斑节对虾Chitinase-2基因的克隆及其在蜕皮和幼体发育过程中的表达分析     

周凯敏  江世贵  黄建华  杨其彬  姜松  邱丽华  杨丽诗  周发林 《南方水产科学》2017,(4):59-68

研究以斑节对虾(Penaeus monodon)转录组获得的几丁质酶基因(Pm Chi)片段,运用RACE技术克隆了PmChi基因c DNA全长,命名为PmChi-2。PmChi-2基因c DNA全长2 050 bp,其中5'-非编码区(5'-UTR)144 bp、3'-UTR 319 bp和开放阅读框(ORF)1 587 bp,编码528个氨基酸。生物信息学分析显示,PmChi-2与其他甲壳动物Chi-2的相似性为78%~97%。实时荧光定量PCR结果显示,PmChi-2在蜕皮前期(D期)表皮中表达水平最高,在胃、鳃、腹神经节和眼柄中表达水平依次降低,在其他组织(肝胰腺、肠、肌肉、心脏)中几乎不表达。不同蜕皮阶段,PmChi-2在鳃、胃和表皮3种组织中的表达变化模式基本一致,均在蜕皮期(E期)表达量最低,而最高表达量在鳃中出现在蜕皮后期(A期),在胃和表皮中为D期。幼体不同发育阶段分析揭示PmChi-2 mRNA在幼体发育阶段的无节幼体到糠虾幼体第二期表达量维持在一个低水平,在糠虾幼体第三期PmChi-2 mRNA表达水平显著升高,在仔虾期又显著下降,推测PmChi-2 mRNA可能与斑节对虾幼体发育密切相关。研究结果表明PmChi-2基因可能在斑节对虾蜕皮以及幼体的变态发育中发挥重要作用,为深入研究斑节对虾几丁质酶发育调控提供了重要信息。  相似文献   

斑节对虾Toll9受体基因免疫功能的研究与表达分析     

刘倩  江世贵  邱丽华  黄建华  周发林  杨其彬  姜松  杨丽诗 《南方水产科学》2017,(5):63-71

Toll受体蛋白(Toll receptors)是一类重要的模式识别受体,在无脊椎动物先天性免疫系统中发挥重要作用。文章对斑节对虾(Penaeus monodon)新型Toll9受体基因(Pm Toll9)进行了研究:以人源胚胎肾细胞(HEK293T)成功构建体外细胞免疫模型,通过免疫印迹方法证实Pm Toll9重组真核蛋白可在HEK293T中成功表达。双荧光素酶报告系统检测发现在200 ng转染浓度处Pm Toll9对NF-κB报告基因的激活效果显著。q RT-PCR数据证明PmToll9成功激活HEK293T细胞Toll-like receptor(TLR)信号通路,促进通路下游髓样分化因子(My D88)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素(IL-10)的上调表达,同时酶联免疫吸附测定结果证明Pm Toll9可促进TNF-α蛋白表达水平显著上调。斑节对虾体内细菌刺激实验结果显示无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)可激活Pm Toll9在肝胰腺、肠、淋巴和鳃中的表达,哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)可显著抑制Pm Toll9在肝胰腺中的表达。提示无乳链球菌可通过Pm Toll9激活Toll信号通路,引起机体免疫防御反应,而哈维氏弧菌对此过程具有一定的抑制作用。  相似文献   

用IGF—ⅠmRNA表达量评价鲮饲料配方效果的研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

姜巨峰  张殿昌  邱丽华  林黑着  江世贵 《南方水产》2010,6(2):66-72

试验以秘鲁鱼粉为饲料蛋白源,研究4种蛋白水平（21．5％、32．2％、42．5％和51．6％）的饲料对鲮（Cirrhinus molitorella）生长、消化酶活性及类胰岛素生长因子（IGF—Ⅰ）mRNA表达水平的影响。经过8周的养殖试验,不同饲料蛋白水平下,蛋白酶活性与特定生长率（SGR）成极显著的正相关性（P〈0．01）;鲮肝组织中IGF—ⅠmRNA的表达量与特定生长率成极显著正相关性（P〈0．01）;鲮肝组织IGF—ⅠmRNA的表达量与蛋白酶活性也成极显著正相关性（P〈0．01）。结果表明,用鲮肝组织IGF—ⅠmRNA的表达量可以快速鉴定饲料的质量。  相似文献   

