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【目的】为明确Lasiodiplodia theobromae侵染芒果组织的过程中对防御酶相关基因的诱导表达情况。【方法】本研究采用实时荧光定量PCR技术(qRT PCR)研究了Lasiodiplodia theobromae侵染芒果叶片和成熟果实时Mi POD、Mi PPO、Mi CHI、Mi PR1等7个防御酶基因表达情况。【结果】Lasiodiplodia theobromae侵染芒果果实后均不同程度的激活芒果抗病防御酶的活性,抗病防御酶相关基因的表达量极显著,均在被侵染36 h后达最大值,基因Mi POD表达量最高为0 h的33倍,Mi PAL为0 h的450倍;侵染叶片后,活性氧相关基因表达量极显著,均在被侵染24 h后达最大值,抗病相关基因中Mi POD和Mi PPO的表达量呈先上升后下降趋势,基因Mi CHI持续高表达,48 h时表达量达到最大值约为0 h的40倍,Mi PR1在接种72 h时出现最高表达量。【结论】研究表明,寄主植物感病后,Mi POD、Mi PPO、Mi CHI、Mi PR1等7个防御酶基因活性增强,增加寄主植物对病原菌的抵抗能力,进而延缓了病原菌在寄主组织内的迅速扩展。 相似文献
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为研究芒果可可球二孢枝枯病菌对甲基硫菌灵的敏感性,以期为该病的综合防治提供参考。本文采用菌丝生长速率法测定了来自中国芒果主产区海南、广东、广西、云南、 四川、贵州、福建和台湾 8 省份的 104株芒果枝枯病菌对甲基硫菌灵的敏感性。结果表明:芒果枝枯病菌株对甲基硫菌灵的EC50范围为0.0056~1.2852μg/mL,平均值为(0.3923±0.2267) μg/mL,最大EC50值是最小EC50值的229.5倍。菌株对甲基硫菌灵的敏感性频率分布近似呈单峰曲线,平均EC50值可作为菌株对甲基硫菌灵的敏感性基线。根据抗性分级标准,104株菌株中,均未出现抗性菌株。芒果可可球二孢枝枯病菌对甲基硫菌灵具有较高的敏感性,生产上仍具有较高的使用价值,但不同菌株的敏感性之间具有一定差异性,存在潜在抗性风险。 相似文献
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杧果炭疽病菌漆酶基因Cglac3序列特征及其在两个侵染相关基因突变体中的表达分析 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究运用同源克隆技术克隆了杧果炭疽病菌(Colletotrichum gloeosporioides)的Cglac3漆酶基因,并采用实时荧光定量PCR分析了该基因在侵染过程、漆酶基因LAC1突变体、外切葡聚糖酶基因CgCBH1突变体中的差异表达情况。结果表明,杧果炭疽病菌漆酶Cglac3基因大小为1842 bp,含3个内含子,大小分别为56、51、58 bp。Cglac3开放读码框编码558个氨基酸,蛋白分子量为61.38 kDa,等电点(PI)为4.50。与未侵染对照0 h的表达量相比,Cglac3在6 h孢子萌发形成附着胞时表达量迅速升高,在12 h侵入寄主后达到最高,之后在菌丝扩展、叶片显症过程中出现波动,但均远高于0 h的表达量,显示Cglac3在侵染的不同阶段均发挥着重要的作用,可能是胶孢炭疽菌的重要致病因子之一。与野生型相比,Cglac3表达量在杧果炭疽病菌漆酶基因LAC1敲除突变体中下降了74%,在外切葡聚糖酶基因CgCBH1敲除突变体中下降了56%;在CgCBH1缺失敲除突变体中,LAC1的表达下降了68%,与Cglac3的表现趋势一致,说明Cglac3的表达受LAC1调控,外切葡聚糖酶基因CgCBH1也会影响Cglac3和LAC1的表达。 相似文献
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芒果炭疽病是世界性的主要病害之一,引起芒果炭疽病的病原菌有胶孢炭疽菌和尖孢炭疽菌2种。通过溶壁酶酶解菌丝体成功制备尖孢炭疽菌原生质体,用抗潮霉素基因作为选择标记,采用PEG介导的原生质体转化法,用绿色荧光蛋白表达载体(pCT74-sGFP)转化原生质体,获得表达GFP尖孢炭疽菌的转化子菌株;转化子菌株在含潮霉素平板上经多次单孢纯化后,在无选择压下连续继代培养仍能发出稳定而强烈的绿色荧光,用GFP特异性引物PCR扩增转化子菌株基因组DNA获得预期大小片段,表明gfp基因已成功导入芒果炭疽病病原菌基因组中,且稳定遗传;GFP标记菌株生长正常,致病性和野生型菌株无明显差别,这为进一步研究该病菌在自然界的生物学及侵染方式奠定了基础。 相似文献
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由多主棒孢菌(Corynespora cassiicola)侵染引起的巴西橡胶树棒孢霉落叶病是影响橡胶树产胶量的主要病害之一。为了开展该病原菌在活体叶片中的病理学研究,本实验将绿色荧光蛋白gfp基因表达盒插入了多主棒孢菌经定点突变后的ITS序列中,构建了重组质粒p ITGH,并经PEG介导转化了原生质体,获得了GFP标记的多主棒孢菌转化子,所获得的转化子经过连续7次转接培养后仍能在分生孢子、分生孢子梗、芽管和菌丝中稳定地发出强烈的绿色荧光,其生长特性和致病性与野生菌株无明显差异。 相似文献
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为研究芒果炭疽病菌对多菌灵的抗药性,从国内及泰国、美国夏威夷等芒果产区采集病样分离、纯化菌株,采用生长速率法测定其对多菌灵的敏感性。结果表明,分离获得的129株菌株对多菌灵的EC50值为0.02~111.66 μg/mL,平均值为6.2984 μg/mL,最大EC50值是最小EC50值的5583倍,抗性菌株23株、占17.83%。不同地区和采集部位的芒果炭疽病菌菌株对多菌灵的敏感性不同,来自泰国的菌株EC50平均值最高、广东的次之,分离自叶片的菌株EC50值变化幅度最大。说明芒果炭疽病菌对多菌灵已产生一定程度的抗药性,应高度重视芒果炭疽病菌的抗药性问题。 相似文献
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芒果炭疽病对代森锰锌的抗药性评价 总被引:2,自引:0,他引:2
为了解芒果炭疽病菌对代森锰锌的敏感性,在多年未使用农药的野生芒果种植区采集获得64个单孢菌株,通过生长速率法测定其对代森锰锌敏感性,EC50平均值为(19.59±17.71)μg/mL,以此作为敏感性基线评价采集自国内及泰国、美国等芒果产区128株芒果炭疽病菌对代森锰锌的敏感性。不同菌株对代森锰锌的敏感性有明显的差异,EC50值为0.09~3232.09μg/mL,均值为(284.64±445.28)μg/mL。不同地区菌株对代森锰锌的敏感性不同,菌株抗性频率以云南的最高,广西其次,美国的最低,其他地区的以低抗为主,广西和广东均出现了高抗菌株。不同部位菌株分离自叶片的最多,茎的最少,叶和果均出现了高抗菌株。 相似文献