骆驼斯氏副柔线虫病间接ELISA检测方法的建立     

苏倩  冯陈晨  赵学亮  王金玲  王文龙  呼和巴特尔 《中国畜牧兽医》2019,46(6):1756-1763

为建立骆驼斯氏副柔线虫病间接ELISA （iELISA）诊断方法,本试验对骆驼斯氏副柔线虫半胱氨酸蛋白酶CPR基因进行重组表达,将获取的重组蛋白（rCPR）进行纯化和Western blotting检测,然后以纯化好的重组蛋白为抗原,通过棋盘滴定试验优化了抗原包被浓度、包被条件、抗体稀释度、酶标二抗稀释度、封闭液和封闭时间等,建立了骆驼斯氏副柔线虫病iELISA诊断方法,并对建立的iELISA检测方法进行了重复性、敏感性、特异性试验和临床检测。结果显示,抗原最佳包被浓度为8 μg/孔,血清最佳稀释度为1：50,酶标二抗最佳稀释度为1：5 000,最佳包被条件为4℃包被过夜,最佳封闭条件为3% BSA封闭2 h。临界值为0.235,待检血清D_{450 nm}值>0.235则确定为阳性。重复性试验中变异系数均<10%,重复性较好;用该方法检测阳性血清的敏感性为96.3%;此方法仅与骆驼斯氏副柔线虫病阳性血清发生特异性反应,与感染了其他寄生虫的阳性血清无交叉反应,特异性为100%;对140份临床血清进行检测,阳性率为86.4%。综上可知,本试验成功建立了一种快速有效诊断骆驼斯氏副柔线虫病的iELISA方法。  相似文献   

加强乡镇文化站建设 促进农村文化大发展     

王金玲 《山东饲料》2013,(30):151+185

乡镇文化站是最基层的文化事业单位,是党和政府联系农村,活跃农民群众文化生活的重要阵地和纽带,是传播社会主义先进文化,开展公益性文化活动,提供公共文化服务的重要载体,是弘扬先进文化的前哨阵地,是让先进文化在基层深深扎根并开花结果的重要环节,也是基层人民群众文化娱乐的主要场所。其主要职责就是为社会提供公益性的文化产品和文化服务,肩负着农村群众文化活动的示范和导向重任,为群众提供健康向上的精神食粮。文化站的本职工作,就  相似文献   

山羊RPL27A基因克隆及组织表达特性分析     

郑建莹  王金玲  王永  朱江江  张浩 《中国畜牧兽医》2021,48(11):3918-3928

为研究山羊核糖体蛋白L27A （ribosome protein L27A，RPL27A）基因结构及其相关的生物学功能，试验采集简州大耳羊的14种组织样品（心脏、肝脏、脾脏、背最长肌、皮下脂肪等），利用RT-PCR扩增并克隆获得山羊RPL27A基因序列，通过在线工具进行生物信息学分析；采用实时荧光定量PCR技术检测RPL27A基因在各个组织及不同分化阶段的皮下前体脂肪细胞中的表达水平。结果显示，山羊RPL27A基因CDS区长447 bp，可编码148个氨基酸。生物信息学分析表明，RPL27A基因在不同的物种间具有较高的保守性，RPL27A蛋白是不稳定的亲水碱性蛋白，其与脂代谢及脂肪沉积相关的RPS18、RPL26、RPL34、RPL32、RPL37A等核糖体蛋白存在相互作用，RPL27A蛋白没有跨膜结构域，且无信号肽，亚细胞定位表明其主要存在于细胞质中。实时荧光定量PCR结果显示，RPL27A基因在山羊心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、背最长肌、皮下脂肪等14种组织中均有广泛表达，且在瘤胃中表达水平最高，在臂三头肌和股二头肌中也存在较高的表达水平，均显著高于其他组织（P<0.05）；RPL27A基因在成脂诱导60 h的山羊皮下脂肪细胞中的表达水平显著高于分化前（P<0.05）。本研究成功克隆了山羊RPL27A基因CDS序列，并揭示了RPL27A基因在山羊14种组织中的表达特性，研究结果可为阐明RPL27A基因对山羊脂肪细胞分化的调控机制提供材料。  相似文献   

一起猪弓形虫病自然病例的病理学观察     

王金玲  丁玉林  王凤龙  刘月焕 《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》2012,33(1):1-5

本研究对2头猪弓形虫病自然病例的病理变化进行系统地观察.结果显示病死猪均表现猪弓形虫病特征性病变,如皮肤发绀并有出血斑点,典型的间质性肺炎,伴有肝硬化的坏死性肝炎,出血性-坏死性淋巴结炎、间质性肾炎、坏死性脾炎、出血性溃疡性胃炎和出血性肠炎等.  相似文献   