斑节对虾cyclin G2基因克隆及不同刺激下的表达分析     

谢波波  郭松  傅明骏  赵超  杨其彬  焦宗垚  邱丽华 《中国水产科学》2016,23(4):823-832

细胞周期蛋白G2(cyclin G2)是细胞周期中的重要调控因子。该研究初步探讨斑节对虾(Penaeus monodon)细胞周期蛋白G2(Pmcyclin G2)在卵巢发育中的作用,利用RACE技术克隆获得4075bp Pmcyclin G2 c DNA全长,其开放阅读框(ORF)1161bp,编码386个氨基酸。利用荧光定量PCR技术研究了Pmcyclin G2组织表达模式,结果显示,Pmcyclin G2在斑节对虾的心脏、血淋巴、肝胰腺、卵巢等组织中均有表达,其中肌肉中表达量最高;卵巢发育不同阶段Pmcyclin G2的表达分析则表明,Pmcyclin G2在III期表达量最高;注射5-羟色胺(5-HT)能诱导卵巢Pmcyclin G2基因表达升高,多巴胺(DA)则抑制卵巢中Pmcyclin G2基因表达。利用原核表达技术获得了cyclin G2的体外重组蛋白,Western Blot分析证实重组蛋白为cyclin G2蛋白。此结果为进一步研究该蛋白的功能提供了条件。以上研究结果表明,Pmcyclin G2基因可能与斑节对虾卵母细胞发育有密切关系,该结果可为进一步探究斑节对虾卵巢的发育机理提供理论依据。  相似文献   

有机碳土壤调控剂对盐化潮土理化性质和甜菜效益的影响     

邱丽华 《中国糖料》2018,(4)

进行了有机碳(SOC)土壤调控剂配方筛选及对盐化潮土理化性质和甜菜效益影响的研究。结果表明:SOC土壤调控剂配方比例为:有机碳肥0.9375∶保水剂0.0025∶甜菜专用肥0.0563∶聚乙烯醇0.0037,甜菜经济效益最佳施用量为23.85t/hm~2,甜菜理论产量为104.07t/hm~2。施用SOC土壤调控剂与传统化肥比较,盐化潮土容重、pH和重金属离子Hg、Cd、Cr和Pb分别降低6.92%、0.46、16.21%、28.85%、15.74%和18.02%;土壤总孔隙度、毛管孔隙度、非毛管孔隙度和团聚体分别增加3.40、1.87、1.53和7.11个百分点;土壤总持水量、毛管持水量和非毛管持水量分别增加6.67%、6.67%和6.68%;土壤有机质、碱解氮、速效磷和速效钾分别增加11.81%、1.78%、1.68%和0.28%;土壤有益微生物真菌、细菌和放线菌分别增加122.64%、34.40%和21.13%;土壤蔗糖酶、脲酶、磷酸酶和多酚氧化酶分别增加61.42%、46.08%、33.33%和59.09%;甜菜叶丛高度、叶丛重量、根体长度、根直径和单株根重分别增加2.03%、3.79%、3.04%、3.03%和8.47%;产量、增产值和施肥利润分别增加8.33%、0.28万元/hm~2和0.07万元/hm~2。在盐化潮土施用SOC土壤调控剂,有效地改善了盐化潮土理化性质和生物学性质,提高了酶活性和甜菜的经济效益。  相似文献   

干旱对农业生产的影响     

王秀云  邱丽华  李燕  李建明  孙晓慧 《现代农业》2008,(2):33-33

干旱对人类生产活动最明显、最直接的危害就是对农业生产带来的严重灾难。尤其是中国北方频繁出现的旱灾。造成粮食作物大面积减产。给人民带来苦难。据1978～1989年统计．全国播种面积平均每年145061百万公顷．而每年受旱涝等灾害就有42．14百万公顷，占28．9％．在受灾面积中有60．6％是旱灾。一旦出现旱灾。农业粮食减产十分严重。要预防和减少干旱．就要先了解干旱。  相似文献   

