土霉素在黄颡鱼肌肉组织中残留消除规律的研究   总被引：1，自引：1，他引：0  

袁娟李汝琴  彭小云刘红陈孝煊  吴志新 《中国农学通报》2013,29(23):27-31

为研究土霉素在黄颡鱼肌肉组织中残留消除规律。在水温25℃条件下,以每天100 mg/kg 的剂量,连续5天口灌土霉素后定时取样,采用高效液相色谱法检测。结果显示：黄颡鱼肌肉组织中土霉素的平均回收率为80.2%,方法检出限为0.05 μg/g。研究结果表明：土霉素在黄颡鱼肌肉组织中消除缓慢,其含量降到0.1 μg/g的休药期为46天。  相似文献   

斑点叉尾(鲴)疱疹病毒PCR-ELISA检测方法的建立     

杜玉东  陈孝煊  吴志新  王敏  刘迁  夏君  王树云  李莉娟 《华中农业大学学报》2009,28(5)

针对斑点叉尾鲴疱疹病毒(CAV)的ORF6基因设计引物和探针,PCR产物在扩增过程中标记地高辛,探针5'端用生物素标记,建立了CCV的敏感、快速、环保的PCR-ELISA检测方法.对反应条件进行了优化,并评估了该方法的特异性和敏感性.结果表明:该方法可特异性检测CCV DNA,与各对照均无交叉反应,具有高度特异性;该方法对CCV DNA的检测阈值为5 fg,敏感性是常规PCR检测方法的10倍.用此方法对人工感染样品进行检测,能够检测到感染组织中的CCV DNA.该方法能够定性和半定量检测CCV DNA,可用于斑点叉尾(鲴)疱疹病毒的检测、斑点叉尾(鲒)暴发性流行病的诊断.  相似文献   

传染性造血器官坏死病毒糖蛋白抗血清的制备及应用   总被引：2，自引：0，他引：2       下载免费PDF全文

朱旭  兰文升  刘荭  高隆英  杜鹃  陈孝煊 《渔业科学进展》2012,33(6):112-117

应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)从传染性造血器官坏死病毒(Infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV)感染的细胞悬液克隆病毒的糖蛋白基因,将其亚克隆至原核表达载体pCWori,转化到大肠杆菌DH 5α,通过发酵大肠杆菌制备病毒糖蛋白.经SDS-PAGE分析,诱导表达的重组蛋白主要以包涵体的形式存在,使用Ni-NTA亲和层析柱在变性条件下进行纯化并透析复性,最终得到了较高纯度的可溶性糖蛋白,分子量约为57 kDa.Western-blot分析结果显示,所表达的蛋白能够被IHNV病毒制备的兔抗IHNV血清识别.用复性后的蛋白免疫小鼠制备抗血清,ELISA显示抗体效价可达1∶64 000.经制备的抗血清可以作为一抗建立ELISA检测方法,用于检测细胞悬液的病毒粒子,将抗血清稀释到1∶16 000仍能与IHNV全病毒发生反应.本研究利用重组的IHNV糖蛋白成功制备了高效价的抗血清,并能够与IHNV全病毒发生特异性结合,为IHNV免疫学检测方法建立奠定了基础.  相似文献   

高效液相色谱法检测克氏原螯虾组织中氟苯尼考及氟苯尼考胺   总被引：1，自引：0，他引：1  

岳刚毅  吴志新  于艳梅  杨倩  曲艺  谢玲玲  陈孝煊 《淡水渔业》2010,40(2)

建立了克氏原螯虾(Procambarus clarkii)血淋巴、肌肉、肝胰脏中氟苯尼考及氟苯尼考胺的高效液相色谱检测方法。采用Agilent Eclipse XDB-C18(250mm×4.6 mmi.d,5μm)反相色谱柱,以A液(乙腈):B液(0.04 mol/L NaH2PO4、0.004 mol/L十二烷基硫酸钠和0.10%三乙胺)(体积比为30∶70)为流动相,225 nm紫外检测波长完成分析。结果显示:本方法在0.025~20 mg/L范围内浓度与峰面积呈良好的线性关系;组织的加标回收率为78.8%~94.2%,相对标准偏差小于8.16%,氟苯尼考在血淋巴、肌肉、肝胰脏的检出限分别为0.01 mg/L、0.02 mg/kg、0.03 mg/kg,氟苯尼考胺则为0.015 mg/L、0.03 mg/kg、0.05 mg/kg。  相似文献   

