小麦PDS基因VIGS载体构建体系的优化及验证     

南富波  李淼淼  王昊龙  刘伟  李卫华 《麦类作物学报》2014,34(3):285-291

为在小麦上进行VIGS体系的优化,根据GenBank中公布的小麦PDS基因序列(FJ517553.1)设计特异引物,利用RT-PCR技术克隆PDS基因片段,以BSMV:γ-2a为原载体,通过酶切将原载体中的2a基因片段替换为PDS基因片段,构建小麦PDS基因的VIGS重组载体BSMV:γ-PDS。经测序确认,其与GeneBank中登录的小麦PDS基因序列同源性为97%。重组载体经本实验室简化改良的方法进行转录模板的处理。与试剂盒所提供的方法相比,本研究将RNA酶孵育处理步骤整合入质粒提取的步骤中,省略了SDS-蛋白酶K孵育处理等步骤,降低了引入新杂质的风险,同时降低了实验成本,节省了时间和精力。体外转录的电泳结果表明,体外转录反应的产物浓度大,条带单一,可用于接种实验。抽穗期小麦穗部接种实验及实时定量PCR的结果均表明,小麦内源PDS基因被有效沉默,证实了优化的重组载体BSMV:γ-PDS体系的有效性,奠定了利用VIGS载体侵染抽穗期小麦体系优化的基础。  相似文献   

纤维素、滤纸纤维分别与淀粉混合瘤胃体外发酵的比较   总被引：1，自引：0，他引：1  

王梦芝  陈明  王洪荣  李国祥  张洁 《家畜生态学报》2007,28(4):36-39

以3只瘘管羊作为瘤胃液供体,用体外法研究可溶性淀粉和纤维素与滤纸纤维不同NSC/SC水平组合的体外发酵规律.底物使用可溶性淀粉与纯纤维素、可溶性淀粉与滤纸纤维,NSC/SC比例为:100:0、70:30、50:50、30:70、0:100.结果表明:不同的NSC/SC水平组合比较,以70:30组发酵状态最佳;滤纸纤维较纤维素总体发酵水平为低.  相似文献   

不同分子量的甲壳低聚糖对脂质吸附作用研究     

张婷婷  王茵  刘淑集  苏永昌  陈达文  吴成业 《福建水产》2011,33(1):21-25

本文通过体外模拟实验比较不同分子量范围的甲壳低聚糖对脂质的吸附效果.结果表明,不同分子量的甲壳低聚糖对各类脂质都具有较好的吸附性.其中,M_w=5kDa～10kDa的甲壳低聚糖对油脂、胆酸盐和胆固醇的吸附效果最好,对油脂的吸附率为5.3%,对脱氧胆酸钠和牛磺胆酸钠的吸附率分别为90.0%和71.1%,对胆固醇吸附率达8...  相似文献   

文心兰EMS离体诱变及再生苗RAPD检测   总被引：2，自引：0，他引：2  

崔广荣  张子学  张从宇  胡能兵  隋益虎  李杰勤 《热带作物学报》2011,32(2):261-268

采用3种浓度的EMS对离体培养的文心兰类原球茎薄切片进行不同时间的诱变处理研究.发现EMS使部分薄切片褐化死亡,再生类原球茎的生长受到抑制,再生苗数量减少;EMS的伤害作用随诱变剂浓度的提高和处理时间的延长而加重,但对试管苗的生长影响并不大.采用10条RAPD引物进行的PCR检测结果表明,经EMS处理的再生苗DNA序列...  相似文献   

川东獐牙菜体外高效再生体系的建立     

于叶霞  林虎绒  王元忠  黄衡宇  李鹂 《核农学报》2020,34(11):2444-2451

为了构建川东獐牙菜(Swertia davidii Franch.)高效稳定的再生体系,以川东獐牙菜带叶茎尖、带芽茎段和叶片为材料,在单因素试验的基础上,通过完全组合及L₉(3⁴)正交试验,探究不同激素对其离体培养的影响。结果表明,川东獐牙菜3种外植体中,叶片适宜作为间接器官发生材料,在MS+2.0 mg·L^-1 6-BA+1.5 mg·L^-1 KT培养条件下,培养7 d便可见愈伤组织从切口处产生,培养30 d后即可分化出大量丛芽;不定芽在相同培养基中培养30 d后,增殖系数可达8.75。带芽茎段则适宜直接器官发生途径,其在MS +2.0 mg·L^-1 6-BA+1.0 mg·L^-1 NAA中培养7 d后,节上腋芽开始萌动,培养30 d后腋芽发生系数可达4.06;试管苗适宜的生根培养基为MS + NAA 0.05 mg·L^-1,培养30 d后即可获得再生植株,生根率为100%;生根苗经过炼苗,移栽30 d后成活率达90%以上。在川东獐牙菜的离体培养中,间接器官发生途径较直接器官发生途径效率更高。本研究通过叶愈伤组织-不定丛芽途径建立了川东獐牙菜高效再生体系,为保护其野生资源和种苗繁育提供了技术支撑,也为其遗传转化奠定了试验基础。  相似文献   

