影响血凝抑制试验的因素   总被引：3，自引：0，他引：3  

朱道中  林志雄  颜思通 《养禽与禽病防治》2002,(7)

多种病毒具有凝集相应红细胞的能力，如正粘病毒科、副粘病毒科、披膜病毒科、细小病毒科以及腺病毒科等的病毒，而且这种凝集红细胞的能力又可被特异性的抗体所抑制，基于这种现象所进行的试验分别称之为红细胞凝集试验和红细胞凝集抑制试验，习惯上又称为血凝试验和血凝抑制试验。作为一种经典的血清学反应，血凝抑制试验主要应用于两个方面：（１）应用标准病毒悬液或血凝素测定血清中的相应抗体；（２）应用特异性的抗体鉴定新分离的病毒。该试验具有以下优点：（１）敏感性强，可以检测到微量的抗体和抗原，是较敏感的血清学反应之一；…  相似文献   

猪结核病疫情不容忽视     

颜思通  林志雄  朱道中 《中国动物检疫》2002,19(10):33-33

猪结核病,是由结核分支杆菌(Mycobacterium tuberculosis)引起,呈慢性经过的传染性疾病.由于猪的生命周期短,而猪患结核病常呈无症状经过,所以在多数情况下,猪的结核病防制为部分养猪场所忽视.近几年来,在进出境种猪的检疫中,屡屡检出结核病变态反应阳性猪,剖检部分阳性猪,其颔下及肠系膜部分淋巴结出现病变.1999年起在进口种猪中开始检出阳性猪,在部分条件较差的猪场也有阳性检出.在当前世界范围内结核病形势严峻的情况下,猪的结核病疫情及其在其它物种及人类结核病传播中的作用,应该予以重视.  相似文献   

牛常见单基因遗传缺陷病研究进展     

王振男  刘中勇  吴晓薇  马保华  朱道中  刘志玲 《中国奶牛》2012,(6):22-24

本文综述了牛尿苷合酶缺乏症、瓜氨酸血症和凝血因子缺乏症三种遗传缺陷病的遗传基础以及危害,并对这三种病的检测方法进行了阐述。  相似文献   

逆转录环介导等温扩增技术检测H3亚型猪流感病毒   总被引：5，自引：2，他引：3  

刘中勇  朱道中  李少璃  冀君  毕英佐  谢青梅  曹永长 《动物医学进展》2009,30(7):1-5

基于环介导等温扩增技术(RT-LAMP),建立了一种用于快速检测H3亚型猪流感病毒的方法。根据GenBank中收录的H3N2亚型猪流感病毒(SIV)HA基因保守区的序列,设计一组对应HA序列6个区域的4条特异性引物,建立RT-LAMP反应体系;经优化,确定了最佳的LAMP反应条件。扩增后产物形成的焦磷酸离子和溶液中的镁离子结合而形成焦磷酸镁沉淀,结果可视。同时用特异性内切酶HhaⅠ对所获得的产物进行酶切鉴定,所得的酶切产物大小与理论值完全符合。用已建立的RT-LAMP技术检测临床样品,检测结果与RT-PCR方法符合率均达到100%。结果表明,本研究建立的RT-LAMP检测猪流感病毒方法,操作简单,灵敏度高,特异性强,是一种适用于现场诊断的检测技术。  相似文献   

