哲罗鲑精子冷冻保存     

田永胜  马允  解子牛  王位莹  罗志远  李胜忠  张俊杰 《农业生物技术学报》2016,(1):90-97

哲罗鲑(Hucho taimen)是分布于额尔齐斯河和黑龙江等水域的冷水性珍稀鱼类,对其精子冷冻保存技术进行研究并建立精子冷冻库,对于哲罗鲑种质保存、人工繁殖发育、苗种培育及种群恢复都具有重要的意义.本研究利用生理盐水、葡萄糖、胎牛血清(fetal bovine serum,FBS)等配制了9种精子稀释液(MPRS,RS,Hanks,ELS,EG1,EG2,Stein,SS-2和D1S),对哲罗鲑精子在稀释液中活力、加入抗冻剂后活力和液氮中冷冻后活力进行检测,发现精子在以上稀释液中均具较高活力(73.00±2.65)％～(96.67±2.08)％,加入二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)后活力下降,冷冻后仅在ELS和D15中具有极低活力(1.21±0.00)％和(1.1±0.00)％.进而利用ELS对甲醇、二甲基亚砜浓度进行筛选,发现精子在4％～12％甲醇中平衡20 min后活力仍为(79.00±6.52)％～(88.80±7.89)％,冷冻后仅在6％甲醇中具有相对较高活力(18.33± 10.61)％,但与鲜精活力相比显著下降(P＜0.05).精子在4％～12％ DMSO中平衡5 min后精子活力为(43.75± 11.09)％～(81.67±2.89)％,平衡20 min后精子活力极大下降(3.25±0.30)％～(45.00±5.77)％,冷冻后精子活力极低(1.00±0.00)％～(2.75±1.50)％(P＜0.05).以D15为基础液对葡萄糖浓度进行筛选,发现当葡萄糖浓度为30％(D30)时,冷冻后精子活力相对较高(17.80±2.59)％,但与鲜精相比活力显著下降(P＜0.05).另外对精子在D15、D30、Stein和ELs4种稀释液中短期保存的效果进行比较表明,Stein中精子存活在时间最长(45 h),D30次之(15h).综上所述,分别在ELS和D30中加入6％甲醇冷冻保存哲罗鲑精子具有一定活力,本研究结果为哲罗鲑精子大量冷冻保存和精子库建立等方面研究奠定了基础.  相似文献   

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李胜忠  程先友  董亚菲  周桂珍  张娟利  张玉娇 《贵州农业科学》2016,44(5):93-96

为江鳕精子活力及人工繁殖受精率的提高提供参考,应用扫描电镜和透射电镜观察了江鳕精子的外部形态和超微结构.结果表明:江鳕精子由头部、颈部和尾部3部分构成,没有植入窝.头部呈椭球形,长(1.6±0.3)μm;颈部前宽后窄,长(0.6士0.2)μm;尾部细长,长(16.1±4.3)μm.江鳕精子头部有背腹之分,背部有少量细胞质;腹部主要是细胞核,其中染色质的电子密度呈均匀、致密分布,没有网络状间隙,细胞核前端无顶体.江鳕精子颈部由中心粒复合体和袖套构成.中心粒复合体分为近端中心粒和远端中心粒(基体),近端中心粒由9组三联微管组成,没有中央微管,近端中心粒的长轴与细胞核的长轴呈垂直关系.江鳕精子尾部的核心结构是轴丝,由9组外周二联微管和1对中央微管组成,是典型的“9+2”微管结构,尾部外表面有由质膜向两侧突出而成的侧鳍,左右侧鳍大小不同.  相似文献   

甘露醇和甘油对白斑狗鱼精子活力的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

李胜忠  张健  成沛  王位莹  代铨 《水产养殖》2013,34(1):18-20

为了提高白斑狗鱼精子的受精能力,采用载玻片悬滴法探讨了甘油和甘露醇对白斑狗鱼精子活力的影响。结果表明,白斑狗鱼精子在甘油和甘露醇溶液中活动的最适渗透压在411~616kPa。在411~616kPa甘油溶液中白斑狗鱼精子的快速运动时间最高为85.01±5.09s,寿命时间最高为116.12±7.39s。在411~616kPa甘露醇溶液中白斑狗鱼精子的快速运动时间最高为75.59±3.67s,寿命时间最高为120.33±17.27s。在甘油和甘露醇溶液中,白斑狗鱼精子FT和LT的变化规律基本一致。  相似文献   

柴窝堡湖池沼公鱼引种试验     

李胜忠  田水胜  王国英 《新疆农业大学学报》1995,(1)

