东北雅罗鱼微卫星分子标记的筛选及特征分析   总被引：4，自引：0，他引：4  

刘金亮  常玉梅  徐丽华  刘春雷  梁利群  韩国苍  高玉奎  柳玉海 《华北农学报》2011,26(1):87-93

通过磁珠富集法筛选东北雅罗鱼的微卫星分子标记.采用限制性内切酶Sau 3AI对东北雅罗鱼基因组DNA进行酶切,选取400～900 bp的片段进行PCR全基因组扩增,并利用生物素标记的(CAG)8、(TGA)8、(AGAT)6、(GATT)6 4个探针进行微卫星片段的富集.将得到的片段与T载体连接后转入DH5α大肠杆菌中...  相似文献   

鲤鱼耐寒性状研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

常玉梅  孙效文  梁利群 《上海海洋大学学报》2003,(2):102-105

用80个随机引物对黑龙江野鲤(耐寒)、柏氏鲤(不耐寒)和杂交F1(越冬成活)的群体混合DNA样品进行RAPD—PCR扩增，结果引物S1043、S1052和S1066扩增出与抗寒性状相关的分子标记各一个。至此，共获得9个与鲤鱼抗寒性状相关的分子标记，进一步表明抗寒性是数量性状(QTL)受微效多基因控制。此外，就RAPD—PCR实验中需要注意的问题如模板纯度、水的去离子和不同商标酶的活性等进行了简单的讨论；并对目前所应用的淡水鱼类抗寒基因工程研究策略及现状进行了简单概述。  相似文献   

中国对虾（Penaeus chinensis）精子做载体将生长激素基因导入受精卵的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘萍  孔杰  李健  王清印  杨丛海  孙孝文  梁利群 《中国水产科学》1996,3(1)

本实验采用卡介苗注射器将羊生长激素基因溶液注射到亲虾纳精囊中，以精子为载体，携带基因导入对虾受精卵，而达到转基因对虾的目的。经ＰＣＲ检测表明：１．经ＳＴＥ（ｐＨ８．０）第一次洗涤精子的洗涤液呈阳性信号；第２－４次的洗涤液呈阴性；２．多次洗涤后的精子抽提的ＤＮＡ呈阳性；３．检测 １０个样品１００尾仔虾中有一个样品呈阳性结果，转基因比率在 １％以上。同时斑点杂交结果也印证了上述结果。  相似文献   

低温胁迫对鲤血清生化指标的影响   总被引：8，自引：0，他引：8  

常玉梅  曹鼎臣  孙效文  梁利群 《水产学杂志》2006,19(2):71-75

本研究主要报道了荷包红鲤抗寒品系(Cyprinus．carpio var．wuyuanensis)与大头鲤(Cyprinus．pellegrini pellegrini)杂交F_2在温度骤降过程中,温度对其血清中的总蛋白、白蛋白、总胆红素、胆固醇、尿素氮、血糖和甘油三酯等血清生化指标的影响。骤降试验以2℃为降幅,每次间隔1h,依次将10℃、8℃、6℃和4℃,对应编号为A组、B组、C组和D组。数据经SAS8．0统计软件单因素方差分析。结果发现,除温度对尿素氮有显著性影响外{F0．05(3,28)=3.99,P=0．0175(P＜0．05)},温度与其它指标的变化无显著性关联。再对4组样本血清的各项指标进行Ducan式多重范围比较分析。结果表明,D组(4℃)与B组(8℃)总胆红素存在显著性差异(P＜0．05)；C组(6℃)与A(10℃)、B (8℃)组尿素氮存在显著性差异(P＜0．05)。  相似文献   

5种鲟、鳇鱼基因组DNA遗传多样性分析   总被引：17，自引：3，他引：17       下载免费PDF全文

梁利群  孙效文  董崇智  尹家胜 《中国水产科学》2002,9(3):273-276

以史氏鲟(Acipenserschrencki)、达氏鳇(Husodauricus)俄罗斯鲟(A.gueldenstaedti)、小体鲟(A.ruthenus)西伯利亚鲟(A.baeri)的基因组DNA为实验材料,用改进的DNA提取方法获得了完整的基因组DNA片段。通过25个SSLP及Ⅰ型引物对5种鲟鳇鱼的基因组DNA进行PCR多态性引物筛选,获得11个能扩增出遗传多态性的有效引物,通过对5种鱼的PCR分析,平均遗传距离为0.748,遗传距离最大的为达氏鳇和小体鲟之间为0.9355,DNA分析结果还显示,鲟鳇鱼的遗传多样性程度十分低下(47.93%)。同时建立了5种鲟鳇鱼的聚类图。  相似文献   

磁珠富集法筛选虾夷扇贝微卫星序列   总被引：15，自引：0，他引：15       下载免费PDF全文

赵莹莹  朱晓琛  孙效文  梁利群 《中国水产科学》2006,13(5):749-755

采用生物素-磁珠吸附微卫星富集法，筛选虾夷扇贝（Patinopecten yessoensis）微卫星分子标记，并用同位素法进行二次筛选。结果在筛选的192个菌落中获得136个阳性克隆，经测序分析，获得微卫星序列179个，其中完美型占50.8％，非完美型43.0％，混合型占6.1％。除探针中使用的CA重复外，还得到TC、AG、ACA、CTAT的重复序列。用引物设计软件Primer Premier5.0设计引物85对，挑选其中的40对合成并进行筛选。  相似文献   

