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分析了ISSR-PCR体系中Mg2+、dNTP和BSA浓度,以及模板DNA、引物和TaqDNA聚合酶用量等6个因素对反应结果的影响,建立了适合于台湾水青冈ISSR-PCR扩增的反应体系:10μL PCR反应液中,含10 ng DNA,1.5 mmol.L-1Mg2+,0.125 mmol.L-14×dNTP,1×TaqDNA聚合酶配套缓冲液(10 mmol.L-1Tris-HCl,pH值9.0,50 mmol.L-1KCl,0.1%Triton X-100),0.6 UTaqDNA聚合酶,2 mg.mL-1BSA和3pmol引物。应用优化的ISSR-PCR体系从100个ISSR引物中筛选出12个稳定性好,重复性高的引物,对22株台湾水青冈个体的DNA进行扩增,结果表明优化的ISSR-PCR体系完全适合于台湾水青冈的ISSR分析。 相似文献
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利用RAPD技术对3个不同盐度梯度下入侵杂草一年蓬的遗传多样性和遗传分化进行了研究。结果表明,12个随机引物在90株个体中共检测到187个可重复位点,其中多态位点158个,总多态位点百分率为84.49%,3个种群平均多态位点百分率为70.77%。采用Shannon信息指数计算的3个种群总的遗传多样性为0.4522,平均为0.4027;采用Nei指数计算的3个种群总的基因多样性为0.3042,平均为0.2746。3个种群的多态位点百分率、Shannon信息指数、Nei指数大小顺序均为P2>P1>P3。AMOVA分子变异显示,88.54%变异来源于种群内,11.46%变异来源于种群间。一年蓬高的遗传多样性与低的遗传分化与其生物学特性有关,是其广泛入侵的重要原因。 相似文献
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盐分胁迫是外来入侵植物在入侵沿海生境中较为普遍的胁迫形式。为探究加拿大一枝黄花在盐胁迫下的响应,比较了相同栽培条件下加拿大一枝黄花(Solidago canadensis)在盐胁迫下及无盐胁迫下的生物量、形态指标以及光合生理指标的差异。结果表明:(1)盐胁迫显著降低了加拿大一枝黄花的叶片数量、株高。(2)盐胁迫显著降低了加拿大一枝黄花的地上生物量和地下生物量。(3)盐胁迫显著降低了加拿大一枝黄花的净光合速率、气孔导度和蒸腾速率,对胞间CO2浓度无显著影响。研究结果可为加拿大一枝黄花的管理与防治提供理论参考。 相似文献
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以改进的CTAB-溶菌酶-蛋白酶K裂解法抽提水稻土总微生物DNA,直接进行随机扩增多态DNA(RAPD)分析。采用单因素试验分别测试了Mg2 浓度、4×dNTP浓度、模板DNA用量、引物用量、TaqDNA聚合酶用量及牛血清白蛋白(BSA)浓度对水稻土总微生物RAPD扩增的影响,确定了最适的RAPD反应体系为:10μlPCR反应体积,含1×Taq酶缓冲液(10 mmol Tris-HC l pH值9.0,50 mmol KC l,0.1%Triton X-100),0.8mmol/L 4×dNTP,5.0 mmol/L MgC l2,0.75 UTaqDNA聚合酶,3 mg/m l BSA,5 ng模板DNA,5 pmol引物。 相似文献
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采用改进的SDS法提取薏苡种子胚基因组DNA,测试薏苡ISSR扩增的最适退火温度,并采用单因素试验,测试Mg2 、dNTP、BSA、引物浓度及模板DNA、TaqDNA聚合酶用量等6个因素对ISSR-PCR扩增结果的影响。结果显示,10μl PCR反应体积中包括:1×Taq酶配套缓冲液(10 mmol/L Tris-HCl pH值9.0,50 mmol/LKCl,0.1%Triton X-100),1.75 mmol/L Mg2 ,0.6 mmol/L dNTP,1 mg/ml BSA,10 ng模板DNA,20 pmol引物,0.45 UTaq酶。 相似文献
