熟效率,为白藜芦醇和褪黑素在转基因动物生产中的应用提供参考依据。  相似文献   

Effect of Lysine Supplement on the Digestion and Metabolism of the Rumen in Small-tail Han Sheep     

LIU Wen-jie  LUO Qiu-jiang  ZHONG Tao  CHEN Yong  PAN Rong 《中国畜牧兽医》2015,42(10):2658-2668

5 male Small-tail Han sheep with the body weight of 45 kg at 1.5 years old,fitted with permanent rumen fistula,to study of the effect of the supplement of the untreated commercial lysine on the rumen microbiocoenosis,rumen metabolism and whole body metabolism by 5×5 Latin square design (5 groups:control,control with low urea (equal nitrogen),low lysine,control with high urea (equal nitrogen),high lysine).The amounts of lysine-HCl supplement were 0,4.0 and 8.0 g/kg diet (as DM basis) in each group respectively,with two urea supplement control groups of equal amount of nitrogen.The results showed that by supplement of 4.0 and 8.0 g/kg of lysine-HCl diet (as DM basis) respectively,the voluntary intake of dry matter of sheep were increased by 5.5%(P>0.05) and 11.8%(P<0.05) respectively.The total amount of rumen bacteria were increased by 18.9%(P<0.01) and 23.9%(P<0.01) respectively,as the amount of rumen Coccus was increased by 21.2%(P<0.01) and 30.1%(P<0.01) respectively.The amount of rumen big Bacillus was decreased by 16.7%(P<0.05) and 33.3%(P<0.01) respectively.The total VFA of was increased by 9.6%(P<0.05) and 12.2%(P<0.01) respectively,as the butyric acid was increased by 12.8%(P>0.05) and 20.2%(P<0.01) respectively.The apparent digestibility of organic matter was increased by 6.4%(P>0.05) and 10.0%(P<0.05) respectively,the apparent digestibility of crude protein was increased by 7.0%(P>0.05) and 18.3%(P<0.01) respectively;And nitrogen retention was increased by 46.4%(P>0.05) and 110.7%(P<0.01) respectively.However,there was no effect of lysine supplement on the amounts of the rumen protozoa and fungi,and the concentration of rumen ammonia nitrogen.It was concluded that the supplement of untreated commercial lysine to adult sheep would increase the voluntary intake,digestibility,nitrogen retention the rumen microbiocoenosis and the total amount of rumen bacteria,especially the rumen Coccus of adult sheep.The effect of lysine supplement could not be replaced by urea supplement completely.  相似文献   

胚胎冻融技术及其在我国肉羊产业中的应用     

特日格勒  ;何小龙  ;王孟巍  ;祁云霞  ;刘永斌  ;荣威恒 《畜牧与饲料科学》2014,(7):53-56

胚胎冻融技术可使胚胎移植不受时间、地点的限制，从而达到提高胚胎移植效率的目的，研究和优化胚胎冻融技术对胚胎移植工程的发展具有重要的意义。主要对胚胎冻融技术的原理、特点及其在肉羊产业中的应用情况进行了综述，旨在阐明胚胎冻融技术对我国肉羊产业发展的重要作用。  相似文献   

绵羊FGF10基因克隆、序列分析及其在毛囊发育中的表达分析     

陈磊  袁枫  贺三刚  玛依拉  李文蓉 《中国畜牧兽医》2021,48(2):425-432

本试验旨在获得中国美利奴羊成纤维细胞生长因子10（fibroblast growth factor 10，FGF10）基因的编码区（CDS）全长序列并进行生物信息学分析，随后对FGF10基因在中国美利奴羊毛囊发育过程中的表达特征进行分析，明确其在中国美利奴羊毛囊发育过程中的表达模式，为进一步研究FGF10 mRNA表达水平与中国美利奴羊毛囊生长发育的表达调控机制奠定理论基础。采用PCR扩增获得中国美利奴羊FGF10基因CDS，并克隆到zero PCR@^TM-Blunt进行测序验证；利用实时荧光定量PCR技术检测FGF10在中国美利奴羊毛囊发育过程中的表达差异。结果表明，绵羊FGF10基因CDS长度为696 bp（序列上传GenBank，获得登录号：MT872422），编码231个氨基酸，与牛和山羊的氨基酸序列同源性达100%，存在1个信号肽和1个跨膜结构域，其为分泌通路信号蛋白；实时荧光定量PCR分析表明，FGF10基因在中国美利奴羊毛囊发育过程中均表达，在毛囊发育第85天表达最高，显著高于其他毛囊发育时期（P<0.05）。本研究获得中国美利奴羊FGF10基因完整的编码区序列和毛囊发育过程中的表达特征，生物信息学分析发现，FGF10基因编码区序列具有物种间的保守性，同时FGF10在绵羊毛囊不同发育阶段的皮肤组织中表达，由此表明，FGF10基因可能在绵羊毛囊的生长发育过程中发挥重要的生物学作用。  相似文献   

