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81.
探讨不同年龄组家兔胃肠道各段CD8+T细胞的分布特征,为进一步研究CD8+T细胞的作用奠定形态学基础。采用免疫组织化学技术对不同年龄组(幼年组、青年组、老年组)家兔胃肠道内CD8+T细胞进行染色、观察及统计分析。结果显示,家兔的CD8+T细胞多呈圆形、椭圆形或呈不规则形。在不同年龄组家兔,胃肠不同部位的分布有如下特点:家兔的CD8+T细胞主要分布于胃肠道的固有层中;青年组CD8+T细胞的分布数量显著高于幼年组和老年组;各肠段之间CD8+T细胞分布的数量差异不显著,但其分布的总量按照小肠、大肠、胃的顺序依次降低。研究结果显示,CD8+T细胞在家兔小肠的分布最多,并且其数量随着年龄的增长呈现先上升后下降的趋势,青年家兔胃肠的分布最为丰富。  相似文献   
82.
The degree of intramuscular adipose tissue accumulation is one of the factors affecting meat quality. Accumulation of adipocytes is also observed under the pathological condition of skeletal muscle such as muscular dystrophy and sarcopenia. The origin of adipocytes seen in skeletal muscle is mesenchymal progenitor cells that can give rise to both adipocytes and fibroblasts. In the present study, we demonstrated that siRNA-mediated suppression of MyoD expression in rat skeletal muscle progenitor cell culture, which comprises both myogenic satellite cells and mesenchymal progenitor cells, resulted in diminished myotube formation and an unexpected spontaneous appearance of white adipocytes. Suppressing myomaker expression also resulted in complete absence of myotube formation without reducing MyoD expression, but no adipogenesis was seen in this scenario, indicating that decline in MyoD expression rather than decreased myotube formation is necessary to induce adipogenesis. In addition, spontaneous adipogenesis induced by suppressing MyoD expression in culture was inhibited by the conditioned medium from control culture, indicating that anti-adipogenic factor(s) are secreted from MyoD-positive myogenic cells. These results indicate the presence of regulatory mechanism on adipogenesis by myogenic cells.  相似文献   
83.
为初步鉴定并挖掘出猪戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)ORF3蛋白影响HepG2细胞核黄素代谢信号通路的lncRNA-mRNA调控网络,本试验通过构建腺病毒过表达载体,制备高滴度过表达腺病毒,介导猪 HEV-ORF3在HepG2细胞中实现过表达。Western blotting检测ORF3蛋白过表达成功后,运用lncRNA高通量组学测序,筛选出差异表达的lncRNA并进行靶向差异基因预测,对lncRNA靶向差异基因进行GO功能和KEGG通路富集分析,初步鉴定出与核黄素代谢信号通路相关的lncRNA-mRNA调控网络。Western blotting结果显示,在约为12 ku处出现目的条带,说明成功实现腺病毒介导猪HEV-ORF3在HepG2细胞中过表达。lncRNA高通量组学测序结果显示,共发现102个显著差异表达lncRNAs表达量上调,80个显著差异表达lncRNAs表达量下调。GO功能和KEGG通路富集分析显示,初步挖掘出lncRNA(MSTRG.13995.2)和lncRNA(MSTRG.1960.1)可能是与核黄素代谢信号通路相关的显著差异表达lncRNA,分别通过顺式调控其靶向基因APC-5和FLAD1来影响核黄素代谢信号通路。本试验初步鉴定出lncRNA(MSTRG.13995.2)-APC5和lncRNA(MSTRG.1960.1)-FLAD1可能是影响HepG2细胞核黄素代谢信号通路的lncRNA-mRNA调控网络。  相似文献   
84.
雌性生殖细胞进行减数分裂时易发生染色体分离错误而产生非整倍体卵母细胞,其受精后会产生非整倍体胚胎,导致出生缺陷或胚胎致死,是影响哺乳动物繁殖的重要因素。卵母细胞在第一次减数分裂前期发生同源染色体联会,此时DNA双链断裂引发重组。重组时缺乏交叉、重组事件数量的减少及交叉靠近端粒或着丝粒导致染色体发生同向分离或不分离,从而产生非整倍体卵母细胞。减数分裂期间,当染色体的端粒共向于同一极或没有完全附着在纺锤体微管上时,纺锤体组装检查点(spindle assembly checkpoint,SAC)被激活,E3泛素连接酶APC/Cyclome (APC/C)沉默,保护分离酶抑制蛋白(securin)和细胞周期蛋白B (cyclin B)不被降解,从而抑制分离酶和染色体的分离。直到所有染色体与纺锤体实现稳定的双极定向并正确排列到赤道板上,SAC关闭,染色体正确分离。卵母细胞中SAC蛋白缺失,导致SAC不能有效地监测端粒在纺锤体上的正确附着,发生染色体分离错误,从而产生非整倍体卵母细胞。因此,通过现代分子技术手段解析非整倍体卵母细胞所涉及的机制是保护哺乳动物生育的重要目标。作者主要介绍了卵母细胞减数分裂的特点,详细阐述了卵母细胞非整倍体发生的染色体分离错误的分子机制,以期为开发卵母细胞非整倍体的治疗手段提供参考。  相似文献   
85.
