基于PEDV ORF3基因的强弱毒株鉴别方法的建立及初步应用     

阚蕊慈  张斌  任玉鹏  岳华 《动物医学进展》2019,40(5):1-6

为了建立一种快速鉴别PEDV强毒株和弱毒株的RT-PCR方法,针对PEDV ORF3基因设计一对引物,优化其反应体系和退火温度,并测试其特异性和敏感性。结果显示,在退火温度55.2℃,上、下游引物各0.5μL时PCR扩增效果最理想。特异性试验结果显示本方法对9种常见猪病病原的核酸模板均不产生扩增条带;敏感性试验显示该方法的检测下限为T-ORF3_IS 272拷贝/μL和T-ORF3_VC 14.4拷贝/μL。将本试验建立的RT-PCR法与已建立的双重RT-PCR方法进行比较,结果显示两种方法符合率为99.2%,且本法的实际检出率更高。对120份临床样本检测结果显示,PEDV强弱毒株的阳性率分别为87.18%和84.21%,其中9份样本中同时检出2种PEDV毒株,但并未对检测方法的准确性造成影响。建立了一种基于ORF3基因的RT-PCR检测法,该方法特异性强、灵敏度高,可准确区分PEDV野毒株和弱毒株。  相似文献   

一起猪非典型瘟病毒感染的诊断     

周可磊  陈新诺  岳华  张斌 《动物医学进展》2019,(6):135-139

2017年8月四川省某规模化猪场出现临产母猪产弱子、发抖、死胎,且死胎率达30%,哺乳仔猪成活率明显降低,其中以全身性或局部性阵发痉挛为典型症状。用RT-PCR扩增及序列分析确诊该猪场感染了一种新型的猪非典型瘟病毒(APPV)。这是四川省首次检测到并报道APPV,可为该病的研究和防控提供了一定的参考。  相似文献   

四川部分猪场PEDV、TGEV、GARV和PKV感染状况调查   总被引：1，自引：0，他引：1  

曹恭貌  张斌  岳华  费磊  任玉鹏 《动物医学进展》2016,(1):118-122

为了解四川省部分猪场4种猪腹泻病毒的感染情况,为本地区猪腹泻的诊断和治疗提供依据,采用RT-PCR方法,分别对来自四川省成都、绵阳、德阳、眉山、资阳、雅安、内江、宜宾、达州等地9个规模化猪场的90份临床健康猪和130份腹泻猪的粪便样品,进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪嵴病毒(PKV)和猪A群轮状病毒(GARV)的检测。结果表明,在所有9个猪群中PEDV和PKV检出率达100%(9/9),且在部分猪群腹泻样本中的检出率可达到60%以上,表明此2种病原在检测猪场感染比较普遍。此外腹泻样本中TGEV和GARV阳性率分别为11.54%(15/130)、7.69%(10/130),表明该2种病原在本地区猪场仍有感染情况存在。对PKV的检测结果表明腹泻猪粪便中PKV的阳性率为43.85%(57/130),显著高于外表健康猪粪便样本23.33%(21/90),且PEDV和PKV的混合感染在4种病原混合感染类型中所占比例最大,推断PKV与猪只腹泻具相关性,PEDV和PKV具有协同致病的可能。  相似文献   

鸡冷诱导RNA结合蛋白基因序列分析及组织表达     

叶青华  吴巧  岳华  储倩 《动物医学进展》2016,(12):28-33

为研究鸡冷诱导RNA结合蛋白(CIRP)基因的结构特征和组织定量分布情况,根据GenBank中原鸡CIRP基因(NM-001031347)的编码区序列自行设计引物,从健康雏鸡脾脏中扩增青脚麻羽鸡CIRP基因的编码区(CDS)并进行生物信息学分析;设计引物建立实时荧光定量RT-PCR,检测CIRP mRNA在雏鸡各组织器官中的分布及相对表达水平。结果显示,鸡CIRP基因CDS区全长573bp,编码190个氨基酸,其氨基端包含一个RNA结合域,羧基端富含RGG重复序列,推导的多肽链羧基端比鸭、斑胸草雀及哺乳动物要多18个氨基酸;CIRP基因在鸡各被检组织器官中均有表达,相对表达水平由低到高分别为法氏囊、肺脏、胰腺、胸腺、脾脏、睾丸、盲肠扁桃体、心脏、脑、肾脏、哈德氏腺、肝脏。本研究为进一步探讨鸡CIRP基因的遗传进化及其在病原感染中的作用提供了参考。  相似文献   

牛支原体的分离鉴定及药敏试验分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

马艳君  阿比克哈莫  汤承  岳华 《四川畜牧兽医》2018,(3)

本试验的目的是对四川某肉牛养殖场的疑似病例进行牛支原体的分离鉴定。采集24头病牛的鼻腔棉拭子,用特异性检测牛支原体的PCR方法进行检测,并对阳性样本进行药敏试验。结果显示:从24份临床样本中检测出23份牛支原体阳性样本,且成功分离到10株牛支原体;药敏试验显示分离的牛支原体对泰乐菌素、氧氟沙星、土霉素、庆大霉素、头孢喹诺、氟苯尼考敏感,对恩诺沙星和头孢噻呋有耐药。可见牛支原体感染是该牛场发病的重要原因,筛选出的敏感药物可用于治疗发病牛。  相似文献   

牛冠状病毒RT-PCR检测方法的建立及应用     

何琪富  郭紫晶  李然  周军  岳华  张斌  汤承 《畜牧兽医学报》2018,(10)