奶牛副结核自然病例病理学观察     

安志民  王春华  王金玲  任凤兰  孙斌 《黑龙江畜牧兽医》2002,(9):39-39

通过对1例患副结核病奶牛采用临床症状、剖检变化、病理组织学变化、以病原学检查，旨在观察此例患副结核病的奶牛的病理变化怀典型的牛副结核病是否一致。此例患副结核病奶牛的病理变化中出现明显的间质性肺气肿，这一病理变化在牛副结核病的病变中还是首次出现。  相似文献   

猪弓形虫病诊断及临床病理学研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘永宏  刘月焕  王凤龙  王金玲  韩春华  任可  杨龙峰 《中国畜牧兽医》2007,34(8):100-103

对一起猪病进行了流行病学调查和临床病理学研究，同时结合血清学和PCR检测，结果表明，该起猪病是由弓形虫感染引起。临床症状：高热稽留，呼吸困难，体表发紫，先便秘后腹泻，共济失调，最后衰竭而死亡；病理变化特征：肺水肿、间质性肺炎，坏死性脾炎，局灶性坏死性肝炎和淋巴结炎，非化脓性脑炎以及间质性肾炎等。  相似文献   

肠球菌素A与GST的融合表达及抑菌活性检测     

赵爱珍  韩文瑜  王金玲  徐兴然 《动物医学进展》2006,27(6):75-78

将编码成熟肠球菌素A(enterocin A)的基因片段BAE1克隆到pGEX-3X大肠埃希菌表达系统中,经IPTG诱导后能够高效表达融合蛋白GST-enterocin A。可溶性蛋白组分具有类似enterocin A的抗菌活性,但少量的二硫键正确折叠的GST-enterocin A使该组分表现很弱的抗李斯特菌活性,为enterocin A的生产及功能研究奠定了基础。  相似文献   

奶牛子宫内膜炎防治     

杨庆民  王金玲  何健斌  栾长昆 《上海畜牧兽医通讯》2006,(5):47-49

在奶牛养殖业中,子宫内膜炎是较为常见的一种多发病,多集中在产后2周内,一般发病率为20%~35%。它通常是子宫粘膜的粘液性或脓性炎症,由于炎症所产生的有毒物质可致死精子和胚胎而成为奶牛不孕的常见原因之一,我国奶牛子宫内膜炎型不孕症占成年母牛不孕症的17%以上〔1〕。一般来  相似文献   

湿度和温湿组合对玉米螟赤眼蜂的影响   总被引：2，自引：0，他引：2  

张荆  王金玲  刘广纯  阎颖 《昆虫天敌》1983,(3)

玉米螟赤眼蜂Trichogramma ostrimriac Pang et chen)是寄生于玉米螟卵的优势种群,对第二代玉米螟的控制作用明显,自然寄生率常达80％以上。目前,这一重要天敌尚未得到广泛的利用。我们在研究了温度条件对玉米螟赤眼蜂作用的基础上,试图进一步弄清不同湿度及温湿度组合对其影响,为加速其繁殖与利用提供依据。  相似文献   

结核病牛多重耐药非结核性分枝杆菌的分离鉴定     

程广宇  王金玲  刘春法  崔永勇  周洋  周向梅 《黑龙江畜牧兽医》2018,(19)

为了调查分析目前牛群中结核病的实际感染状况,试验采用组织病理学筛查,菌株分离,16S rRNA、hsp65和rpoB三基因分析鉴定,抗结核常用药物的药敏测定等方法对某大型屠宰牛场屠宰牛的结核感染状况进行了研究。结果表明:从1 576头屠宰牛中筛选出11个疑似结核菌感染样本,经培养最终获得8株分枝杆菌分离株,分别命名为G46、F90、F20、FJ、Y28D、Y28P、5S、Y5,其中G46、F90、F20、FJ、Y28D、Y28P为偶发分枝杆菌,5S为鸟结核分枝杆菌,Y5为M.conceptionense并且M.conceptionense首次从牛中分离鉴定;16S rRNA鉴定所有菌株均为结核分枝杆菌属,hsp65和rpoB序列分析比对鉴定G46、F90、F20、FJ、Y28D、Y28P与偶发分枝杆菌的相似性为100%,5S和Y5与鸟结核分枝杆菌和M.conceptionense的相似性为100%;除菌株F20外,其余菌株表现出多重耐药性。说明目前牛群中结核病感染状况不容乐观,需要重视。  相似文献