溶藻细菌F8与藻毒素降解菌T1的原生质体融合研究     

张安妮  沈红池  陈雪珍  周新程  张文艺 《湖北农业科学》2017,56(6)

为制备出兼具溶藻及降解藻毒素(MC-LR)的双效工程菌,研究不同的亲本原生质体灭活方式、不同PEG浓度、pH以及作用的温度对原生质体融合的影响,探讨溶藻细菌F8与藻毒素降解菌T1菌株的原生质体融合的适宜条件。结果表明,对F8菌株的原生质体采用45℃热灭活、T1菌株的原生质体紫外灭活,采用pH为8.0的30%的PEG溶液,融合温度为30℃,原生质体融合率可达28.17%。  相似文献   

致病性大肠杆菌苗用菌株的原生质体融合的研究     

苟想珍  党岩  孙春香  马志宏  杨增歧  王晶珏  陈德坤 《畜牧兽医杂志》2010,29(5):36-39

对筛选的5株大肠杆菌(E2:O2、E6:O78、E7:O8、E9:O9、E22:O138)进行药敏试验以及致病性大肠杆菌原生质的制备、融合和筛选试验。结果表明:①5株大肠杆菌对多种抗菌素存在抗药性,并且这种抗药性能进行培育,同时,在原生质的融合过程中能递进;②大肠杆菌原生质体选择的最佳组合是:溶菌酶2.0 g/L,处理时间是20 m in;③大肠杆菌的融合率在10-8左右,大肠杆菌之间的融合率为10-6左右;共选出3株融合菌株为E2-E6、E6-E7和E2-E22,各融合株的生化特征介于起源菌株的生化特征之间,有2株融合株的抗原特征含原菌株各自的抗原成分。  相似文献   

草地早熟禾新格莱德胚性愈伤组织原生质体培养及植株再生的研究   总被引：7，自引：0，他引：7  

赵小强  马晖玲  林栋  周万海  吴翔 《草业学报》2010,19(2):55-60

以草地早熟禾品种——新格莱德成熟种子为供试材料,在含3.0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、0.5mg/L6-苄氨基嘌呤(6-BA)的MB₅培养基中进行胚性愈伤组织诱导的培养。并从生长了7～9个月的胚性愈伤组织中分离出原生质体,将该原生质体置于KM₈P培养基(含3.0mg/L2,4-D、0.5mg/L6-BA、100mg/L水解酪蛋白、100mg/L水解乳蛋白、1%蔗糖、0.4mol/L甘露醇)中进行了液体浅层培养。结果表明,新格莱德原生质体在上述KM₈P培养基中培养3d后出现第1次细胞分裂,2～3周后形成小细胞团,此时添加低渗培养液2～3次,小细胞团持续分裂并形成愈伤组织。当愈伤组织块长至3～5mm时,转入固体培养基MS+3.0mg/L2,4-D+0.5mg/L6-BA和MS+0.5mg/L萘乙酸(NAA)+5.0mg/L6-BA上进行培养,使其细胞增殖和分化,且逐步形成完整的植株。  相似文献   

The ethylene 2 receptor gene as a robust molecular marker for intergeneric somatic hybrids between Petunia and Calibrachoa     

C. Rode  T. Winkelmann  L. Meyer  T. Debener 《Plant Breeding》2010,129(4):448-453

  相似文献   

不同酶解条件对普通红豆草子叶原生质体分离的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈爱萍  罗玉鹏  王玉祥  张博 《新疆农业大学学报》2010,33(2):116-119

以普通红豆草子叶为材料,研究了预处理、酶液组合和渗透压浓度等因子对其原生质体分离效果的影响。结果表明,子叶在含有0．70mol／L甘露醇的CPW溶液中预处理60min,获得的原生质体产量、存活率均高于其他预处理;酶液组合为1．0％纤维素酶＋0．8％果胶酶＋0．5％离析酶,25℃黑暗条件下酶解6h可获得大量有较高活力的原生质体;酶解液中添加浓度为0．55mol／L的甘露醇较适合原生质体分离。  相似文献   