三聚氰胺在斑点叉尾鮰体内的残留及代谢规律研究     

邓薇  刘永涛  艾晓辉  陈孝煊  马兵  穆迎春 《淡水渔业》2010,40(6)

(21±1)℃水温条件下,研究了三聚氰胺在斑点叉尾鮰(Ictalurus punctatus)体内的残留消除规律。结果显示:血浆中药时数据符合有吸收一室开放模型,动力学方程为:C=3.952660(e-0.027279t-e-0.127279t),吸收半衰期(T1/2kα)为5.4469 h,消除半衰期(T1/2ke)为25.4093 h,达峰时间(Tp)为15.4045 h,达峰浓度(Cmax)为20.3985 mg/L,表观分布容积(Vd)为2.5763(mg/kg)/(mg/L)。肌肉、肝、肾中吸收半衰期(T1/2kα)分别为3.5582、4.1884、5.4397 h,消除半衰期(T1/2ke)为50.8081、23.3504、23.7242 h,达峰时间(Tp)为14.6766、12.6524、14.9967 h,达峰浓度(Cmax)为7.6449、22.9249、40.6047 mg/L,表观分布容积(Vd)为8.5657、2.3970、1.2712(mg/kg)/(mg/L)。结果表明:药物在体内吸收迅速,药物浓度较高,分布广泛,消除较为缓慢。以80 mg/kg剂量混饲口灌3 d后,各组织中三聚氰胺含量总体呈现肾脏>肝脏>肌肉。停止灌药后第5天肌肉中及第7天肝脏和肾脏组织中三聚氰胺含量低于我国(2008)卫生部公布的乳制品及含乳食品中三聚氰胺临时管理限量值和欧盟对中国进口产品设定了三聚氰胺的最大残留限2.5 mg/kg。  相似文献   

锦鲤疱疹病毒ORF134基因的克隆与表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨毅  李莉娟  陈孝煊  袁军法 《华中农业大学学报》2013,32(4):100-105

以感染锦鲤疱疹病毒的患病鱼为材料,通过RT-PCR克隆ORF134的编码序列,在细胞水平分析其表达模式,并在原核表达系统中表达,获得可溶性的ORF134重组蛋白。结果表明ORF134在锦鲤疱疹病毒裂解感染中转录,证实ORF134为非结构功能基因。ORF134全长为624 bp,含有1个内含子,编码179个氨基酸,序列分析显示ORF134同已报道的高等脊椎动物病毒编码的vIL-10具有较低的序列同源性,但具有较高的结构相似性。体外表达分析显示ORF134呈分泌性表达,但不能形成寡聚体,与其他病毒编码的vIL-10具有差异。进一步通过原核表达获得可溶性的ORF134重组蛋白。  相似文献   

澳大利亚红螯螯虾耗氧率和窒息点的研究   总被引：17，自引：0，他引：17  

陈孝煊  吴志新 《华中农业大学学报》1996,15(3):270-274

测定了不同规格红螯螯虾在１７℃和２６℃条件下的耗氧率以及１７℃、２０℃、２２℃、２４℃、２６℃的窒息点。结果表明：在相同温度条件下，单位体重的耗氧率和窒息点随体重增加而下降；在大小相近的个体中，单位体重的耗氧率和窒息点随温度的升高而增加。１７℃时，体重０．１１～２．３４ｇ的个体，耗氧率０．０９０～０．１９８ｍｇ／（ｇ·ｈ）；２６℃时，体重０．０３０～４８．９００ｇ的个体，耗氧率０．０８１～０．８８３ｍｇ／（ｇ·ｈ）；体重０．０３１～２．３４０８的红螯螯虾窒息点的范围在０．１５２～０．６６３ｍｇ／Ｌ之间。同时，红螯螯虾夜间的耗氧率高于白天。  相似文献   

