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82.
对筛选的5株大肠杆菌(E2:O2、E6:O78、E7:O8、E9:O9、E22:O138)进行药敏试验以及致病性大肠杆菌原生质的制备、融合和筛选试验。结果表明:①5株大肠杆菌对多种抗菌素存在抗药性,并且这种抗药性能进行培育,同时,在原生质的融合过程中能递进;②大肠杆菌原生质体选择的最佳组合是:溶菌酶2.0 g/L,处理时间是20 m in;③大肠杆菌的融合率在10-8左右,大肠杆菌之间的融合率为10-6左右;共选出3株融合菌株为E2-E6、E6-E7和E2-E22,各融合株的生化特征介于起源菌株的生化特征之间,有2株融合株的抗原特征含原菌株各自的抗原成分。 相似文献
83.
草地早熟禾新格莱德胚性愈伤组织原生质体培养及植株再生的研究 总被引:7,自引:0,他引:7
以草地早熟禾品种——新格莱德成熟种子为供试材料,在含3.0mg/L2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)、0.5mg/L6-苄氨基嘌呤(6-BA)的MB5培养基中进行胚性愈伤组织诱导的培养。并从生长了7~9个月的胚性愈伤组织中分离出原生质体,将该原生质体置于KM8P培养基(含3.0mg/L2,4-D、0.5mg/L6-BA、100mg/L水解酪蛋白、100mg/L水解乳蛋白、1%蔗糖、0.4mol/L甘露醇)中进行了液体浅层培养。结果表明,新格莱德原生质体在上述KM8P培养基中培养3d后出现第1次细胞分裂,2~3周后形成小细胞团,此时添加低渗培养液2~3次,小细胞团持续分裂并形成愈伤组织。当愈伤组织块长至3~5mm时,转入固体培养基MS+3.0mg/L2,4-D+0.5mg/L6-BA和MS+0.5mg/L萘乙酸(NAA)+5.0mg/L6-BA上进行培养,使其细胞增殖和分化,且逐步形成完整的植株。 相似文献
84.
85.
不同酶解条件对普通红豆草子叶原生质体分离的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
以普通红豆草子叶为材料,研究了预处理、酶液组合和渗透压浓度等因子对其原生质体分离效果的影响。结果表明,子叶在含有0.70mol/L甘露醇的CPW溶液中预处理60min,获得的原生质体产量、存活率均高于其他预处理;酶液组合为1.0%纤维素酶+0.8%果胶酶+0.5%离析酶,25℃黑暗条件下酶解6h可获得大量有较高活力的原生质体;酶解液中添加浓度为0.55mol/L的甘露醇较适合原生质体分离。 相似文献
86.
87.
88.
串珠镰刀菌的原生质体制备研究 总被引:1,自引:1,他引:0
通过观察离心所产生沉淀的松紧度、原生质体复苏的再生率、离心后液体的OD值来研究甘蔗梢腐病病原菌--串珠镰刀菌的原生质体制备技术。文中对液体高度、离心力、离心管大小、离心机升速与减速的快慢、不同洗涤剂等因素对原生质体活性、沉淀松紧度及壁效应的影响进行研究。对不同酶浓度及不同酶系组成对原生质体产率也进行了影响。此外,还介绍了一种离心管平衡的方法。研究结果认为:10 mL 0.1g/mL溶壁酶对0.5 g串珠镰刀菌菌丝进行裂解可以得到大量原生质体;进行裂解时使用溶壁酶与崩溃酶混合则可以获得更多的原生质体。以1 mol/L山梨醇或1.2 mol/L KCl洗涤沉淀并再离心, 使用底部较小的离心管和较少量的液体,并缓慢减速停止离心,有利于原生质体沉淀且能避免沉淀松散。 相似文献
89.
M. BARRET L. DELGADILLO-MIRQUEZ E. TRABLY N. DELGENES F. BRAUN G. CEA-BARCIA J. P. STEYER D. PATUREAU 《土壤圈》2012,22(4):508-517
Knowledge of cellular metal homeostasis will provide a better understanding of the mechanisms involved in metal tolerance and hyperaccumulation in metal-hyperaccumulating plants. Energy dispersive X-ray spectrometry (EDS) was used to determine the localization of cadmium (Cd) in leaves of the Zn/Cd hyperaccumulator Picris divaricata which had a shoot Cd concentration of 565 mg kg 1 after 2 weeks of growth in solution culture supplying 10 μmol L-1 CdCl2 . The results indicated that Cd was distributed mainly in the trichomes, upper and lower epidermis and bundle sheath cells, with a relatively low level of Cd in mesophyll cells. Mesophyll protoplasts isolated from leaves remained viable after 24 h exposure to CdCl2 at a concentration up to 1 mmol L-1 , indicating their high tolerance to Cd. The intracellular Cd was visualized by staining with Leadmium Green dye, a cellular permeable Cd fluorescence probe. The results showed that the majority of protoplasts (> 82%) did not accumulate Cd, with only a minority (< 18%) showing Cd accumulation. In the Cd-accumulating protoplasts, Cd accumulation was depressed by the addition of Fe2+ , Mn2+ and the metabolic inhibitor carbonyl cyanide m-chlorophenylhydrazone (CCCP), but not by Ca 2+ or Zn2+ . Furthermore, the entire process of Cd uptake from external solution into the cytoplasm and subsequent sequestration into vacuoles was successfully recorded by confocal images. These results suggested that reduced cellular Cd accumulation and efficient Cd vacuolar sequestration in mesophyll cells might be responsible for cellular Cd tolerance and distribution in the leaves of P. divaricata. 相似文献
90.
周复根 《西南大学学报(自然科学版)》1989,11(3):295-298
用含有糖原的聚丙烯酰胺凝胶亲和电泳技术,显示悬浮培养的Syca—more(Acer pseudoplatanus L.)细胞淀粉体含有亲和力低的磷酸化酶类型(质粒类型)。蛋白质印迹法试验表明,这种磷酸化酶与马铃薯磷酸化酶的抗体发生交叉反应。这与前人报道的菠菜叶绿体和马铃薯的磷酸化酶相似,属于同一类型的磷酸化酶。 相似文献