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[目的]建立检测虾虹彩病毒(SIV)的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR,为实现虾虹彩病毒病(SIVD)快速诊断及疫情监测提供一种新的技术手段.[方法]根据SIV的MCP基因保守序列设计特异性引物和TaqMan-MGB探针,将目的片段克隆至pMD18-T载体制备重组质粒pMD18-T-MCPSIV;优化反应体系及扩增条件后建立检测SIV的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR,以pMD18-T-MCPSIV为标准品绘制标准曲线,并通过特异性、敏感性、重复性试验及临床应用验证其实用性.[结果]制备的重组质粒(pMD18-T-MCPSIV)DNA稳定性好,满足作为标准品的要求;标准品起始模板范围为2.0×101~2.0×109拷贝/反应时,建立的标准曲线具有良好线性关系.优化后的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR灵敏度高,对重组质粒的检测灵敏度可达20拷贝/反应,对虾组织SIV的检测灵敏度约10拷贝/mg,其临床检测的敏感性与套式PCR相当;与虾类其他常见病原无交叉反应,组内和组间变异系数分别为0.27%~0.54%和0.61%~0.95%,且扩增与产物分析同步完成,整个检测过程仅需1 h左右.采用建立的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR与目前农业农村部推荐的套式PCR同时对276份临床虾样品进行SIV检测,结果显示,两种方法的大部分检测结果一致,符合率为98.6%,但检测低拷贝数样品时前者具有更高的灵敏度.2018和2019年广西虾样品的SIV阳性检出率分别为19.7%和7.5%,且养殖凡纳滨对虾、罗氏沼虾和红螯螯虾均检测到SIV阳性.[结论]基于SIV MCP基因保守序列建立的TaqMan-MGB探针荧光定量PCR检测方法具有灵敏度高、特异性强、重复性好、定量范围宽及简单快速等优点,适用于虾类样品SIV检测,可为SIVD快速诊断及疫情监测提供一种新的技术手段. 相似文献
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甘南高寒草甸群落花期物候研究 总被引：1，自引：1，他引：0
对草地群落物候的研究,不仅有助于对草地群落功能认知,更重要的是为生态系统评估提供背景资料。本研究从地理环境因素、功能性状、传粉者竞争以及系统发育4个方面讨论影响甘南高寒草甸植物花期物候的因素。结果表明,在群落水平上,开花期涵盖了整个生长季,但在整体上有一个高峰期,群落中各物种的始花期、开花峰值期及开花持续期不同,每一物种均有其独特的花期格局;植株高度(P0.001)和种子大小(P=0.034)能够显著地预测开花,而比叶面积(SLA)则不显著(GLM,P0.05);风媒物种开花期早于虫媒物种(P=0.008);花期物候重叠与系统发育距离之间存在着负相关关系。 相似文献
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[目的]为探究云南滇中牛的Y染色体遗传结构与血统来源,以期为该黄牛品种的资源保护与利用提供科学依据。[方法]采用PCR扩增和荧光分型方法,对27头滇中牛的Y-SNPs（UTY19和UTY10）和Y-STRs（INRA189和BM861）遗传多样性进行分析。[结果]27头滇中牛包含Y2和Y3两种单倍型组,其频率分别为22.22%和77.78%。结合Y-SNPs和Y-STRs的分型结果,发现这27头滇中牛存在Y2-90-158、Y3-88-156和Y3-90-156共3种Y染色体单倍型（Y-INRA189-BM861）,Y染色体单倍型多样度为0.5128±0.0904,其遗传多样性较高。[结论]滇中牛Y染色体遗传多样性较高,有普通牛和瘤牛2个父系起源,以瘤牛血统为主。 相似文献
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本试验旨在比较在饲粮中添加不同生物制剂对杜寒杂交肉羊营养物质表观消化率、氮和能量代谢的影响。采用单因素试验设计,选取体重约32 kg的杜寒杂交F1代肉羊160只,随机分为5组,每组4个重复,每个重复8只。对照组采用不添加任何生物制剂的基础饲粮,试验组在基础饲粮中分别添加21 mg/kg莫能菌素、4×10~9CFU/kg地衣芽孢杆菌、3.2×10~9CFU/kg酿酒酵母菌、1.1 g/kg酶菌制剂(包含地衣芽孢杆菌≥6×10~9CFU/g、酿酒酵母菌≥4×10~9CFU/g、碱性蛋白酶≥1 000 U/g)。预试期10 d,正试期56 d。当酶菌制剂组试验羊体重约达37 kg时,每组选取4只羊进行消化代谢试验,预试期7 d,正试期5 d。结果表明:1)各试验组干物质表观消化率、酸性洗涤纤维表观消化率均显著高于对照组(P0.05),酶菌制剂组干物质表观消化率、有机物表观消化率最高,显著高于莫能菌素组和地衣芽孢杆菌组(P0.05)。2)各试验组总能表观消化率、总能代谢率显著高于对照组(P0.05)。3)各试验组氮表观消化率显著高于对照组(P0.05),酶菌制剂组表观可消化氮、氮表观消化率显著高于对照组、莫能菌素组、地衣芽孢杆菌组(P0.05)。结果提示,从作为饲料添加剂对杜寒杂交肉羊营养物质消化利用、能量代谢和氮代谢的作用效果分析,地衣芽孢杆菌、酿酒酵母菌和酶菌制剂均优于莫能菌素,酶菌制剂最佳。 相似文献
