不同养殖阶段罗非鱼肠道微生物多样性的动态分析          下载免费PDF全文

佟延南  李芳远  李忠琴  赵光军  李高俊  王德强 《南方农业学报》2018,49(7):1415-1422

[目的]动态分析不同养殖阶段罗非鱼肠道微生物的多样性,为科学利用益生菌对罗非鱼肠道和养殖环境中微生态结构进行定向改良提供理论依据.[方法]分别于罗非鱼养殖周期的前期(C1,4月)、中期(C2,6月)和后期(C3,8月)采集罗非鱼肠道样品,以试剂盒提取肠道总细菌DNA,经PCR扩增后对16S rDNA的V3~V4区进行高通量测序,并对肠道微生物进行物种组成差异分析.[结果]各样品测序中Tag数量平均为60694条,测序长度平均为440 bp,OTU Shannon稀释曲线趋于平缓并达到平台期;平均OTU数量排序为C2期(9376.125)>C3期(8591.375)>C1期(6567.667),chao1、ACE、Shannon和npShannon指数也表现出相同规律,但Simpson指数的排序为C2期(0.0405716)C3期>C1期.在各养殖阶段微生物种群数量占2.00%以上有11个门和14个属,优势菌群有所差异,随养殖周期的推移,乳球菌属所占比例逐渐下降,芽孢杆菌属、假单胞菌属和分支杆菌属呈先增后减的变化趋势,梭菌属和邻单胞菌属在养殖前期所占比例最高.此外,不同地区相同养殖阶段的罗非鱼肠道微生物丰度差异标记类群存在一定差异,但也存在相似之处,如养殖前期以栖水菌属最具代表性,中期主要以芽孢杆菌科丰度最高.[结论]不同养殖阶段的罗非鱼肠道微生物组成差异明显,且不同地区相同养殖阶段的罗非鱼肠道微生物丰度差异标记类群也存在一定差异,可能与鱼种来源、养殖环境及饲料有关.因此,生产中应结合实际情况,科学利用益生菌对罗非鱼肠道和养殖环境中微生态结构进行定向改良,切忌盲目使用益生菌.  相似文献   

鱼虾混养养殖模式对罗非鱼血清免疫指标的影响     

赵光军  李高俊  李芳远  佟延南 《科学养鱼》2018,(4)

正罗非鱼是原产于非洲Tilapia属鱼类的统称,因其具有适应力强、生长速度快、抗逆性强、食性广等优势,早已成为世界性的养殖鱼类。中国罗非鱼的主产区在广东、海南、广西等省区,养殖范围广,2016年出口创汇达12.23亿美元,具有良好的经济效益。近年来,罗非鱼养殖业面临着病害频发、价格低迷、养殖成本升高、抗生素残留等诸多问题,导致其出口受限,严重制约着我国罗非鱼产业的发展。有报道指出,罗非鱼与南  相似文献   

罗非鱼无乳链球菌间接ELISA检测方法的建立     

赵光军  李高俊  佟延南  李芳远  王世锋 《现代农业科技》2018,(6)

本文利用终浓度为0.5%(v/v)的甲醛在4℃条件下灭活24 h制备灭活的罗非鱼无乳链球菌,用其作为抗原对兔进行免疫制备兔抗无乳链球菌血清,以无乳链球菌抗兔血清作为一抗,以辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔Ig G作为酶标二抗,建立并优化了无乳链球菌的间接ELISA快速检测方法。此检测方法的抗原最适包被浓度为1×10~7 CFU/mL,一抗最适工作浓度为1∶100(v/v),二抗最适工作浓度为1∶2 000(v/v),最低检测限为1×10~4 CFU/mL。利用此法对发病的罗非鱼进行检测,阳性检出率为80%,与本试验选取的指示菌株均无交叉反应。  相似文献   

略论江泽民对党的思想政治工作理论的新发展     

赵光军 《安徽农业大学学报》2004,(5):8-11,36

新时期，江泽民面对国际国内形势发生的深刻变化以及党的思想政治工作面临的新情况、新问题，继承和发展毛泽东、邓小平思想政治工作理论，对党的思想政治工作地位作用、内容、方法途径等提出了一系列创新思想。研究江泽民的这些思想，对现阶段党的思想政治工作创新，对新世纪党的建设伟大工程创新和社会主义现代化事业的创新，都具有重大的理论和实践意义。  相似文献   

罗非鱼高效健康养殖技术初探     

佟延南  李芳远  李志鸿  赵光军  韩丽娜  朱海 《科学养鱼》2020,(1):15-16

正本研究通过改造罗非鱼现有池塘、使用微孔曝气增氧等方式增加罗非鱼投放密度,同时混养南美白对虾,降低鱼虾患病概率,充分利用饵料,从而达到养殖模式优化、提高单位水体养殖生物产量、增加养殖经济效益的目的。一、材料与方法1.池塘选择水源充足无污染、进排水方便、形状规整的试验池塘4口,每口5亩,池深2.0～2.5米,  相似文献   

海南岛淡水鱼类eDNA宏条形码COⅠ通用引物的筛选          下载免费PDF全文

陈治  蔡杏伟  申志新  张清凤  李芳远  谷圆  李高俊  赵光军  王镇江 《渔业科学进展》2023,44(6):40-57

已知的鱼类环境DNA (environmental DNA, eDNA)宏条形码通用引物主要位于线粒体核糖体基因区，这些12S和16S引物存在部分近缘鱼类无法识别及参考序列不足等问题。本研究以海南岛淡水鱼类为调查对象，基于8目26科101属150种鱼类COⅠ序列，筛选出6个侧翼保守区；综合碱基变异、物种鉴定、eDNA降解及高通量测序读长需求，在4个侧翼保守区设计了26条引物，其中6条引物未达到Premier评分要求；72种海南淡水鱼类的首轮PCR结果显示，有11条引物的通用性较高，其中，PCR成功种数≥70且条带亮度均大于marker的引物有5条；次轮PCR结果显示，5条引物相互搭配产生的3 (正向) × 2 (反向)套引物组合的扩增成功率均为100% (72种/72种)，经PCR条带长度、亮度筛选后表现最优的引物组合为“HN-A-F4、HN-D-R3”(以下简称HN-COⅠ)。30个水样高通量测序结果显示，HN-COⅠ产生的待分析序列总数、鱼类序列总数、OTUs总数和鱼类OTUs总数分别为MiFish-U的0.77倍(8 919 976/11 532 126)、1.22倍(2 264 965/1 863 905)、0.85倍(406/477)和1.32倍(86/65)；HN-COⅠ产生的鱼类OTUs注释到种、属、科及科以上水平的占比分别为81.40%、11.63%和6.98%，MiFish-U则分别为81.54%、4.62%和13.85%。“引物+水样”的NMDS聚类图形成边界明显的2组(胁强系数=0.15)；HN-COⅠ的属内物种扩增子两两遗传距离最小值及平均值均分别是MiFish-U的1.23倍(0.006 9/0.005 6)和1.57倍(0.155 9/0.099 4)。室内6个密度组鲤鱼(Cyprinus carpio carpio)“生物量–拷贝数”线性回归方程的相关系数较低，HN-COⅠ及MiFish-U均无法准确反映鲤鱼的生物量。本研究筛选并比较了HN-COⅠ与MiFish-U的优劣，表明HN-COⅠ对海南岛淡水鱼类具有更高的靶向性，不仅在防止微生物、哺乳类等非目标生物eDNA污染方面有优势，而且更有利于海南岛淡水鱼类的检出和准确鉴定。  相似文献