本文研究了柴窝堡湖引进池沼公鱼后的生长、食性和繁殖．研究结果表明：池沼公鱼非常适合柴窝堡湖的特殊水体环境，并给该湖带来了较好的经济效益．  相似文献   

Na+、K+对高白鲑精子活力影响的初步研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

谷巍  李胜忠  蔡林钢  张人铭  马燕武  郭焱 《水利渔业》2005,25(2):8-10

研究了赛里木湖高白鲑精子在盐度为0-0.8%的NaCl和KCl的溶液中的活动情况。结果显示，高白鲑精子在0.5%-0.6%的NaCl溶液中表现出最好的活力；0.1%的K^ 对精子已有明显的抑制作用，并且抑制效应随K^ 含量的升高而增强。  相似文献   

七带石斑鱼肌肉营养成分分析与品质评价   总被引：12，自引：0，他引：12       下载免费PDF全文

程波  陈超  王印庚  李胜忠  于宏  张家松  杨志  于文松  曲江波 《渔业科学进展》2009,30(5):51-57

对饲养的七带石斑鱼Epinephelus septem fasciatus Thunberg的含肉率、营养成分及鱼肉品质进行了研究,采用常规肌肉营养测定方法分析了4尾成鱼的肌肉营养成分。结果表明,七带石斑鱼的含肉率为76.73%,肌肉（鲜样）中粗蛋白含量为19.60%,粗脂肪为2.70%,氨基酸总含量为18.33%,其中7种必需氨基酸的总含量为7.59%,占氨基酸总含量的41.4%,其必需氨基酸的构成比例符合联合国粮农组织/世界卫生组织（FAO/WHO）的标准模式。必需氨基酸指数（EAAI）为82.38,5种鲜味氨基酸的总含量为8.22%。多不饱和脂肪酸含量为32.45%,其中EPA与DHA的平均含量分别为6.11%和12.78%。七带石斑鱼肌肉矿物元素种类丰富,矿物质中钾含量（4561.02mg/kg）最高,在微量元素中锌含量（4.20mg/kg）最高。  相似文献   

长期超低温冷冻保存对鞍带石斑鱼精子超微结构及酶活性的影响          下载免费PDF全文

丁小雨  李振通  段鹏飞  邱弈树  王心怡  黎琳琳  王林娜  刘阳  李文升  王清滨  赵侠  田永胜  李胜忠 《水产学报》2023,47(7):079605-1-079605-17

【目的】本文旨在探究长期超低温冷冻保存中鞍带石斑鱼精子质膜、活力、超微结构及酶活性的变化，为阐明影响鞍带石斑鱼精子冷冻保存质量的相关机制提供理论依据。【方法】采集2022年鞍带石斑鱼鲜精及储存时间分别为23、49、61个月冷冻保存精液，用伊红-苯胺黑染色方法检测精子质膜完整性；用计算机辅助精子分析仪（CASA）检测精子运动参数；测量精浆和精子中琥珀酸脱氢酶（SDH）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽还原酶（GR）、总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）和肌酸激酶（CK）共六种酶活性的变化及三磷酸腺苷（ATP）浓度变化；用扫描电镜和透射电镜观察鲜精和冻精超微结构。【结果】伊红-苯胺黑染色检测结果发现，鲜精质膜完整性最高为83.43±2.73 %，经过超低温冷冻后，精子质膜完整性显著降低（P<0.05），且随着冷冻保存时间的延长而逐渐降低。CASA结果显示鲜精活力最高为90.47±3.34 %，经过超低温冷冻后精子活力显著降低（P<0.05），但长期保存23-61个月精子活力无显著性差异，精子活力保持在63.95±3.66 %-68.58±2.73 %，具有稳定的活力，且鲜精与冻精之间精子平均直线运动速度（VSL）、平均曲线运动速度（VCL）和平均路径速度（VAP）均没有显著差异（P>0.05）。精子超微结构显示，鲜精形态结构正常、线粒体排列结构规则、形态大小正常。经过超低温冷冻保存后，精子形态结构损伤明显，表现为精子头部质膜破损、细胞质外漏、细胞核膜破损、尾部鞭毛断裂或脱落等损伤；鞍带石斑鱼精浆和精子超低温冷冻前后六种酶活性的变化及ATP含量结果显示，经过超低温冷冻后，精子内SOD、GSH-PX和CAT三种酶及ATP含量均有显著性降低（P<0.05）。精浆中酶活力升高，除GR和CAT外，其余酶活性均差异显著（P<0.05）。【结论】长期超低温冷冻对鞍带石斑鱼精浆和精子酶活性、精子活力及精子超微结构均具有较显著影响，【意义】研究结果为鱼类精子冷冻损伤机理研究积累了丰富的数据，为鱼类精子长期冷冻保存提供了技术参考和评价指标。  相似文献