草鱼脂酰辅酶A合成酶4基因全长cDNA分子克隆及表达调控     

韩振  高琦  许建和  易乐飞  申欣  丁祝进  程汉良 《动物营养学报》2019,(5):2442-2450

本试验采用反转录PCR(RT-PCR)技术克隆草鱼脂酰辅酶A合成酶4(ACSL4)基因全长cDNA,利用实时荧光定量PCR技术研究ACSL4基因在草鱼大脑、心脏、脾脏、肝胰脏、肌肉、肾脏、肠系膜脂肪、前肠、中肠、后肠10种组织中的表达情况,并对投喂不同淀粉源饲料以及饥饿再投喂0、3、6、12和24 h后草鱼肝胰脏中ACSL4基因表达情况进行研究。结果显示:草鱼ACSL4基因cDNA全长2 418 bp,其开放阅读框2 121 bp,共编码706个氨基酸;草鱼ACSL4蛋白的氨基酸序列包含1个跨膜结构域、1个脂肪酸绑定基序和1个ATP/AMP绑定基序。草鱼ACSL4 mRNA在大脑和脾脏中相对表达量较高,显著高于其他组织(P <0.05),在肌肉中相对表达量最低;投喂不同淀粉源饲料对草鱼肝胰脏中ACSL4 mRNA相对表达量无显著影响(P>0.05);饥饿再投喂12 h后,草鱼肝胰脏中ACSL4 mRNA相对表达量达到最高值,显著高于其他时间段(P<0.05),24 h后恢复至最初水平。本试验从草鱼10种混合组织中克隆了ACSL4基因全长cDNA,其所编码的氨基酸序列的主要功能性位点脂肪酸绑定基序和ATP/AMP绑定基序在不同物种间高度保守;草鱼ACSL4基因主要在大脑和脾脏中表达;饲料中淀粉源对草鱼肝胰脏中ACSL4基因的表达无显著影响;在饥饿再投喂12 h后,草鱼肝胰脏中ACSL4 mRNA相对表达量达到最高值,随后显著下降至最初水平。  相似文献   

对农业机械自动化的发展的几点思考     

高琦 《农村实用技术》2020,(3)

伴随着改革开放的政策实行,我国在经济上和科技上都得到了飞速发展。不仅如此,农业机械自动化水平也得到了较大的提升。当前,在现代农业的发展中,农业机械自动化占着举足轻重的地位,不仅可以推动农业向产业化结构发展,而且可以最大限度的提高粮食生产力。本文首先介绍了发展农业机械自动化的积极意义,其次对其今后发展作出几点思考。  相似文献   

浅谈飞航导弹的性能及应用前景     

高琦 《技术与市场》2011,(10)

通过对飞航导弹的特点以及性能评估方法的阐述,对其前景作了相应的分析。  相似文献   

林业科技档案管理现代化——微机管理   总被引：1，自引：0，他引：1       下载免费PDF全文

高琦 《林业科学研究》1992,(5):617-618

科技档案是科研实践的总结,是广大科研人员长期勤奋工作的结晶,又是科技知识的信息库。《档案法》中提到:“采用先进技术,实现档案管理的现代化”。利用微型计算机这一现代技术管理档案,已势在必行。1 林业所科技档案数据库的建立  相似文献   

1株非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体识别的B细胞抗原表位的鉴定   总被引：1，自引：1，他引：0  

陈孝军  马俊  陈熊男  梁祎凡  高琦  黄钊  许润达  郑佳琛  郑泽中  张桂红  王衡  龚浪 《畜牧兽医学报》2022,53(7):2239-2251

旨在研究非洲猪瘟病毒(ASFV) p30蛋白的B细胞抗原表位,本研究制备了p30蛋白的单克隆抗体(mAb),并以该单克隆抗体为工具进行B细胞抗原表位定位。首先,通过原核表达及Ni柱亲和纯化获得p30蛋白,将纯化蛋白免疫BALB/c小鼠进行杂交瘤细胞制备,通过间接酶联免疫吸附试验(iELISA)筛选出阳性杂交瘤细胞,并以细胞表达的方法制备单克隆抗体;采用间接免疫荧光试验(IFA)和蛋白质免疫印迹(Western blot)对单克隆抗体的特异性进行鉴定。利用IEDB表位预测软件对p30蛋白B细胞抗原表位进行预测,根据预测结果对CP204L基因进行截短表达,利用IFA、Western blot和iELISA对其抗原表位进行鉴定。最后,利用噬菌体十二肽库对制备的p30单克隆抗体进行4轮生物淘选,筛选多肽表位,并与上述基因截短表达筛选方法进行比对。特异性鉴定结果显示,该单克隆抗体能成功识别感染猪肺泡巨噬细胞的ASFV;基因截短表达筛选结果表明,其识别的抗原表位区域为⁸⁴M～K¹⁴²;噬菌体淘选试验结果表明,¹¹⁶TSSFETLFE¹²⁴为本试验制备的单克隆抗体所识别的p30蛋白抗原表位核心序列,该结果进一步缩小了表位分布范围。本研究制备了p30蛋白的1株单克隆抗体,并对其抗原表位进行鉴定,为血清学诊断试剂的研发和p30蛋白功能研究奠定基础。  相似文献   

