榴莲蜜实时荧光定量PCR内参基因的克隆与筛选     

郭清云  胡福初  吴凤芝  王祥和  范鸿雁  冯学杰  陈哲 《中国果业信息》2022,51(5)

为筛选榴莲蜜实时荧光定量PCR的稳定内参基因,进一步提高榴莲蜜基因表达的稳定性和准确性。根据课题组测序获得的榴莲蜜转录组数据,筛选出10个候选内参基因；以“多异1号”榴莲蜜花序、茎、叶片以及不同发育时期的果苞为实验材料,通过基因克隆、实时荧光定量PCR分析,并结合4种统计分析软件评价内参基因稳定性。结果表明,克隆获得了5个榴莲蜜内参基因,分别为：Actin1、α-TUB1、β-TUB1、β-TUB2和GAPDH1；这5个内参基因的转录水平在榴莲蜜的不同组织类型及果苞发育过程中存在差异；稳定性综合排名结果表明,在榴莲蜜花序、茎和叶片中表达稳定性最好的是β-TUB2和α-TUB1,在榴莲蜜果苞发育阶段中表达水平最稳定的是β-TUB1和α-TUB1；通过2个成花相关基因和4个蔗糖合成酶基因的表达模式验证了α-TUB1、α-TUB1+β-TUB1及α-TUB1+β-TUB2作为内参基因的可靠性。本研究结果为榴莲蜜的功能基因表达分析提供了理论基础。  相似文献   

禽致病性大肠杆菌Hcp2b对雏鸡脾脏mRNA表达谱的影响     

宋祥军  宋自超  沈啸  陈哲  蒋胡艳  侯曼曼  邵颖  涂健  祁克宗 《华北农学报》2022,37(1):232-238

为研究效应蛋白Hcp2b在禽致病性大肠杆菌(APEC)感染雏鸡过程中对脾脏的转录组学影响，利用兽医病理生物学与疫病防控安徽省重点实验室构建保存的hcp2b基因缺失株Δhcp2b及回复株Chcp2b肌肉注射7日龄雏鸡(以AE17菌株为阳性对照),感染24 h后采集精神沉郁的雏鸡脾脏检测组织载菌量并制作病理切片。选取缺失株Δhcp2b及野生株AE17感染脾脏组织进行转录组学测序，采用Real-time PCR进行测序结果鉴定；而后对差异表达基因进行GO分析、KEGG通路富集分析。结果显示，野生株AE17、缺失株Δhcp2b及回复株Chcp2b在脾脏组织载菌量差异不明显。组织切片观察发现，野生株AE17和缺失株Δhcp2b脾脏均出现组织间隙扩大，有充血现象出现。转录组学分析发现，缺失株Δhcp2b感染雏鸡脾脏后，诱导了脾脏基因mRNA的差异表达，筛选到515个差异表达基因(330个基因下调表达，185个基因上调表达)。Real-time PCR结果发现，Δhcp2b感染雏鸡后，脾脏中IL22、TNFRSF6B、TNFRSF8基因mRNA表达量下调，与测序结果变化趋势一致。GO分析发现，感染2...  相似文献   

长期连续施用生物质炭对土壤肥力、小麦产量和微生物群落结构的影响          下载免费PDF全文

陈哲  靳鹏辉  胡天龙  王慧  周蓉  张静如  刘琦  张燕辉  蔺兴武  谢祖彬 《土壤》2023,55(6):1230-1236

摘 要：基于始于2010年的长期田间试验，研究了每年6 t/hm2 玉米秸秆还田(Straw)，每年2.4 t/hm2 (BC1)、6 t/hm2 (BC3)和12 t/hm2 (BC5)玉米秸秆生物质炭添加对土壤肥力、小麦产量和微生物群落结构的影响。结果表明：与不添加玉米秸秆及其生物质炭的处理（CK）相比，BC5处理显著提高了小麦产量，三个剂量生物质炭处理平均增加小麦产量15%。经过11年的连续添加，土壤容重（BD）从CK的1.06 g/cm3降低至BC5处理的0.73 g/cm3，总碳（TC）从CK的14.9 g/kg 增加至BC5处理的83.8 g/kg。土壤有效氮（AN）、速效钾（AK）和有效磷（AP）均随施用量增加而增加，表现为BC5 > BC3 > BC1 > Straw ≥ CK。本研究中，长期连续施用玉米秸秆及其生物质炭没有显著改变细菌群落多样性，而BC5处理略微增加真菌群落多样性。PICRUSt2功能预测表明生物质炭处理显著增加了碳固定相关功能基因丰度，而降低碳降解相关功能基因丰度。  相似文献   

祁连山岛状冻土活动层土壤氮库对模拟冻融响应     

陈哲  徐巍  门双  张振华  张中华  王英典  赵新全  王文颖  孙建  邵新庆  杜岩功  周华坤 《草地学报》2023,31(1):19-28

气候变化改变了青藏高原降水和温度，并影响非生长季土壤冻融格局。本研究采用冻融模拟试验，探究了祁连山岛状冻土区高寒草甸活动层(0～20 cm)土壤在长期昼夜冻融交替(149次)过程中土壤氮库对融化温度(5℃,10℃,20℃)和含水量(15%,30%,45%)的响应。结果表明：昼夜冻融过程中土壤有效氮大量释放期长达50天，以溶解性有机氮(Dissolved organic nitrogen, DON)、铵态氮(NH⁺₄)累积为主。微生物量氮(Microbial biomass nitrogen, MBN)通过氮固持增加，发挥土壤有效氮“缓存库”作用；土壤含水量增加有利于冻融过程中DON和MBN积累，但含水量对NH⁺₄累积存在阈值效应；融化温度对水分饱和土壤氮组分含量影响差异不显著，而干燥和湿度适中土壤DON,NH⁺₄及硝态氮净累积量对低温融化响应较高温条件更敏感。气候变化驱动下冻融过程中温度和水分耦合效应对冻土区氮转化影响机制值得深入探讨。  相似文献   