FGF4在肺癌细胞体内和体外中表达差异的研究     

李江超  袁俏冰  陈卉  黎帅  周泽启  叶宇翔  韩露  王丽京 《广西农业生物科学》2014,(3):501-504

FGF4已经被证明是癌基因,它涉及肿瘤的生长和转移,为了解FGF4的表达与肿瘤微环境的关系。我们利用FGF4抗体通过免疫组化对一名肺癌患者癌旁,癌组织,癌组织小鼠移植瘤,二次移植瘤以及原代培养的细胞爬片进行FGF4检测,探究其表达差异。通过对比癌组织与对照组（癌旁组织）,FGF4在癌巢中高表达;同样,移植瘤与二次移植瘤的癌巢中与癌旁组织比较,FGF4表达相对较高;但是将癌组织进行原代培养后,免疫组化检测细胞爬片FGF4,发现仅有5%±0.21%的肿瘤细胞表达FGF4,对照蛋白Cytokine作为肿瘤标记物,则在100%的肿瘤细胞中表达。研究提示免疫组化检测到FGF4在体内和体外表达不同,提示肿瘤细胞FGF4的表达与肿瘤微环境调控密切相关,肿瘤微环境对肿瘤细胞的FGF4的调控有着重要作用。  相似文献   

Bioinformatics Analysis of Bone Morphogenetic Protein 4 (BMP4) of Sheep     

FAN Zhen-hua  ZHANG Qiu-yue  FAN Rui-wen  REN Yu-hong 《中国畜牧兽医》2015,42(6):1370-1376

The assay was aimed to explore the biological characteristics of bone morphogenetic protein 4 (BMP4) of sheep,NCBI,DNAMAN DNAStar,TMHMM Server v.2.0,PsortⅡ,SignalP various bioinformatical softwares were used to speculate the physical and chemical properties,hydrophobic property,phosphorylation site,conservative structure domain,protein secondary structure of BMP4 protein.Also,the three-dimensional structure was forecasted with the SWISS-MODEL Workspace software.The results indicated that the BMP4 of sheep had high homologies with the BMP4 of various species.The encoded protein was a hydrophilic protein which was unstable.There was no transmembrane regions and it was likely to be located in the nucleus.What was more,there was signal peptide and eighteen phosphorylation sites.Through the forecast of functional domains,the protein had two functional domains,including the transforming growth factor-beta (TGF-beta) superfamily and TGF-beta propeptide superfamily.The result was consistent with the function of BMP4 gene family,it also demonstrated that BMP4 was a growth factor and it had the function of signal transduction.The amino acid homology between the predicted 3D structure of protein and template 3bmp.1.A was 88.29%.The bioinformatics analysis of BMP4 gene could provide reference for the further study in practice.  相似文献   

中小旅行社入境旅游与出境旅游网络营销对比分析     

朱超 《湖南农机》2015,(3):79+81

通过对中小旅行社入境旅游与出境旅游网络营销的相同处和不同处进行对比分析，把他们常用的营销方法通过举例表现出来，叙述了网络营销对出境旅游和入境旅游的意义，对旅游营销有积极作用。  相似文献   

日粮钙水平对空怀期云南半细毛羊生长性能及血清生化指标和繁殖相关激素的影响     

《中国畜牧杂志》2019,(3)

试验旨在探讨日粮钙水平对空怀期云南半细毛羊生长性能、配种前血清生化指标和繁殖相关激素的影响,为开展空怀期云南半细毛羊营养需要量研究提供参考。选用50只体况良好、体重相近、38月龄的经产2胎空怀云南半细毛羊,随机均分为5组,分别饲喂0.40%(无外源钙)、0.45%、0.53%、0.66%、0.85%5个钙水平的日粮。预试期14d,正试期30d。结果表明:0.53%钙水平组云南半细毛羊的总增重、平均日增重、平均日采食量、耗料增重比等指标相对优于其他组;0.40%钙水平日粮组的血清钙最高,血清碱性磷酸酶、甲状旁腺素、钙、磷组间差异不显著(P>0.05);繁殖相关激素各组间表现不一,0.40%钙水平组雌二醇水平最高(P>0.05)。在日粮磷水平为0.20%水平条件下,0.53%钙水平组的空怀期云南半细毛羊表现出较好的生长性能,可为临配种前生理生化和激素水平提供较好准备;增加日粮钙水平,未见对以上指标有明显的正向增强作用,可能与日粮钙磷比失衡有关。  相似文献   

