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101.
1种检测新城疫病毒的微滴式数字PCR方法 总被引:1,自引:1,他引:0
本研究旨在构建一种新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)的微滴式数字PCR方法(droplet digital PCR,ddPCR)。以NDV F基因为靶基因,选取保守区域设计引物和探针,构建了NDV ddPCR。对ddPCR反应引物和探针浓度、退火温度进行了优化,并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行测定。试验结果表明,ddPCR的最佳引物和探针浓度分别为900和250 nmol·L-1,最佳的退火温度为55℃。ddPCR的线性良好,最低检测下限为1.8 copies·μL-1,与禽传染性支气管炎病毒等其他6种病毒无交叉反应,样本重复的变异系数为2.4%。结果提示,本研究建立的ddPCR方法灵敏度高、特异性强,可对新城疫病毒感染的临床样品进行定量检测。 相似文献
102.
ROP是高等植物里一类分布广泛的信号小G蛋白,在植物生长、发育、抗逆、抗病和激素信号转导过程中起重要调控作用。本研究用PCR体外扩增技术获得棉花GhROP1基因片段,将目的基因与诱饵质粒载体pGBKT7通过双酶切定向重组,构建诱饵质粒pGBKT7-GhROP1,并成功的转入到Y187酵母菌通过缺陷性培养基培养进行毒性和自激活检测。结果表明,成功克隆棉花GhROP1基因,该基因开放阅读框共有591 bp。双杂交诱饵表达载体pGBKT7-GhROP1构建成功,并成功转化酵母菌Y187;结果显示含表达载体的酵母菌Y187在SD/-Trp平板上长势良好,说明表达蛋白对酵母菌无毒害作用。在SD/-Leu,SD/-Trp-Leu,SD/-Trp-Leu-His-Ade平板上则没有生长,说明转化pGBKT7-GhROP1质粒后的Y187酵母菌无自激活发生。本研究结果为下一步利用酵母杂交系统筛选GhROP1蛋白相互作用的蛋白提供理论参考。 相似文献
103.
104.
棉花黄萎病(Verticillium dahliae)是一种土传性真菌维管束病害,严重影响棉花的生产。本研究通过转录组数据分析筛选出一个与棉花黄萎病相关的氨基酸转运蛋白GhAAT基因,该基因在棉花根部响应黄萎病菌诱导表达。利用病毒诱导的基因沉默(virus-induced gene silencing, VIGS)技术研究其在棉花抗黄萎病中的功能。结果显示将该基因在棉花TM-1的叶片和根部沉默后,棉花对黄萎病抗性减弱,证明GhAAT基因参与调控了棉花抗黄萎病功能。发掘棉花抗黄萎病菌重要调控基因并揭示其分子机制对培育棉花抗病品种具有重要意义。 相似文献
105.
梅州地区柑橘黄龙病的常规PCR与实时荧光定量PCR检测技术研究与应用 总被引:1,自引:1,他引:0
本文利用TaqMan探针实时荧光定量PCR(qPCR)检测技术对梅州地区疑似柑橘黄龙病样品进行检测,并与常规PCR检测进行对比。结果表明,实时荧光定量PCR用于检测柑橘黄龙病菌结果快速、准确、可靠且无污染。采用2种方法对梯度稀释的阳性样本进行检测发现,实时荧光定量PCR的灵敏度较常规PCR更高,能够检出样品中痕量的病原菌。本研究在梅州地区建立了以实时荧光定量PCR方法进行柑橘黄龙病疑似植株的检测,可以为梅州地区提供更准确、更灵敏、快速的黄龙病检测技术。 相似文献
106.
107.
基于园林空间的概念和功能提出构成空间的三大要素是"地"、"顶"、"墙",并指出私密性在公共环境空间中的重要性,人在园林中对私密空间有一定的需求,而园林开放性的本质使两者之间产生了矛盾。笔者认为TRIZ理论中的冲突及冲突解决理论可用于解决这一矛盾。通过分析当代园林的空间构成方式,以人的心理习惯为基础,结合构成景观的基本元素,论述了面状开敞空间的界定性、半开敞空间的开放性和点状封闭空间的私密性,探讨了在公共空间中营造私密性景观的可能性,提出"人—环境—社会"这一更加合理、人性化的公共空间模式。 相似文献
108.
109.
110.
思茅地区公益林建设树种选择 总被引:1,自引:0,他引:1
思茅地区土地总面积 4 4 1 9万hm2 ,为云南第二大林区 ,具有“一区连三国” ,“一江通五邻”的区位优势 ,然而面临着水土流失严重、野生动植物物种减少 ,自然灾害频繁的现状 ,因此以治理澜沧江流域水土流失为主体的公益林建设有着重要的意义 ,按“天保”工程十年规划 ,思茅地区公益林建设总面积为 84 2万hm2 ,为此造林树种选择成了当务之急。树种选择需要考虑的因素有 :适地适树 ;树种结构配置 ;生产经营水平 ;种苗供应 ;林产业结构调整 ,国家重点工程建设需要 ;科技支撑 ;群众支持力度等。据此选择了以思茅松、红木荷等 33个树种 ,并介绍了其相应的林学特性 相似文献