磁珠富集法与小片段克隆法筛选鲤微卫星的比较研究   总被引：34，自引：10，他引：34  

孙效文  贾智英  魏东旺  鲁翠云  梁利群 《中国水产科学》2005,12(2):126-132

用2种方法克隆黑龙江鲤(Cyprinus(Cyprinus)carpio haonatopterus)的微卫星序列。这2种方法分别是：①经典的小片段DNA克隆库,用末端标记的[γ^-32]ATP的CA重复序列为探针筛选;②将酶切获得的小片段DNA用结合有磁珠的并连接有15个CA重复序列的生物素进行富集,获得的含有CA重复的DNA片段并经过两次PCR扩增再克隆的方法获得富集微卫星片段的克隆库。从前一个方法的克隆库中筛选2000个菌落,获得阳性克隆45个,有22个含有微卫星,完美型的占63．6％,非完美型的占22．7％,混合型的占13．7％,重复次数超过10的有9个,占40．9％;从方法②的克隆库中筛选2600个菌落,获得阳性克隆1300个,测序其中的390个克隆,微卫星314个,完美型的占79．0％;非完美型的占14．3％;混合型的占6．7％,重复次数超过10的有293个,占93．3％。结果表明,用生物素结合磁珠富集法克隆微卫星效率高,成本低,所获微卫星质量高,是一种值得推荐的微卫星制备方法。  相似文献   

摄食转全鱼基因鲤的小鼠亚急性毒性分析     

曹顶臣  常玉梅  耿波  孙效文  梁利群 《东北林业大学学报》2009,37(10)

通过投喂实验、血液学指标分析、脏器与体质量百分比分析及组织病理检查4个方面,对摄食转基因鱼肉饲料的小鼠进行亚急性毒性研究.结果显示,摄食转全鱼基因鲤鱼肉饲料的小鼠(实验组)在实验期间(90d),其外观、摄食和活动均正常;与摄食非转基因鱼肉饲料的小鼠(对照组)相比,二者在血清生化和血液生理指标上均无明显差异,只在尿素氮质量分数和白细胞、淋巴细胞、嗜碱性细胞数量上与摄食非鱼肉饲料的小鼠(空白组)存在一定差异.在肝脏和肾脏两脏器占体质量的百分比的研究中发现,3组实验小鼠均无明显差异;最后,实验组小鼠两脏器经组织切片检查,亦未发现有任何病变发生.结果初步证明摄食转全鱼基因鲤对哺乳动物小鼠是安全的,这为今后转全鱼基因鲤的批准上市提供了理论依据.  相似文献   

新疆赛里木湖3种引进白鲑鱼类的DNA条形码分析     

常玉梅  孙博  苏宝锋  梁利群  侯玉军 《中国水产科学》2018,25(4):819-826

本研究采用DNA条形码技术对新疆赛里木湖引进种贝加尔凹目白鲑(Coregonus migratorius)、高白鲑(Coregonus peled)和宽鼻白鲑(Coregonus nasus)进行了种质鉴定和遗传多样性分析。单倍型检测发现,3种白鲑共检测到15种单倍型,其中贝加尔凹目白鲑独享5种,宽鼻白鲑7种,高白鲑5种,后二者共享2种单倍型为高白鲑特有单倍型,表明二者存在不同程度的基因交流,高白鲑可能将其基因通过杂交渐渗到宽鼻白鲑群体内。系统发育分析显示,15种单倍型分成3组分别聚类在3个不同分支上,每个分支所属白鲑分别与其发表序列聚在一起,表明赛里木湖引进的3种白鲑仍保持着原种良好的种源特性;而贝加尔凹目白鲑的近缘种秋白鲑(Coregonus autumnalis)则单独聚为一支,与贝加尔凹目白鲑的遗传距离最大(0.027),支持将二者划分为两个独立种。遗传多样性分析显示,3种白鲑的遗传多样性适中,但由于宽鼻白鲑存在杂交的可能性,因而其遗传多样性高于贝加尔凹目白鲑和高白鲑。建议赛里木湖渔业生产部门继续在繁殖、捕鱼等生产方式上进行科学规划,引进先进的种质鉴定技术,避免人工杂交造成的种质污染;同时维持和提高白鲑属鱼类的遗传多样性,保证湖区特色渔业的可持续发展。  相似文献   

四种常用渔药对雅罗鱼杂交幼鱼的急性毒性   总被引：1，自引：0，他引：1  

张立民  苏宝锋  常玉梅  孙博  闫浩  梁利群 《水产学杂志》2016,(6):47-51

在水温25℃下,采用常温静水生物测试法研究硫酸铜及硫酸亚铁合剂、敌百虫、复合季铵碘和阿维菌素对平均体质量(1.47±0.2)g的雅罗鱼杂交(瓦氏雅罗鱼Leuciscus waleckii Dybowski×高体雅罗鱼Leuciscus idus)幼鱼的急性毒性。结果表明:敌百虫、硫酸铜及亚铁合剂、阿维菌素和复合季胺碘的24h、48h和96h半致死浓度(LC_50)分别为1.3863mg·L~(-1)、0.8194mg·L~(-1)和0.3564mg·L~(-1);38.7298mg·L~(-1)、26.509mg·L~(-1)和26.509mg·L~(-1);3.30mg·L~(-1)、2.40mg·L~(-1)和2.30mg·L~(-1);16.10mg·L~(-1)、16.10mg·L~(-1)和16.10mg·L~(-1);安全浓度分别为0.0859mg·L~(-1)、3.7257mg·L~(-1)、0.4mg·L~(-1)和4.80mg·L~(-1)。这4种药物对雅罗鱼幼鱼的毒性由强至弱依次为:敌百虫阿维菌素硫酸铜及硫酸亚铁合剂复合季铵碘。  相似文献