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正肉鸡败血支原体病是肉鸡养殖过程中比较常见的一种慢性呼吸道疾病,该种疾病的致病菌为败血支原体。鸡群中一旦出现该种疾病,隐性带菌鸡会反复感染健康鸡,导致治疗效果差,治疗成本增加,给养殖户造成不小的经济损失。该种疾病没有明显季节性,一年四季均可发生,但以冬春季节,气候温度变化较大最容易发生。肉鸡败血支原体病发生和饲养管理有着密切联系,鸡群饲养密度较大,鸡舍环境卫生差,粪便堆积,有毒有害气体累积,饲料营养价值差等因素都会导致或加 相似文献
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本实验旨在研究C型钠肽(CNP)预处理对绵羊卵母细胞体外成熟(IVM)及相关基因(Dnmt1、Zar1、Mater、HAS2、PTX3和PTGS2)表达的影响。以体外成熟24 h为对照组,研究CNP预处理组(200nmol/L CNP预处理4 h然后体外成熟24 h)中卵母细胞经孤雌激活(PA)后的发育情况,并通过RT-q PCR检测CNP预处理对成熟相关基因表达的影响。结果表明:200 nmol/L CNP可在4 h内有效抑制卵母细胞减数分裂进程。CNP预处理组中孤雌胚胎囊胚率显著高于对照组(P0.05);绵羊卵母细胞成熟培养前,CNP预处理组中卵丘细胞扩展相关基因HAS2、PTGS2和PTX3表达量较对照组极显著上调(P0.01);CNP预处理组中母源基因Dnmt1、Zar1和Mater表达量与对照组均无显著差异(P0.05)。绵羊卵母细胞成熟培养后,CNP预处理组中PTX3表达量极显著高于对照组(P0.01),而CNP预处理组中HAS2表达量较对照组极显著下调(P0.01);CNP预处理组中母源基因Dnmt1、Zar1和Mater表达量均显著高于对照组(P0.05)。综上表明,CNP预处理可影响绵羊卵丘细胞扩展相关基因HAS2、PTGS2、PTX3和母源基因Dnmt1、Zar1、Mater的表达,并提高绵羊卵母细胞成熟质量及早期胚胎发育能力。 相似文献
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【目的】 研究p66Shc在绵羊卵母细胞中的表达特征及其与卵母细胞胞质氧化还原稳态的关系,为揭示p66Shc参与调控卵母细胞胞质氧化还原稳态分子机制提供理论依据。【方法】 试验所用卵丘-卵母细胞复合体(cumulus-oocyte complexes, COCs)来源于屠宰场的绵羊卵巢。分别收集成熟前优质和劣质、常规成熟24 h及成熟30 h老化的卵母细胞,采用实时荧光定量PCR对成熟前后不同质量绵羊卵母细胞中p66Shc mRNA的表达量进行分析,利用细胞免疫荧光结合MitoTracker Red探针对p66Shc蛋白和线粒体进行共定位,同时利用荧光探针DCFH-DA和卵母细胞自发荧光分别对成熟前后不同质量卵母细胞内ROS水平和氧化还原稳态进行检测。此外,采用外源H2O2诱导的氧化应激处理成熟前优质卵母细胞,并对p66Shc蛋白的表达及定位进行了检测分析。【结果】 实时荧光定量PCR结果显示,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞中p66Shc mRNA表达量分别显著(P<0.05)高于成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞。然而优质卵母细胞成熟前后p66Shc mRNA表达量没有显著差异(P>0.05)。共定位结果表明,p66蛋白主要分布在线粒体分布活跃的区域。细胞免疫荧光结果显示,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞中p66Shc蛋白表达量也分别显著(P<0.05)高于成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞。与成熟前优质和常规24 h成熟的卵母细胞相比,成熟前劣质和成熟后老化卵母细胞表现出线粒体分布紊乱和活性下降、ROS水平升高以及氧化还原稳态的失衡。此外,与未添加外源H2O2的对照组相比,外源H2O2处理成熟前优质卵母细胞诱导的氧化应激显著(P<0.05)上调p66Shc蛋白的表达并促使 p66Shc由胞质向细胞核定位。【结论】 p66Shc基因在劣质和老化的绵羊卵母细胞中呈现高水平的表达,H2O2诱导的氧化应激显著上调p66Shc蛋白的表达并影响其亚细胞定位。总之,绵羊卵母细胞中p66Shc表达上调影响了胞质的氧化还原稳态。 相似文献
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GPX5在成年绵羊附睾中的表达与蛋白定位 总被引:5,自引:0,他引:5