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农田环境信息是农田管理策略制定及修改的重要依据,但目前农田环境参数监测存在监测范围小,机动灵活性不足。为实现农田环境数据动态采集,采用4G通信技术与TCP Socket通信协议,通过C++语言以及蓝图节点进行功能程序的开发,设计了一款基于虚拟现实(Virtual Reality)技术的环境监测机器人。机器人利用云端服务器接收保存机器人上的Raspberry Pi(树莓派)收集上传的数据,管理者通过本地客户端可将云端服务器数据下载和分析。应用VR手柄能够实现机器人的远程控制,佩戴VR头显可查看虚拟三维控制室中农田环境的可视化数据,利用机器人传回的田间实时影像获得沉浸式体验。测试结果表明:机器人能够高效获取田间环境数据、自主行走、自动采集和上传数据。 相似文献
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本试验旨在研究饲粮添加棕榈油脂肪粉(PP)与豆油(SO)对育肥期湖羊生长性能和营养物质消化利用的影响。选用40只体况良好、体重为(30±1) kg的4月龄湖羊公羊,随机分为2个组,每组4个重复,每个重复5只羊。试验配制2种饲粮,分别添加3%的PP和3%的SO。当试验羊平均体重达40 kg时,每个组选6只接近平均体重的试验羊采用全收粪尿法进行消化代谢试验。结果表明:1) 2组间各阶段体重差异不显著(P0.05);试验期第1～45天,2组间平均日增重差异不显著(P 0. 05),第46～60天,PP组平均日增重有高于SO组的趋势(P=0.097)。2) 2组间各阶段平均干物质采食量及饲料转化率差异均不显著(P 0.05)。3) PP组粗脂肪表观消化率有高于SO组的趋势(P=0.071); 2组间干物质、有机物和中性洗涤纤维表观消化率差异不显著(P0.05)。4) 2组间能量代谢各指标差异均不显著(P0.05)。5) 2组间氮代谢各指标差异均不显著(P0.05)。结果提示,综合育肥期湖羊生长、营养物质消化利用、能量代谢和氮代谢指标,饲粮脂肪添加水平为3%时,添加PP和SO的饲喂效果基本相同。 相似文献
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本试验旨在研究菌酶协同发酵绵马贯众对断奶仔猪生长性能、血清生化指标和抗氧化能力的影响。采用单因素随机化设计,挑选体重相近的(28±2)日龄断奶仔猪160头,随机分为5个组,每组4个重复,每个重复8头仔猪。对照组饲喂基础饲粮,原粉组在基础饲粮中添加0.6%绵马贯众原粉,菌酶协同组分别在基础饲粮中添加0.3%、0.6%、0.9%的菌酶协同发酵绵马贯众。试验期为28 d。结果表明:1)与对照组相比,0.6%和0.9%菌酶协同组平均日增重显著提高(P<0.05),0.6%菌酶协同组平均日采食量显著降低(P<0.05),0.3%、0.6%和0.9%菌酶协同组料重比显著降低(P<0.05)。2)与对照组相比,0.3%、0.6%和0.9%菌酶协同组血清免疫球蛋白A、补体3、补体4和溶菌酶含量显著提高(P<0.05),血清白细胞介素-1、白细胞介素-6含量显著降低(P<0.05);0.6%和0.9%菌酶协同组血清免疫球蛋白G含量显著提高(P<0.05)。3)与对照组相比,0.3%、0.6%和0.9%菌酶协同组血清碱性磷酸酶活性和白蛋白含量显著提高(P<0.05),0.3%、0.6%和0.9%菌酶协同组血清谷草转氨酶活性和尿素氮含量显著降低(P<0.05)。4)与对照组相比,0.3%、0.6%和0.9%菌酶协同组血清肌酸激酶、乳酸脱氢酶活性和葡萄糖含量显著降低(P<0.05)。5)与对照组相比,0.3%、0.6%和0.9%菌酶协同组血清总抗氧化能力、超氧化物歧化酶活性和还原型谷胱甘肽含量显著提高(P<0.05),0.6%和0.9%菌酶协同组血清丙二醛含量显著降低(P<0.05)。由此可见,饲粮中添加0.6%的菌酶协同发酵绵马贯众能提高断奶仔猪生长性能,增强断奶仔猪抗氧化能力和免疫功能。 相似文献
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本研究通过采用核糖体分型RT、脉冲场凝胶电泳PFGE、多位点序列分型MLST三种方法,对从水生动物中分离到的59株副溶血性弧菌进行分子分型研究。结果将59株副溶血性弧菌分为43个RT型,9个大的聚类群,DI为0.9754;51个PFGE型,13个大的聚类群,DI为0.9988;53个ST型,包括107个新的等位基因、46个新的ST型,DI为0.9982。结果显示PFGE的分辨力最高,MLST较PFGE稍低,RT的分辨力最低。总体来看59株副溶血性弧菌菌株间亲缘关系较远,从同一年份、同一地区、同类样品中分离到的菌株被分为不同的型,表现出较大的遗传多样性。 相似文献