酵母菌属间杂交融合子筛选及其特性研究     

陈武军  包伟霞  许旭萍  陈由强 《安徽农学通报》2010,16(14):48-50,78

通过对酿酒酵母(糖蜜酒精生产菌种)和耐热的马克斯克鲁维酵母原生质体融合,筛选到一株产酒率、耐热性状较两亲株有所提高的融合子R36,并测定了R36最适生长温度、生长曲线、致死温度等生理特性,以及耐酒精浓度、耐糖浓度等发酵性能。  相似文献   

预处理条件对石斛兰叶片原生质体分离的影响     

罗丽华  严虹羽  林尤河  韩宏丽 《广西园艺》2010,21(3):10-12

试验研究了不同预处理条件对石斛兰叶片原生质体分离的影响,结果表明：预处理可以提高原生质体的产量,石斛兰叶片原生质体分离最佳预处理方法为：12 h黑暗条件萎蔫处理,0.4mmol/L CaCl2浸泡16 h,0.5 mol/L甘露醇浸泡16 h。  相似文献   

串珠镰刀菌的原生质体制备研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

洪伟雄 陶红许丽萍  鲁国东 《中国农学通报》2011,27(24):292-296

通过观察离心所产生沉淀的松紧度、原生质体复苏的再生率、离心后液体的OD值来研究甘蔗梢腐病病原菌--串珠镰刀菌的原生质体制备技术。文中对液体高度、离心力、离心管大小、离心机升速与减速的快慢、不同洗涤剂等因素对原生质体活性、沉淀松紧度及壁效应的影响进行研究。对不同酶浓度及不同酶系组成对原生质体产率也进行了影响。此外,还介绍了一种离心管平衡的方法。研究结果认为：10 mL 0.1g/mL溶壁酶对0.5 g串珠镰刀菌菌丝进行裂解可以得到大量原生质体;进行裂解时使用溶壁酶与崩溃酶混合则可以获得更多的原生质体。以1 mol/L山梨醇或1.2 mol/L KCl洗涤沉淀并再离心, 使用底部较小的离心管和较少量的液体,并缓慢减速停止离心,有利于原生质体沉淀且能避免沉淀松散。  相似文献   

双亲灭活原生质体融合技术在草菇耐低温菌株选育上的应用     

陈建中  祝子坪  吴潇  何建华  蒋玮  王金斌  唐雪明 《中国农业科技导报》2013,15(5):166-172

为了选育耐低温草菇菌株,以草菇V23、V3552为亲本,采用酶解法制备原生质体,用紫外诱变、化学诱变两种方法对草菇菌株进行诱变,筛选到耐低温的突变株;然后利用紫外灭活（20 W,30 cm,110 s）和热灭活（50℃ 3 min）的双亲灭活标记法对突变株进行化学融合,结果表明在400 g/L的PEG6000、pH 8.0、融合时间30 min和融合温度32℃的条件下融合率最高,达到0.517%, 共获得200个融合子。经过0℃低温筛选,最终获得15株草菇耐低温菌株,菌丝在0℃的耐冻能力提高了4.5倍。经出菇实验证明其子实体与出发菌株相比具有明显的耐低温性,液化现象明显推迟,说明该方法筛选出的菌株具有进一步应用开发的价值。  相似文献   

水稻纹枯病菌（Rhizoctonia solani AG1 IA）原生质体的制备和再生     

秦蔚  李成云  杨根华  董文汉 《云南农业大学学报(自然科学版)》2013,28(2):270-274

 由于立枯丝核菌不产生无性孢子,为研究纹枯菌的致病机制带来了障碍,但可以通过制备纹枯菌的原生质体,利用根癌农杆菌介导转化的方法,建立突变体库,为后续研究打下基础。试验利用Lysing enzyme（from Trichoderma harzianum）裂解水稻纹枯病菌获得原生质体,通过摸索纹枯病菌的菌龄、裂解时间、裂解液的pH值3个重要因素,得到水稻纹枯病菌原生质体的最佳制备和再生条件,并且在细胞壁再生实验中,改进细胞壁再生的培养方式,最终制得原生质体,并成功使其再生。  相似文献