【目的】研究谷胱甘肽过氧化物酶-5(glutathione peroxidase type-5, GPX5)在成年绵羊附睾的表达特征以及GPX5蛋白在附睾中的定位,为绵羊精子在附睾中抗氧化机制的研究提供理论依据。【方法】采取年龄相近的成年蒙古绵羊的附睾、睾丸和输精管。每一只公羊的附睾分别按照附睾头、附睾体和附睾尾进行分割。样品保存于-80 ℃冰箱,采用实时荧光定量PCR和Western blotting的方法,对成年绵羊的附睾、睾丸和输精管的GPX5 表达量进行分析。将新鲜的组织样品各部分切取适合大小浸泡于4%多聚甲醛溶液中24h,按照石蜡切片的方法制做组织切片。用GPX5特异性抗体孵育组织切片,利用DAB显色试剂盒对阳性信号进行标记。【结果】实时荧光定量PCR结果显示,成年绵羊附睾头GPX5基因的表达量极显著高于附睾体和附睾尾(P<0.01),而在输精管和睾丸几乎不表达。Western blotting的结果显示,GPX5蛋白在成年绵羊附睾头高表达,在附睾体和附睾尾有微量蛋白存在,睾丸和输精管中未发现GPX5蛋白。这表明GPX5主要在成年绵羊附睾头表达;经过免疫组化染色分析,GPX5蛋白主要位于附睾头上皮细胞质以及静纤毛,附睾体和附睾尾中的GPX5蛋白主要集中在静纤毛。在附睾头、附睾体和附睾尾中的精子上以及附睾腔都可以观察到GPX5蛋白,表明GPX5蛋白从附睾上皮分泌到附睾腔中,随着精子在附睾中的运输与精子结合。【结论】在成年绵羊附睾中,GPX5主要由附睾头上皮细胞合成和分泌,在附睾管腔中与精子结合,为精子功能的正常发挥提供保护。 相似文献
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为构建牛生长分化因子9(GDF-9)基因真核表达载体,观察GDF-9基因真核表达载体转染牛卵丘细胞后对卵丘扩展相关基因表达的影响,试验在质粒pcDNA4 myc-his的多克隆位点插入GDF-9基因构建真核表达载体pcDNA4 myc-his-GDF-9,用脂质体转染牛卵丘细胞,利用Western blotting检测了GDF-9蛋白的表达量,同时利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术检测牛卵丘细胞中卵丘扩展相关基因的表达量.结果发现,转染了pcDNA4 myc-his-GDF-9的牛卵丘细胞中检测到GDF-9蛋白的表达,且牛卵丘细胞扩展相关基因PTGS2、PTX3和HAS2的表达量显著提高(P< 0.05),表明牛pcDNA4 myc-his-GDF-9可有效地转染到牛卵丘细胞中,该试验结果为进一步研究GDF-9基因的功能奠定了基础. 相似文献
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麻栎(Quercus acutissima)和栓皮栎(Q.variabilis)是我国重要的森林树种,为了进一步揭示栎类叶脉结构对于环境变化的适应,利用叶脉序信息转换软件LEAF GUI对中国北方自然分布的麻栎和栓皮栎的叶脉序进行量化分析,并与环境因子进行比较。结果表明,麻栎叶面积、叶周长和叶脉间距离与年平均温度呈正相关,网眼数、节点数和叶脉密度与年平均降水量呈负相关;栓皮栎叶面积、叶周长和叶脉间距离与年平均温度呈正相关性,网眼面积与年平均降水量呈正相关性,网眼数、环形结构、节点数和叶脉密度与年平均降水量呈负相关性。 相似文献
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幼畜体外胚胎移植(Juvenile In Vitro Embryo Transfer,JIVET)技术是利用幼畜对外源激素敏感的生理特点,采用外源促性腺素诱导幼畜卵泡超数发育,结合卵母细胞体外成熟、体外受精和胚胎移植等技术生产后代,该技术体系的研究与应用可以充分发挥优秀母畜繁殖潜能,快速扩繁良种畜群。近年来,国内外对绵羊JIVET技术研究比较多,但应用JIVET技术生产体外胚胎的效率低下、效果不稳定仍然是一个普遍问题。迄今为止,大多数的研究致力于加强供体羔羊选择、优化激素处理方案以及提高羔羊卵母细胞体外发育能力等方面。本文综述了羊JIVET技术的原理与最新研究进展以及影响JIVET技术效率所存在的内因和外因,旨在为深层次探索羔羊卵子发生和卵泡发育调控机制提供理论依据,促进JIVET技术的研究与应用。 相似文献
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目前很多农村养殖户开始在农村散养肉鸡、土鸡等,但是随着经济模式的不断改变,在养殖的过程中开始出现一些问题。因此加强这方面的认识,对提升农村经济具有重要的作用。本文主要研究林下散养鸡常见病的防治工作,供读者参考。 相似文献