云芝多糖对银鲫非特异性免疫功能的影响   总被引：3，自引：0，他引：3  

庞素风  吴志新  王艳  祝东梅  冯雪  陈孝煊 《淡水渔业》2008,38(2):17-22

将云芝多糖(Coriolus versciclor polysaccharides,CVP)按不同的剂量(0、0.25、0.5、1.0、2.0和4.0 g/kg)添加到银鲫(Carassius auratus gibelio)的基础饲料中,连续投喂56 d,并在试验的第0、7、14、21、28、35、42和56天取样检测CVP对供试鱼血液的白细胞吞噬活性、血清溶菌酶活力、血清超氧化物歧化酶(SOD)活性和补体C3、C4的含量共5种指标的影响。结果显示,饲料中添加0.25 g/kg的云芝多糖,对银鲫的白细胞吞噬活性、血清溶菌酶活力、血清SOD活性和补体C3、C4含量的影响不显著(P>0.05);添加0.5 g/kg、1.0 g/kg的云芝多糖,对5种指标有一定程度的促进作用,并当添加量为1.0 g/kg时,在14~21d时效果最显著(P<0.05);而添加2.0 g/kg和4.0 g/kg的云芝多糖,5种指标在试验的后期显著低于对照组(P<0.05)。结果表明,在银鲫饲料中添加0.5~1.0 g/kg的云芝多糖对银鲫的非特异性免疫功能有增强作用。  相似文献   

饲料中添加硫酸锌对奥尼罗非鱼幼鱼生长和机体抗氧化功能的影响   总被引：6，自引：0，他引：6       下载免费PDF全文

WU Hong-yan  陈孝煊  YANG Hui-jun  刘永坚  TIAN Li-xia 《水产学报》2008,32(4)

试验以硫酸锌为锌源,评价不同锌水平对奥尼罗非鱼幼鱼(Oreochrvmis aureus ♂×Oreochromis niloticus♂)生长和抗氧化能力的影响.体质量为(4.13±0.32)g罗非鱼随机分配在18个水族箱中,每箱20尾,每3个箱为1个处理组,分别以添加锌为0、20、40、80、160和320 mg·kg-1的6种饲料投喂,日投喂率为鱼体重5%～9%.8周的试验结果表明:20 mg·kg-1锌饲料组的增重率和鱼体蛋白含量显著高于其它各组(P<0.05),蛋白质效率、饲料转化率也明显高于其它各组;全鱼脂肪含量随着饲料锌水平的升高而升高,但320 mg·kg-1锌饲料组降低;20 mg·kg-1锌饲料组,脊椎骨中锌离子浓度达到最大值且显著高于0 mg·kg-1锌饲料组(P<0.05);20 mg·kg-1与40 mg·kg-1锌饲料组的血液中红细胞数量显著高于其它各添加组(P<0.05),20 mg·kg-1锌饲料组的血液中血比容显著高于0 mg·kg-1组(P<0.05),与其它各组没有显著差异;肌肉中,硫代巴比妥酸反应产物(TBARS)(Thiobarbituricacid-reactivesubstances)的量,锌为0mg·kg-1饲料组显著高于其它各组(P<0.05).综上所述,饲料中锌添加量为20 mg·kg-1饲料促进了罗非鱼生长,使鱼体抗氧化功能增强.  相似文献   

黄颡鱼朗格汉斯细胞的鉴定及其功能基因的表达分析     

王辉  李思思  吴志新  许荔立  田丁  陈孝煊 《华中农业大学学报》2020,39(6):173-179

为研究黄颡鱼朗格汉斯细胞的结构特点以及细菌感染对其功能相关基因表达的影响，采用免疫组化技术对黄颡鱼免疫器官中朗格汉斯细胞进行鉴定，通过透射电镜进一步观察到黄颡鱼朗格汉斯细胞的超微结构，并采用荧光定量PCR检测鲶爱德华氏菌感染后黄颡鱼免疫相关组织内朗格汉斯细胞功能相关基因IL-1β、TNF-α、IL-10和TLR-4的表达情况。结果显示，黄颡鱼头肾和脾脏中具有朗格汉斯细胞的特异性分子标记CD207蛋白，且黄颡鱼朗格汉斯细胞的结构与其他脊椎动物类似，即细胞质中大量的伯贝克颗粒围绕着中心粒呈放射状排列。在鲶爱德华氏菌感染后，朗格汉斯细胞功能相关基因IL-1β、TNF-α、IL-10和TLR-4在黄颡鱼免疫器官内的表达量显著上调。上述结果表明，黄颡鱼含有朗格汉斯细胞，并且其可能参与了机体抗鲶爱德华氏菌感染的免疫反应。  相似文献