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牦牛外周血单个核细胞抑制消减cDNA文库的构建及部分差异表达分子的克隆分析 总被引:2,自引:0,他引:2
为筛选牦牛外周血单核细胞(PBMC)差异性基因,以刀豆素A(ConA)和脂多糖(LPS)联合刺激的PBMC cDNA为实验组,未经诱导刺激的PBMC cDNA为驱动组,利用抑制性消减杂交技术(SSH)构建了丝裂原诱导刺激PBMC的消减文库并对其部分阳性克隆进行了EST序列分析.从消减文库中随机挑取16个阳性克隆,进行PCR鉴定,显示克隆的重组率大于93%,插入片段大小大部分集中在200 bp~1 000 bp之间.随机挑取100个克隆进行测序及同源性分析,初步获得27条差异表达基因片段,其中24个为已知基因,3个为新ESTs序列;随机选择非重复的6个差异表达的序列设计引物,以半定量PCR方法验证其消减效率.结果显示,均从构建的消减文库中扩增到目的片段,其中5个为诱导性差异表达分子,1个为诱导特异性表达分子,说明该文库有较高的质量.本研究应用抑制消减杂交技术构建了牦牛PBMC的差异表达cDNA文库,并高通量克隆鉴定了相关功能基因片段,表明该技术手段有助于快速发现牦牛新功能基因. 相似文献
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CpG DNA重组质粒对猪O型口蹄疫病毒抗原的免疫佐剂效应 总被引:1,自引:0,他引:1
作者应用含CpG基序序列的重组质粒(即CpG DNA)作为免疫佐剂,评价其对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗的免疫增强效果.结果表明:CpG DNA重组质粒与猪口蹄疫灭活病毒抗原疫苗配伍免疫小鼠,CpG DNA重组质粒对小鼠具有较强的免疫佐剂效应,能促进口蹄疫病毒抗原诱导产生较高水平的特异性抗体,其抗体滴度是空载体疫苗对照的2倍.CpG DNA重组质粒与商品化猪口蹄疫灭活疫苗配伍免疫试验猪,其增强抗原诱导的特异性抗体滴度最高可达标准疫苗的4倍以上,也显著高于空载体疫苗对照;与病毒纯化抗原配伍免疫动物,攻毒后其免疫保护效力的PD50高达13.00,远高于标准疫苗对照(PD50> 4.69).在CpG DNA重组质粒剂量选择试验中,含低剂量的CpG DNA疫苗(50、200μg·头份-1)都比高剂量组(500 μg·头份-1)诱导的抗体滴度高,其中50和200μg·头份-1的CpG DNA剂量,在接种后14~32 d诱导的抗体滴度高达1:1 500,是标准疫苗的4~5倍,而500μg·头份-1剂量诱导的抗体仅是标准疫苗的2倍,说明CpG DNA重组质粒在低剂量时即可发挥强烈的佐剂效应.研究表明CpG DNA对猪O型口蹄疫病毒抗原疫苗有较强的免疫佐剂效应,且使用剂量低,应用前景广阔. 相似文献
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2009年对云南昭通不同类型苹果园绣线菊蚜的种群动态及其天敌群落组成进行了系统调查。按管理模式分成3类,每类型果园选取5棵12枝新梢的20个叶片进行害虫定枝调查,天敌调查采用树上目测、树盘扫网和诱集调查。结果表明,常规管理园绣线菊蚜的种群密度高于有机示范园和化学防治园;化学防治园绣线菊蚜的种群数量最低。三类果园天敌群落组成相似性差异较大,天敌物种数和个体数有机示范园均大于常规管理园和化学防治园,益害比最高达1304。有机示范园的管理模式能较好的保护天敌,绣线菊蚜的种群密度也得到了很好得控制。 相似文献
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沿海沙地木麻黄更新迹地6种相思树的水源涵养功能比较 总被引:1,自引:0,他引:1
对木麻黄更新迹地上引种的8年生6种相思树种林分涵养水源能力进行了比较,并以平潭2号木麻黄为对照,结果表明:与木麻黄相比,肯氏相思、厚荚相思和纹荚相思有更强的水源涵养能力,在6种相思中,地上部分持水量以厚荚相思为最高,达42.88 t.hm-2,大小排序为厚荚相思>肯氏相思>纹荚相思>卷荚相思>大叶直干相思>马占相思;根系土壤层的持水能力以肯氏相思的土壤蓄水量最大,达1 795.02 t.hm-2;林分总持水量以肯氏相思最高,达1 824.04 t.hm-2,其次为厚荚相思和纹荚相思,分别达1 770.75 t.hm-2和1 759.60 t.hm-2。从涵养水源的能力角度来评判,肯氏相思、厚荚相思和纹荚相思作为沿海木麻黄防护林更新树种,有一定前景。 相似文献
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网纹甜瓜因品质优,风味独特,栽培技术要求高,市场售价居高不下。实施效益农业,网纹甜瓜的引种试种在各地普遍展开。象山县地处浙东沿海,夏季高温高湿,早春低温阴雨,光照不足,秋季虽光照充足,但温度不足。这样的自然条件,与网纹甜瓜需要高温干燥、光照充足、昼夜温差大等气候条件有一定的差异,但利用大棚遮雨设施栽培却可基本满足网纹甜瓜生产所需条件,创造较高的经济效益和社会效益。现将阿鲁斯网纹甜瓜试种表现和栽培技术简介如下。1品种特征阿鲁斯网纹甜瓜品种系日本进口品种。适合温室大棚早春、晚秋季节种植。节间短,长势强,较耐生长初… 相似文献
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乙烯利控制瓜类雌雄花的原理和生产应用 总被引:1,自引:0,他引:1
生产上应用乙烯利可促进瓜类蔬菜提早出现雌花和增加雌花数量,但往往很多菜农在使用中没有正确掌握方法,达不到增产的目的,甚至造成不良后果,集中反应为乙烯利在控制瓜类雌雄花时的使用浓度、使用时间和喷药次数等问题.为此,作一专题探讨,为农业增效、农民增收服务. 相似文献