阿勒泰羊生长速度与主要血液生化指标含量及尾脂Leptin基因表达关系     

麦麦提依明&#  麦麦提力  叶梦珺  候萌  王俊丽  唐安琪  向微微  柳荦  王金泉  胡燕 《中国畜牧兽医》2021,48(7):2369-2377

试验通过研究不同生长速度阿勒泰羊主要血液生化指标含量和尾脂中瘦素（Leptin）基因的表达水平，探讨阿勒泰羊生长速度与脂肪沉积之间的关系。选取300只出生时间相近的阿勒泰羊公羔，正常饲喂至6月龄，记录日增重，取平均日增重排前10%和后10%的公羔各30只，分为生长快速组（HBW）和生长慢速组（LBW），从生长快速组随机选12只分为抑制生长组（饲喂低能量饲粮以抑制其生长，HBW-75%，n=6）和生长快速对照组（饲喂标准饲粮，HBW-100%，n=6），生长慢速组随机选12只分为促进生长组（饲喂高能量饲粮以促进生长，LBW-125%，n=6）和生长慢速对照组（饲喂标准饲粮，LBW-100%，n=6）；预饲期7 d，正饲期30 d，试验结束后称重并采集血液，屠宰后采集尾部脂肪。检测血液TG、CK、TSH、T3、T4、S.S、GH、INS、PG、Leptin含量或活性及尾部脂肪Leptin mRNA和蛋白表达量，并观察尾部脂肪细胞形态学变化。结果显示，HBW-100%和LBW-100%组初体重与末体重均差异显著（P<0.05），HBW-75%和HBW-100%组初体重与末体重均无显著差异（P>0.05）；LBW-100%和LBW-125%组初体重差异显著（P<0.05），末体重无显著差异（P>0.05）。LBW-100%组的T4、S.S、Leptin、TSH、T3含量显著低于HBW-100%组（P<0.05）；LBW-125%组T3含量显著高于LBW-100%组（P<0.05）；HBW-75%组GH、PG和Leptin含量显著低于HBW-100%组（P<0.05）。LBW-125%组尾部脂肪细胞面积大于LBW-100%组，HBW-75%组小于HBW-100%组（P<0.05）。Leptin mRNA和蛋白表达量检测结果表明，HBW-100%组的Leptin mRNA表达量与LBW-100%组无显著差异（P>0.05），Leptin蛋白表达量极显著高于LBW-100%组（P<0.01）。LBW-125%组Leptin mRNA和蛋白的表达量均显著高于LBW-100%组（P<0.05）。HBW-75%组Leptin mRNA的表达量极显著低于HBW-100%组（P<0.01），Leptin蛋白表达量显著低于HBW-100%组（P<0.05）。综上所述，生长快速组与生长慢速组中，Leptin的表达量与体重和体脂有一定关联；在生长慢速组促进生长后体重和体脂显著增加，Leptin的表达量呈上升趋势；在生长快速组抑制生长后体重和体脂减少，Leptin的表达呈下降趋势。改变生长速度对Leptin的表达量会产生影响，从而改变机体的脂肪沉积状况。  相似文献   

土壤pH值对极小种群毛枝五针松生理特性的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

康洪梅  张珊珊  杨文忠  李云琴 《东北林业大学学报》2016,(6)

幼苗建成期是毛枝五针松(Pinus wangii)天然更新的关键阶段,为找出影响毛枝五针松幼苗存活的关键生态因子,采用植物生理学方法,研究在7个酸碱度土壤培育下,毛枝五针松松针超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶活性(POD)活性和脯氨酸、可溶性糖质量分数及丙二醛(MDA)摩尔质量浓度的变化。结果表明:毛枝五针松在弱碱土壤中抗逆性更强,形态观察得知其在弱碱性土壤中生长更好;生理指标测定结果表明,土壤在p H=7.69~8.42时最适宜毛枝五针松幼苗的生长发育。  相似文献