甘蓝SRK底物蛋白基因的克隆与序列分析          下载免费PDF全文

赵永斌  朱利泉 《西北农业学报》2007,16(6):102-106

采用PCR、3’RACE以及其他分子生物学方法,以甘蓝基因组DNA和柱头cDNA为模板对SSP基因进行扩增克隆,得到长度分别为778 bp和825 bp的基因片段。序列分析表明,甘蓝SSP基因不包含内含子,SSP核苷酸序列与拟南芥肽酶M28家族蛋白有同源性,序列相似性达到67.4%,两者的氨基酸序列相似性达到62.7%,而且都含有一个TFR_dimer结构域,推测SSP蛋白极有可能与在自交不亲和过程中受ARC1作用而泛素化了的某一未知蛋白的降解相关。  相似文献   

内蒙古绒山羊Homeobox基因片段的克隆与序列分析     

张燕军  尹俊  梁永厚  李荣  刘弈弈  张俊霞  席海燕  刘志红  李金泉 《江西农业大学学报》2006,28(6):919-922

根据已公布的Hom eobox基因氨基酸序列保守区设计简并引物,利用PCR技术从内蒙古绒山羊血液基因组DNA中扩增Hom eobox基因家族成员。目的基因片段纯化后连接到pGEM-T载体上,经鉴定得到重组质粒。将110个重组质粒进行测序,测序结果通过与GenBank中序列比对分析,确定86条序列为Hom eobox基因,得到14个Hom eobox基因家族成员:Hoxa4,Hoxa5,Hoxa6,Hoxa7,Hoxb1,Hoxb2,Hoxb3,Hoxb6,Hoxb7,Hoxc6,Hoxd1,Hoxd3,Gbx1,Gbx2。每个基因片段由117个核苷酸组成,编码39个氨基酸。氨基酸序列非常保守,和其他物种的同源性非常高。  相似文献   

云南紫苏的种子DNA提取和RAPD引物筛选   总被引：2，自引：0，他引：2  

龙雯虹  郭凤根  王仕玉 《云南农业大学学报(自然科学版)》2002,17(2):109-111

 以保存多年的云南紫苏种子为材料,对其DNA提取和RAPD引物筛选进行了研究。结果表明:从活力很低的紫苏种子提取的DNA也有较高的质量,可以用于RAPD分析;从86个随机引物中筛选出了42个显示紫苏遗传差异的多态性引物。  相似文献   

热收缩带补口材料底漆性能的试验比对     

杨明新  曹轶辉  赵忠刚  董彬 《油气储运》2013,32(7)

管道防腐补口质量除了受施工影响外,很大程度上取决于热收缩带补口材料自身的质量,其直接决定了管道整体防腐的安全.结合当前收缩带补口材料国内外标准中有关测试参数及其指标的相关规定,制定并完善了收缩带补口材料的试验比对方案,对收集到的国内外主流生产厂商的8种收缩带材料,依据统一的规则进行编号,按照底漆的厚度、剪切强度、底漆固含量及吸水率、阴极剥离、粘结强度等多项指标对试验材料进行比对分析,并据此提出了对现行标准相关指标的修订建议.  相似文献   

M13分子标记快速区分树木溃疡病原真菌的种类     

王庆灵  崔建州  赵嘉平 《河北农业大学学报》2013,(1):74-79

树木溃疡病菌具有寄主多样性、危害症状复杂且分布广泛的特点,快速简便地区分真菌类别是杨树溃疡病研究及防治中需要解决的重要问题。在对树木溃疡病菌的遗传多样性研究,发现以M13为引物的PCR扩增可以在不同的种类之间产生稳定分化的带型。因此,本研究分离了43株18种树木溃疡病相关真菌,并且对这些菌株进行rDNA-ITS序列测定及M13-PCR。结果显示,M13带型差异与真菌的特定种类相对应。因此,认为M13分子标记可以准确快速地鉴定、区分树木溃疡病菌。  相似文献   

Development of a multiplex allele‐specific primer PCR assay for simultaneous detection of QoI and CAA fungicide resistance alleles in Plasmopara viticola populations     

Yoshinao Aoki  Yosuke Hada  Shunji Suzuki 《Pest management science》2013,69(2):268-273