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采用改进的SDS法提取牛膝(Achyranthes bidentata)基因组DNA,利用单因素试验对ISSR反应体系中的Mg2+浓度、dNTP浓度、模板DNA用量、Taq DNA聚合酶用量、BSA浓度、引物用量进行筛选和优化,得出了适用于牛膝ISSR分析的扩增条件:10 μL PCR反应体积,1×Taq酶配套缓冲液(200 mmol/L Tris·HC1,pH值8.8,100 mmol/LKCl,1% TritonX - 100,100 mmol/L( NH4) 2SO4,15 mmol/L MgCl2),1.5 UTaq DNA聚合酶,2 mg/mL BSA,15 ng模板DNA,10 pmol引物,0.5 mmol/L dNTP,2.0 mmol/L Mg2.利用优化反应体系从100个ISSR引物中筛选出12个重复性好、稳定性高的引物对24个牛膝个体的DNA进行扩增,共得到85个位点,其中74个为多态位点,多态位点百分率为87.06%,Nei指数为0.330 3,Shannon信息指数为0.490 5,表明牛膝的遗传多样性处于较高水平. 相似文献
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对浙江省天台县华项山青钱柳不同营养器官的鞣质、生物碱、总黄酮、游离蒽醌、绿原酸和皂甙等6种次生代谢产物的含量进行了测定和分析.结果表明,青钱柳各个营养器官中均含有这6种次生代谢产物,从总量来看,其高低顺序依次为:叶片>幼根>树皮>幼枝>老根>老枝>茎,且叶与幼根总含量较接近,其它器官含量较低;同一成分在青钱柳不同的营养器官中含量差别较大,鞣质、游离蒽醌的含量以幼根最高,生物碱、总黄酮、绿原酸、皂甙的含量是叶片最高,说明次生代谢产物主要由叶、幼根等代谢活动旺盛的器官合成;不同营养器官中6种次生代谢产物之间有一定的相关性. 相似文献
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采用培养皿滤纸法研究空心莲子草根、根状茎、茎和叶水浸提液对高丹草种子萌发和幼苗生长的影响,并采用气相色谱-质谱联用技术对空心莲子草根、茎和叶水浸提液的化学成分进行了分析.结果表明:高丹草种子的萌发速率和萌发率均随浸提液体积质量分数的升高而降低;其幼苗的苗高和主根长在茎浸提液中表现出"低促高抑"效应,而在其他3种浸提液中为"低体积质量分数无影响,高体积质量分数抑制";从化感综合效应来看,茎水浸提液体积质量分数低于30mg/mL、根和根状茎体积质量分数低于2mg/mL时,对高丹草种子萌发和幼苗生长具有促进作用,否则为抑制效应.空心莲子草的化感成分中可能含有苯甲酸、邻羟基苯甲酸、邻苯二甲酸二甲酯、邻苯二甲酸二丁酯、邻苯二甲酸-丁基-异丁酯和邻苯二甲酸二异丁酯等. 相似文献
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分别以甲醇、丙酮、水为提取剂,提取山胡椒叶片的次生代谢产物,并测定3种不同提取液的次生代谢产物含量及体外抑菌效果,评价山胡椒的药用价值,为山胡椒的进一步开发利用提供理论依据。实验结果表明,不同提取液中次生代谢产物含量均是黄酮>鞣质>游离蒽醌>皂甙>生物碱;3种提取液的次生代谢产物含量及抑菌活性存在较大差异,不同提取液对枯草芽孢杆菌的抑菌活性要高于大肠杆菌、水可作为山胡椒叶片次生代谢产物的良好提取剂。通径分析表明,影响不同提取液对枯草芽孢杆菌的抑菌活性的次生代谢产物主要是总黄酮和总皂甙,影响提取液对大肠杆菌抑菌活性的次生代谢产物主要是总皂甙。 相似文献
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青花菜品种的ISSR分析 总被引:2,自引:0,他引:2
利用ISSR分子标记技术对7个已知特性的青花菜栽培品种进行分析,结果显示青花菜具有中等偏低的遗传多样性。根据遗传距离进行聚类分析,结果显示7个青花菜品种可被分为三大类:第一类为早中熟品种,第二类为中晚熟品种,而耐热性的早熟品种绿冠则单独成一类。青花菜的聚类分析结果主要与其抗性和生育特性密切相关。在此基础上,对11种未知特性的青花菜品种进行了ISSR分析,可将其分为6类。 相似文献