牛传染性鼻气管炎病毒LUXTM新型荧光PCR检测方法的建立     

陈茹  毕英佐  曹永长  林志雄  赵吟  罗琼  朱道中 《中国预防兽医学报》2007,29(4):303-307

本研究针对牛传染性鼻气管炎病毒（Infectious bovine rhinotracheitis virus，IBRV）高度保守的gC基因设计单标记并具有自身荧光淬灭功能的LUX^TM引物，建立L刚新型实时荧光PCR方法用于快速检测IBRV。该方法对四株IBRV细胞培养物的检测均呈典型阳性反应，而对其它动物疱疹病毒以及健康牛组织DNA和细胞对照的检测结果为阴性，检测时间包括核酸提取仅需1h～2h。试验表明，LUX^TM荧光PCR法对IBRV细胞增殖病毒液的检测敏感性可达0．04TCID50，比病毒分离敏感性至少提高10倍；对10倍系列稀释的纯化IBRV核酸样品，L刚荧光PCR的检测敏感性比常规PCR可提高10^3倍。将病毒液添加到健康牛精液和血液样品中，该荧光PCR可检测到牛冻存精液中40TCID50牛抗凝全血、血清和临床精液中0．04TCID50的病毒，说明对临床样品的检测有效。本研究所建立的LUXTM荧光PCR方法快速敏感，适合应用于活牛及其遗传物质的进出口检疫、养牛业疾病防控等领域对IBRV的快速检测。  相似文献   

禽流感病毒检测方法标准比较及在国际能力验证上的应用     

田纯见  刘中勇  林志雄  朱道中  张利峰  罗琼  刘来福 《中国家禽》2007,29(16):1-3

禽流感(AI)是由A型流感病毒引起的家禽和野禽的传染病,临床会出现各种各样的症状.因为受到感染的宿主、病毒毒株、免疫状态、继发感染和环境条件的影响,本病的常规诊断需进行病毒分离和鉴定.AI强毒株会引起高致病性禽流感(HPAI),目前发现的都属于H5或H7亚型,世界动物卫生组织(OIE)把这两个亚型的毒株均划分为通报性禽流感(NAI)病毒,可引起禽类烈性传染病.……  相似文献   

病毒性神经坏死病病毒核酸检测用标准物质的制备     

段燕喻  陈茹  吴晓薇  朱道中  林志雄  田纯见  刘志玲 《中国动物检疫》2018,35(2):102-107

利用基因克隆和体外转录技术,制备病毒性神经坏死病病毒(Nervous necrosis virus,NNV)核酸检测标准物质。设计NNV RNA2基因的特异性引物,通过RT-PCR获得目的片段并连接至p GEM-T载体;采用体外转录方法,获得大量纯品RNA。初步定量稀释至约10~8 copies/μL,均匀性检验结果显示样品间差异5%;稳定性检验表明,室温(20~25℃)保存7 d、冷藏(2~8℃)保存1个月和冷冻(-20℃)保存6个月的含量均无明显变化。采用核酸浓度测定与拷贝数换算的方法,对转录的RNA片段进行定值,并根据委托单位的定值结果进行不确定度估算。核酸标准物质定值为(8.452±0.068)×10~8 copies/μL,可用作NNV核酸检测的标准质控品。  相似文献   

荷斯坦牛脊椎畸形综合征TaqMan荧光PCR检测方法的建立与应用     

刘志玲  吴晓薇  康伟  朱道中  刘中勇  陈增荣  郭霄峰 《华南农业大学学报》2015,36(5):26-30

【目的】建立快速筛查牛脊椎畸形综合征(Complex vertebral malformation,CVM)基因携带者的方法,在牛群中逐渐淘汰CVM基因携带者以减少养牛业损失.【方法】根据Gen Bank已发表的CVM基因的SLC35A3基因序列,设计合成了2对特异性引物和2条TaqMan探针,建立了牛脊椎畸形综合征Ta Man探针检测方法.对方法的特异性和敏感性进行分析后,应用该方法对临床样本进行检测,并与测序方法进行比较.【结果和结论】该方法能有效区分突变型、野生型和杂合型个体.各种基因型的检测灵敏度为:突变型质粒拷贝数1×10~3μL~(-1),杂合型质粒拷贝数1×10~4μL~(-1),野生型质粒拷贝数5×10~3μL~(-1).从292份荷斯坦牛全血中检出6份CVM基因携带者,与测序方法结果一致.本研究建立的方法简便快捷、准确率高,适合大样本筛选和口岸现场快速筛查.  相似文献