BACKGROUND: DNA‐based diagnosis has become a common tool for the evaluation of fungicide resistance in obligate phytopathogenic fungus Plasmopara viticola. RESULTS: A multiplex allele‐specific primer PCR assay has been developed for the rapid detection of fungicide resistance in P. viticola populations. With this assay, a glycine‐to‐alanine substitution at codon 143 of the P. viticola cytochrome b gene, which conferred QoI fungicide resistance, and a glycine‐to‐serine substitution at codon 1105 of the P. viticola cellulose synthase gene PvCesA3, which conferred CAA fungicide resistance, were detected simultaneously. CONCLUSION: It is suggested that the present assay is a reliable tool for the rapid and simultaneous detection of QoI and CAA fungicide resistance alleles in P. viticola populations. The assay required only 2 h from the sampling of symptoms to the detection of resistance alleles to both fungicides. Copyright © 2012 Society of Chemical Industry  相似文献   

重复序列设计原核细胞差异显示RT-PCR引物研究进展     

李影  钱爱东 《农业生物技术学报》2007,15(2):337-340

由于原核细胞mRNA3'端不存在ploy(A)结构,因而原核细胞DDRT-PCR引物设计不同于真核细胞。尽管不能根据oligo(dT)设计引物,但利用全基因中高度分散重复的短序列或回文序列却能有效地克服mRNA分子结构影响,最大限度地扩增全长cDNA。并且这两种引物设计方法还可以提高RNA指纹图谱的重复性,降低反应的假阳性,为原核细胞DDRT-PCR引物设计提供新的思路。  相似文献   

家蚕丝腺组织Actin3引物非特异性扩增片段的鉴定及A3引物扩增条件的优化     

柴春利  李玉欣  孟勐  左伟东 《蚕学通讯》2009,29(4):7-12

肌动蛋白基因3（Actin3）是家蚕分子生物学研究中检测组织cDNA模板质量常用的标志基因之一。我们在用实验室通用的Actin3引物扩增检测家蚕不同茧色品种（白血白茧品种夏芳、金色茧品种金一、黄血白茧品种03—000、锈色茧品种03—520）中肠、血液、丝腺组织cDNA时,发现以不同茧色品种丝腺组织cDNA为模板都能扩增出一条非特异性的小片段,而在中肠和血液组织cDNA的扩增产物中不存在。本研究对该丝腺特异的扩增小片段扩增产物进行了克隆鉴定,分析了其出现的原因,并探索了A3引物扩增的最佳扩增条件。  相似文献   

亲本未知的棉花F₁杂种及其F₂单株的SSR分子鉴定     

付小琼  叶武威 《分子植物育种》2012,(5):600-606

在棉花品种区域试验中,杂交种纯度的分子检测一直是比较困难的课题,尤其是在亲本未知的情况下,杂交种的纯度的分子检测研究尚未见报导。本研究利用17对SSR核心引物对参试品种邯6402的F1进行纯度检测,SSR标记纯度达100%,17对引物中有12对呈现共显性,5对引物为非共显性。同时,构建了F1的SSR指纹图谱,以此可以鉴定邯6402的真实性。继续用这些引物对F2的44株棉苗进行检测,F2群体棉苗均有不同程度的分离,绝大部分基因型为杂合体,许多位点显示共显性,且共显性位点互不相同,在分子水平上验证了F2群体的杂合状态。应用这一套SSR核心引物,能够在室内鉴定棉花杂交种的真实性和纯度,还能够鉴别是F1杂交种还是F2分离群体,比对杂交种的指纹图谱能检测出F1中掺杂成分。  相似文献   

利用分子标记EPT11_(900)辅助甘蓝显性雄性不育基因转育     

王晓武  方智远 《中国蔬菜》1998,1(6):1-0

利用与甘蓝显性雄性不育基因（Ｍｓ）连锁的延长随机引物扩增ＤＮＡ（ＥＲＰＡＤ）标记ＥＰＴ１１９００对３３个甘蓝自交系的多态性进行了分析。ＥＰＴ１１９００主要分布在各种早熟甘蓝中,很少存在于鸡心类型或晚熟扁圆类型甘蓝中。该结果表明：它可用于辅助大多数鸡心型或晚熟扁圆类型甘蓝的Ｍｓ基因转育;ＥＰＴ１１９００在辅助两个甘蓝自交系回交三代及两个青花菜自交系回交一代的Ｍｓ基因转育中,预测的准确性超过９０％。  相似文献