本试验的目的是建立更加灵敏的检测牛冠状病毒(BCoV)的RT-PCR方法,并对川西北草原牦牛病料进行BCoV病原检测。选择BCoV聚合酶基因Nsp7-Nsp9片段设计引物,通过反应条件和体系优化,建立检测BCoV的RT-PCR方法并应用于临床样本检测。结果显示:所建方法特异性和重复性好,灵敏性达到1×10-2pg·μL-1;该方法对肉牛和牦牛BCoV都有良好的检测效果,优于比较的两种以BCoV N基因为靶点的RT-PCR方法;对2016年采集的川西北草原牦牛病料进行了BCoV的检测,结果显示:125份腹泻牦牛粪便样本中BCoV的检出率为71.20%,98份患呼吸道疾病的牦牛鼻腔棉拭子中BCoV的检出率为72.45%。此次建立的BCoV RT-PCR检测方法特异性和重复性好、灵敏度高;BCoV是当前川西北草原牦牛腹泻和呼吸道疾病综合征的重要病原。  相似文献   

犊牦牛腹泻诊断     

罗雪  李然  阿比克哈莫  汤承  岳华 《四川畜牧兽医》2018,(9)

正腹泻是犊牛的常发疾病,其既可由细菌、病毒、寄生虫等引起,也可由营养因素、环境因素引发,一般病原微生物感染是引发犊牛腹泻的主要原因。腹泻严重影响犊牛成活率,幸存犊牛的生长发育和生产性能也会受到影响。1临床症状某养殖户的4头犊牦牛发生以急性腹泻为特征的疾病。病牛精神沉郁、被毛粗糙、呼吸短促,水样腹泻,粪便呈灰白色,其中3头牛的粪便混有鲜血。2实验室检测2.1粪便处理及核酸提取采集病牛粪便按  相似文献   

免疫鸡群新城疫强毒感染及其与HI抗体的相关性研究     

汤承  岳华  刘小银  杨泽林  张兆敏  张斌  俞宁 《中国家禽》2009,31(4)

为调查新城疫强毒(vNDV)在免疫鸡群中的感染情况及其与抗ND抗体效价的相关性,用自行建立的检测vNDV的荧光定量RT-PCR(RRT-PCR)对采自川、渝两地36个免疫鸡群的360份肛门棉拭子进行检测,同时采血测定其血凝抑制抗体效价.结果共检出5个vNDV 阳性鸡群,每个阳性鸡群检出1例阳性样本,经病毒分离鉴定证实为NDV;36个受检鸡群HI抗体平均效价在4.5～10.1,标准偏差(SD)在0.70～3.19,变异系数在9.5%～44.3%.当SD大于2.0时,vNDV感染鸡群阳性率为50%,6(5/10),当CV大于32%6时,vNDV感染鸡群阳性率为62.5%(5/8);vNDV感染个体HI抗体效价分别为210、29,28,26,23;阳性样本RT-PCR产物经测序分析证实为vNDV F基因序列,发育进化分析显示,2株vNDV属基因Ⅶ型,3株属基因Ⅸ型.研究结果表明,RRT-PCR适合vNDV感染及传播的监测和分子流行病学调查;免疫鸡群是否感染vNDV可能与个体HI抗体水平高低无关,而与群体HI抗体离散度有关,SD和CV值有助于判定鸡群感染vNDV的风险.  相似文献   

鸡白细胞介素2(IL-2)对鸡免疫功能的影响   总被引：12，自引：2，他引：10  

杨发龙岳华  贾文祥 《中国家禽》2005,27(19):17-20

为研究鸡IL-2对雏鸡免疫功能的影响，进行了3个方面的试验。①对体液免疫及细胞免疫的影响。结果表明，鸡IL-2能明显提高鸡新城疫疫苗免疫后HI水平、T淋巴细胞增殖反应及ANAE^＋细胞百分数；②对雏鸡腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响。结果表明使用IL-2与否对巨噬细胞的吞噬功能没有明显的影响；⑧人工感染法氏囊病的防治试验。在攻毒前后注射IL-2，均可明显降低发病率和死亡率。本研究结果表明，鸡IL-2可明显提高特异性免疫应答能力，与疫苗共同注射可作为佐剂提高疫苗的免疫原性，对法氏囊等病毒性疾病具有一定的防治作用。  相似文献   

犬腺病毒2型E3基因自然缺失毒株的分离鉴定及其致病性     

王佳丽  周宁  陈曦  岳华  汤承 《畜牧兽医学报》2023,(7):2982-2990

犬腺病毒2型(canine adenovirus type 2,CAV-2)是重要的犬呼吸道病原，本试验旨在调查CAV-2在川渝部分地区的流行情况及其分离毒株致病性。采用检测CAV-2的特异性PCR方法，对2021—2022年采集自川渝部分地区的121份患呼吸道疾病的犬鼻咽拭子进行检测，分离流行毒株并研究其基因组特征及致病性。结果显示：CAV-2的阳性率为29.8%,值得注意的是，69.4%的阳性样本在E3基因存在9个核苷酸连续缺失(1 035—1 043 nt),导致4个氨基酸缺失(345—348 aa)。成功分离出1株E3基因自然缺失毒株，噬斑纯化后的细胞半数感染值为10^-9.46TCID₅₀·0.1 mL^-1;该毒株经口鼻感染幼犬后，幼犬出现体温升高、打喷嚏、流鼻涕及咳嗽等典型呼吸道症状。该分离毒株基因组全长31 786 bp,与GenBank中CAV-2基因组的核苷酸相似性为98.8%～98.9%。与已知的CAV-2基因组相比，本研究分离毒株除了E3基因的独特突变外，还在Fiber、Hexon和E1A等蛋白有独特...  相似文献