麦秸粉碎长度对二点委夜蛾的防控效果     

李秀芹  陈立涛  刘莉  崔彦  韩晓辉  蔡晓玲  陈哲  韩玉芹  程瑞玲  李树洋  张志英  张颖  张立娇  王永芳  董志平 《河北农业科学》2023,(1):42-46

2015～2021年选择有二点委夜蛾幼虫发生，麦茬高度（15 cm左右）相当，人工常规尺量麦秸粉碎长度分别为≤5 cm、5.1～10 cm、10.1～15 cm的3种田块，采用五点取样法调查虫量，顺垄调查被害株率，以麦秸粉碎长度10.1～15 cm田块虫量和被害株率为对照（景县以未进行麦秸粉碎的田块为对照），分析了麦秸粉碎长度对二点委夜蛾的控制效果。结果表明：麦秸粉碎长度≤5 cm时，麦秸可以自然沉降于麦茬之间，不能形成"麦茬上覆盖麦秸"的生态环境，防虫效果平均为97.4%，保苗率高达100%，值得大面积推广应用；麦秸粉碎长度为5.1～10 cm时，防虫效果平均为80.3%，保苗率平均为70.1%，虽然有一定的防控效果，但并不理想，玉米播种时需要结合清除玉米播种行麦秸、灭茬、秸秆离田利用等生态调控防控。  相似文献   

优质荔枝品种‘井岗红糯’在海南的引种表现     

吴文碟  王祥和  周瑞云  周文静  陈哲  冯学杰  范鸿雁  吴凤芝  胡福初 《中国果业信息》2022,51(6)

为进一步优化海南荔枝产区荔枝品种结构，以当地主栽品种‘白糖罂’为砧木，通过高接换种引进优质荔枝品种‘井岗红糯’在海南进行生产适应性试验。结果表明，‘井岗红糯’与‘白糖罂’亲和性良好，能够很好地适应引种地的气候和环境条件，树体生长健壮，能够正常开花结果。‘井岗红糯’荔枝平均单果重为16.52 g，可食率约为74.90 %，可溶性固形物达18.17 %，其果肉细嫩软糯、香甜，口感好，商品性高。果实成熟期在5月底至6月上旬，与‘无核荔’相近，比海南主栽品种‘妃子笑’晚15~20 d左右，比原产地广东省早熟25~30 d。可见，引进‘井岗红糯’荔枝可优化调整我省荔枝品种结构，且因与原产地具有上市时间差，降低了销售压力和市场风险，有助于推动我省荔枝产业的可持续健康发展，可适度推广种植  相似文献   

葡萄UBP基因家族对非生物胁迫的响应及VvUBP基因功能研究     

郭雁飞  徐涛  陈天池  陈哲  杨杰  龚丽丽  斯昊璇  吴月燕 《核农学报》2024,(1):33-45

泛素特异蛋白酶是一个广泛存在于真核生物中且高度保守的基因家族，通过去泛素化作用调节细胞蛋白的各种生理活动。为了系统探究葡萄UBP基因家族功能，本研究运用生物信息学方法对葡萄UBP基因家族成员进行鉴定与分析，利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术分析VvUBPs基因在不同非生物胁迫下的表达模式。结果表明，VvUBP基因家族包括27个成员，编码序列（CDS）长度为594～4 812 bp，编码氨基酸序列长度为197～1 603 aa。系统进化分析结果显示，UBP基因家族可分为8个亚组（GⅠ～GⅧ）。VvUBPs在茎中的表达水平相对较低，VvUBP27、VvUBP10和VvUBP23分别在卷须、花和叶中表达水平较高。外源茉莉酸甲酯（MeJA）处理可显著诱导VvUBP5、VvUBP12、VvUBP18和VvUBP27等4个基因高表达，外源水杨酸（SA）处理可显著诱导VvUBP5和VvUBP19基因高表达。VvUBP15在盐胁迫浓度0.6%时的表达量增加最明显，VvUBP6在弱光胁迫下表达显著下降以及VvUBP25在高温胁迫6 h时增幅最大。综上，VvUBP基因家族成员能够响应不同的非生物...  相似文献   

长期连续秸秆还田和生物质炭施用对稻田N₂O排放的影响          下载免费PDF全文

靳鹏辉  陈哲  王慧  徐乔  胡天龙  周蓉  蔺兴武  刘琦  谢祖彬 《土壤》2023,55(5):964-973

为了评估麦季多年连续秸秆还田和生物质炭施用对稻麦轮作系统下稻田N₂O排放的影响，于2010年麦季开始开展了为期11 a的麦季秸秆还田和生物质炭施用定位试验。试验共包括5个处理：无玉米秸秆还田和生物质炭施用(CK);6 t/(hm²·a)玉米秸秆还田(CS);2.4 t/(hm²·a)生物质炭施用(BC1);6 t/(hm²·a)生物质炭施用(BC2)和12 t/(hm²·a)生物质炭施用(BC3)。结果表明，BC2和BC3处理较CK均显著提高了土壤碱解氮、有效磷、速效钾、易氧化碳、可溶性有机氮和土壤微生物生物量氮含量。CS、BC1和BC2处理水稻生长季N₂O总排放量与CK没有显著差异，但是BC3处理的N₂O总排放量比CK提高了245.31%，并显著高于其他处理。BC3处理的N₂O总排放量和施氮肥后N₂O排放高峰期的累积排放量分别比CK提高了3.84 kg/hm²和3.3...  相似文献