非洲猪瘟病毒诱导猪红细胞凋亡并促进猪外周血单核细胞的吞噬作用     

杨云龙  冯永智  高琦  郑佳琛  王衡  张桂红  龚浪 《畜牧兽医学报》2022,53(11):3948-3955

本研究旨在探讨非洲猪瘟病毒（ASFV）对猪红细胞（RBCs）的作用以及对猪外周血单核细胞（PBMs）吞噬能力的影响。试验采用流式细胞术检测ASFV侵染猪原代肺泡巨噬细胞（PAMs）和猪红细胞（RBCs）的能力,并检测ASFV诱导RBCs发生凋亡的百分比;同时采用激光共聚焦试验（Confocal）观察ASFV诱导RBCs发生凋亡是否影响PBMs的吞噬能力。结果显示,ASFV不能入侵RBCs,但以时间和剂量依赖性方式诱导RBCs发生凋亡。0.1 MOI ASFV接种RBCs后1、3、5和7 d可分别诱导1.27%、3.23%、7.39%和8.56%的RBCs发生凋亡;1 MOI ASFV接种RBCs后1、3、5和7 d可分别诱导1.54%、3.73%、8.46%和10.74%的RBCs发生凋亡;3 MOI ASFV接种RBCs后1、3、5和7 d可分别诱导2.65%、5.01%、12.44%和18.61%的RBCs发生凋亡。同时,凋亡的RBCs可以增加PBMs对黄绿色荧光微球的吞噬数量,ASFV诱导RBCs凋亡的百分比越高,PBMs吞噬黄绿色荧光微球的数量越多。综上所述,ASFV不能侵染猪RBCs,但可以以时间和剂量依赖性方式诱导RBCs发生凋亡并增强PBMs的吞噬功能。  相似文献   

影响板栗耐贮性因素及延长贮藏期措施     

高琦  丁存法 《农村科技开发》1998,(12):16-16

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弓形虫细胞核因子3基因的克隆及序列分析     

胡玲英  张念章  高琦  朱兴全  王寿昆 《中国畜牧兽医》2015,42(2):270-274

为预测弓形虫细胞核因子3(TgNF3)基因作为抗弓形虫疫苗候选抗原的可能性,本试验以弓形虫RH株的总RNA为模板,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增TgNF3基因并连接至pMD18-T载体。筛选阳性克隆后,测序鉴定。将测序结果正确的核苷酸序列翻译成氨基酸序列,运用生物信息学软件分析TgNF3蛋白的结构,预测抗原表位。结果显示,TgNF3基因长约950bp。TgNF3蛋白中包含1个跨膜结构域,9个α-螺旋区,4个β-折叠区,8个亲水区域和10个柔性区域,并预测含有9个线性B细胞抗原表位。结果表明,TgNF3蛋白可能具有良好的免疫原性,为研制以TgNF3为抗原的弓形虫亚单位疫苗及表位疫苗奠定了基础。  相似文献   

登陆强台风“凤凰”暴雨成因分析     

高琦  徐明  赖安伟  汪小康 《安徽农业科学》2011,39(32):20053-20058,20104

利用常规观测资料、NCEP 1°×1°6 h再分析资料、NCEP/NCAR地表潜热通量一日4次再分析资料以及TBB资料等,对2008年第8号强台风＂凤凰＂登陆引起的暴雨进行了深入的机理分析。结果表明,充沛的水汽以及层结不稳定为暴雨的发生提供了有利的水汽和热力条件;高层有明显的辐散,低层有明显的辐合,且从低层到高层伴随着很强的垂直上升运动,为暴雨的发生提供了有利的动力条件;螺旋度的大值中心的演变基本反映了台风中心的移动方向,而强降水一般发生在正螺旋大值中心的右侧,且梯度大的一侧比梯度小的一侧降水强度更大;非地转湿Q矢量辐合中心对应未来12 h强降水的发生区,对判断台风在陆上的运动、维持也有一定的意义;地表潜热通量在此次暴雨过程的各个时段均为正值,其向上输送和强弱变化对台风强度的维持有一定的指示意义。  相似文献   

果园电动自走式履带底盘动力系统匹配设计与试验     

徐高伟  宋裕民  邱绪云  梁健明  高琦  李虎 《农机化研究》2022,44(4):251-255

果园作业包括除草、喷雾、碎枝、采摘以及搬运等,作业种类繁多,作业空间狭闭且环境复杂,对作业机械的动力要求较高。针对现有电动底盘在动力方面无法满足果园多种作业要求的问题,对果园履带式底盘进行电动动力系统的匹配设计。在对电动自走履带式底盘的总体结构和工作原理进行阐述的基础上,进行动力系统匹配的理论分析和初步设计;建立果园电动自走履带式底盘动力系统的仿真模型,验证动力系统匹配设计的理论分析结果;研制底盘样机,并进行动力系统试验。结果表明:底盘最高行驶速度平均值为6.52km/h,两种爬坡工况底盘行驶速度为1.75km/h和1.28km/h,续航里程约为17.8km,满足果园多样化作业对作业机械动力的设计要求。  相似文献