支持细胞对维持精子形成过程中的微环境起决定作用,它可以通过分泌功能、细胞间连接形成的血睾屏障功能以及吞噬功能等来促进精子的形成过程,其发育异常会导致不同程度的雄性生殖缺陷。基于支持细胞在雄性动物生殖过程中的作用,体外培养高纯度支持细胞可成为研究睾丸两大核心功能-精子发生和性激素分泌功能相关调节机制重要的细胞模型。此外,体外培养睾丸支持细胞也可作为生殖毒理学等新兴热点领域的细胞模型,为评估和研究环境因素对雄性生殖的影响提供便利。因此,作者系统地归纳、总结了目前关于动物支持细胞生物功能的研究及常用的体外分离纯化、培养及鉴定方法,以期为利用动物支持细胞开展雄性生殖领域的研究提供参考。  相似文献   
86.
为探究肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)对牛骨骼肌生长发育的作用机制,本研究前期利用定量蛋白质组学与磷酸化蛋白质组学分析野生型蒙古牛(MG.WT)和MSTN+/-蒙古牛(MG.MSTN+/-)腿臀肌肌肉组织中蛋白质水平和磷酸化修饰水平的差异变化,使用已建立的牛骨骼肌卫星细胞体外诱导成肌分化模型,检测设计合成的MSTN siRNA (si-MSTN)干扰效果;采用实时荧光定量PCR和Western blotting方法检测转染si-MSTN的增殖期(GM)和分化第3天(DM3)牛骨骼肌卫星细胞中肌动蛋白细胞骨架调节通路相关基因的mRNA和蛋白水平的表达变化,研究敲低MSTN表达对肌动蛋白细胞骨架调节通路的影响。结果显示,在MSTN+/-蒙古牛肌肉组织中共鉴定到16个肌动蛋白细胞骨架调节通路相关基因表达丰度上调;转染si-MSTN细胞中的MSTN表达水平极显著降低(P<0.01);在转染si-MSTN的GM期牛骨骼肌卫星细胞中,肌动蛋白细胞骨架调节通路相关基因ENAH、ACTN4和Cdc42的mRNA水平均显著升高(P<0.05),PFN1、RhoA和ACTN4的蛋白水平均显著或极显著升高(P<0.05;P<0.01);在转染si-MSTN的DM3牛骨骼肌卫星细胞中,ENAH、CFL1、SCINCdc42基因mRNA水平均显著升高(P<0.05),RhoA基因mRNA水平极显著升高(P<0.01),PFN1和ACTN4的蛋白水平均显著升高(P<0.05)。结果表明,干扰MSTN可以促进肌动蛋白细胞骨架调节通路相关基因的表达,探明了MSTN可能通过介导肌动蛋白细胞骨架调节通路影响牛骨骼肌卫星细胞增殖和成肌分化的分子机制,为进一步研究MSTN对牛成肌分化的调控机制提供参考。  相似文献   
87.
In order to obtain the cloned sheep using bone marrow mesenchymal stem cells(BMSCs)as the donor cells,the BMSCs of sheep were chosen and reconstructed embryos were built to transfer.10 published microsatellite markers were chosen,and the DNA samples from clone sheep,donor cells and surrogate ewes were amplified,and the relationship of father-son(RCP)was analyzed using the Quantity One for genotyping.The results showed that the reconstructed embryos were successfully built for electric fusion using sheep BMSCs as nuclear donor,and making nuclear transplantation into enucleated mature oocytes of which the fusion rate was 80.62%.20 surrogate ewe were chosen to be implanted with the reconstructed embryos at morula stage by implant surgery,and 5 lambs were born and only 3 were survived.The genotype of cloned sheep was in line with the dornor cell and the RCP were more than 99.999%.In conclusion,the first clone sheep were obtained successfully by using BMSCs as a nuclear donor in this experiment.  相似文献   
88.
89.
Previous studies have established a bovine mammary gland epithelia cells in vitro model by the adenovirus-mediated telomerase (hTERT-bMGEs). The present study was conducted to confirm whether hTERT-bMGEs were effective target cells to improve the efficiency of transgenic expression and somatic cell nuclear transfer (SCNT). To accomplish this, a mammary-specific vector encoding human lysozyme and green fluorescent protein was used to verify the transgenic efficiency of hTERT-bMGEs, and untreated bovine mammary gland epithelial cells (bMGEs) were used as a control group. The results showed that the hTERT-bMGEs group had much higher transgenic efficiency and protein expression than the bMGEs group. Furthermore, the nontransgenic and transgenic hTERT-bMGEs were used as donor cells to evaluate the efficiency of SCNT. There were no significant differences in rates of cleavage or blastocysts or hatched blastocysts of cloned embryos from nontransgenic hTERT-bMGEs at passage 18 and 28 groups (82.8% vs. 81.9%, 28.6% vs. 24.8%, 58.6% vs. 55.3%, respectively) and the transgenic group (80.8%, 26.5% and 53.4%); however, they were significantly higher than the bMGEs group (71.2%, 12.8% and 14.8%), (p < 0.05). We confirmed that hTERT-bMGEs could serve as effective target cells for improving development of somatic cell cloned cattle embryos.  相似文献   
90.
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