马哈利樱桃离体茎尖超低温保存的研究   总被引：18，自引：3，他引：15  

赵艳华  吴永杰  周明德 《园艺学报》1999,26(6):402-403

用玻璃化法超低温保存马哈利樱桃;切取经５℃低温驯化３０d的离体茎尖置于固体培养基 （ＭＳ＋０．７mol/Ｌ蔗糖）预培养２４h,在含１mＬ５０％甘油＋５０％蔗糖的保护液中处理８０min后浸入液氮。２５℃水浴快速化冻２min,然后接种到标准培养基上。２１d后调查,茎尖存活率达８４．６％。  相似文献   

矮型猕猴桃(Actinidia chinensis)"赣猕5号" 的离体培养研究     

蔡祖国  徐小彪  赵一鹏  曾志云 《江西农业大学学报》2006,28(3):336-340

对中华猕猴桃矮型种质“赣猕5号”进行了离体培养与快繁研究。以带腋芽的茎段为外植体,在MS 6-BA1,0 mg/L NAA0.1 mg/L培养基上进行诱导。诱导出的不定芽分别在MS ZT1.0 mg/L 6-BA 1.0mg/L NAA0.2 mg/L IBA0.1 mg/L和W h ite IBA0.5 mg/L培养基上进行增殖和生根培养,增殖系数可达4.6,生根率可达94%。完整小植株经炼苗、移栽后的最终成活率为95%左右。  相似文献   

薰衣草茎段再生体系的建立   总被引：2，自引：1，他引：1  

何家涛  王会  董珍文  赵劲松 《江西农业学报》2006,18(4):91-93

以薰衣草带芽茎段为外植体,探讨不同激素种类与水平等因素对其愈伤诱导、不定芽分化、增殖与不定根形成的影响,并筛选了薰衣草试管苗过渡移栽的适宜基质等。试验结果表明:不定芽启动培养以MS+BA1.0~2.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L为宜;继代增殖以MS+BA1.0~2.0mg/L+IBA0.25mg/L+GA1.0mg/L+蔗糖30g/L+琼脂6.5g/L为宜;不定根分化以White+IBA0.4mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5g/L或White+NAA0.8mg/L+蔗糖20g/L+琼脂6.5 g/L为宜。  相似文献   

Effects of glutathione treatments during sperm washing and in vitro fertilization on the in vitro early development of embryos of Japanese Black cattle     

Tomoko ITAHASHI  Toshinori OIKAWA  Takashi NUMABE 《The Journal of reproduction and development》2022,68(1):74

This study was conducted to examine the effects of adding glutathione (1 mM) to media used for sperm washing and in vitro fertilization (IVF) on the improvement of early development of embryos produced using cryopreserved spermatozoa of the less IVF-competent bull (the one considered unqualified as spermatozoa supplier for the production of bovine blastocysts using IVF). The cryopreserved spermatozoa of this bull were characterized by normal motility and lower ATP content and blastocyst productivity than those of IVF-competent bulls. The addition of glutathione to the sperm washing medium was more effective in improving the productivity of blastocysts and ATP content than the addition of glutathione to the IVF medium or no glutathione addition at all (control). These results suggest that this simple method may be used to improve the potential of cryopreserved spermatozoa of less IVF-competent bulls to fertilize oocytes in vitro and to induce normal embryonic development after fertilization.  相似文献   

不同水平大豆寡糖(SBOS)对生长绵羊瘤胃发酵的影响     

刘光斌  刘兵  张学峰  瞿明仁  高民  张爱忠  卢德勋 《江西农业大学学报》2007,29(6):871-875

采用体外批次培养法,研究在日粮中添加不同水平SBOS对绵羊瘤胃发酵功能的影响。SBOS的添加水平分别为基础日粮的0,0.4%,0.8%,1.2%,1.6%和2.0%等6个水平,即1个对照组(0水平组)5个试验组,每个组3个重复。结果表明:体外培养24 h,日粮中添加SBOS可以增加瘤胃液NH3-N、丙酸及总VFA、MCP浓度,提高培养底物NDF降解率,降低瘤胃液pH值、乙/丙比值,对瘤胃产气量、瘤胃液乙酸、丁酸浓度影响不显著。应用综合评定指标(MFAEI)对产气量、pH、MCP浓度、总VFA浓度、NH3-N浓度和NDF含量进行综合评定,得出添加量为1.2%的SBOS更有利于调控瘤胃发酵。  相似文献