高寒冷凉山区日光温室蔬菜生产存在的问题及对策     

邱丽华 《中国园艺文摘》2009,25(11):106-107

立足本地资源，充分利用冷凉山区特殊的气候条件，在现有温室蔬菜栽培的基础上，引进新品种、新技术，促进高海拔冷凉山区反季节蔬菜的快速发展，增加农牧民收入。针对目前冷凉山区日光温室蔬菜生产存在的问题，提出发展对策。  相似文献   

花鲈白细胞介素8基因的克隆与序列分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

邱丽华  江世贵  张汉华  杨铿  周发林 《中国水产科学》2007,14(2):201-207

采用同源克隆和末端快速扩增(RACE)的方法,从经LPS刺激的花鲈(Lateolabrax japonicus)总RNA反转录产物中获得了803 bp的IL-8 cDNA序列。该序列包含159 bp的5′非编码区(UTR)和359 bp的3′非编码区(UTR)以及297 bp的开放阅读框(ORF),可编码99个氨基酸。序列的3′UTR含2个mRNA不稳定基序,在Poly A尾上游17 bp处有1个明确的Poly A加尾信号(AATAA)。预测的氨基酸结构含27个氨基酸组成的信号肽,将信号肽切除可产生72个氨基酸组成的成熟肽,预测成熟肽的分子量约为8.3 kD,等电点为7.85。花鲈IL-8序列中用于形成二硫键的4个半胱氨酸保守,前2个半胱氨酸被1个精氨酸分开,形成CXC结构。与其他鱼类的IL-8相似,花鲈IL-8序列中也缺乏哺乳类中存在的ELR基序,而含有ELH结构。进化分析显示,花鲈IL-8与从鱼类和哺乳类分离的IL-8有不同程度的同源性,与硬骨鱼黑鲷(Acanthopagrus schlegeli)和牙鲆(Paralichthys olivaceus)的进化关系最近,其次为软骨鱼类,与无颌类和哺乳类的分化较大;而哺乳类的ELR结构可能为IL-8在进化过程中特化而成的结构,以加强IL-8特异性的趋化能力。  相似文献   

红海湾礁滩增殖的初步研究     

梁超愉  张汉华  吴进锋  王江勇  邱丽华 《水产科技》2001,(1):12-14

红海湾位于北纬22&;#176;33～22&;#176;50；东经114&;#176;52′～115&;#176;34′，10m等深线以浅海域面积有3万ha。散布有菜屿岛、龟龄岛、江牡岛、芒屿岛等数十个岛屿及干出礁。岸线长度35．47Km，岸相以岩礁生境为主。海水年平均温度为22．3℃，海水盐度变化范围在23～34之间。礁栖生物种类多，主要经济种类有杂色鲍、蝾螺、紫海胆等。  相似文献   

鱼类肿瘤坏死因子基因和受体的研究进展     

邱丽华  张汉华  吴进锋 《中国水产科学》2004,11(5):482-487

肿瘤坏死因子(Tumer nerosis factor,TNFα)是机体抵抗寄生虫、细菌和病毒入侵感染时的一种重要的介质,而且TNFα在机体内还起着其他治疗方面的功能,包括抗肿瘤、休克和胚胎发育等。TNFα主要由几种免疫细胞产生,如单核细胞或巨噬细胞、天然杀伤(NK)细胞、嗜中性白细胞和激活的B细胞等。TNFα的许多生物学活性都是通过与细胞膜表面的受体(TNFRI)结合后而发挥作用的。随着分子生物学技术的发展,基因克隆技术的完善,鱼类免疫学研究取得了显著的进步,尤其是TNFα基因自2000年后相继在几种鱼类中被克隆测序并进行了表达方面的研究,因此本文就肿瘤坏死因子基因及受体的功能及近来在鱼类中的研究概况进行了综述。  相似文献