李属坏死环斑病毒(PNRSV)新疆巴旦木分离物外壳蛋白基因(CP)片断的克隆与序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

殷智婷  韩剑  周国辉  张祥林  罗明  潘亚南 《果树学报》2012,(5):740-746

【目的】为了查明新疆巴旦木果树病原病毒的种类,为病毒的分子检测提供基础。【方法】采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(DAS-ELISA),从巴旦木果树叶片中检测到李属坏死环斑病毒(PNRSV)。以阳性样品的总RNA为模板进行PNRSV外壳蛋白基因(CP)RT-PCR扩增,对预期430 bp大小的4个扩增产物进行克隆、测序和序列分析。【结果】结果表明,PNRSV新疆巴旦木分离物CP基因的核苷酸和氨基酸序列与世界各地已报道的分离物具有较高的同源性,分别为80.0%～97.2%和80.1%～94.1%,其中与阿根廷分离物AY217的同源性最高;而与同属03亚组的苹果花叶病毒(ApMV)同源性较低,仅为52.9%～55.4%和45.6%～48.6%。新疆PNRSV各分离物之间CP基因高度同源。序列比对与系统发生树的分析显示,PNRSV新疆巴旦木分离物的株系属于GroupⅠ组。【结论】确定了PNRSV为侵染新疆巴旦木果树的病原病毒。这是PNRSV在新疆发现的首次报道。  相似文献   

口蹄疫病毒2C3AB基因的原核表达及ELISA方法的建立     

王幸  周国辉  刘云  于力 《中国预防兽医学报》2012,34(7):543-547

口蹄疫病毒(FMDV)的2C蛋白中存在对自然感染和灭活疫苗免疫动物具有鉴别诊断意义的抗原表位。为建立一种敏感的血清学鉴别诊断方法,本研究截取FMDV 2C蛋白的C端B细胞表位较为富集的区域与全长3AB基因组合,经原核表达获得分子量约为44 ku的目的蛋白。Western blot分析表明,表达产物2C3AB与FMDV感染动物的阳性血清呈特异性反应。以纯化的目的蛋白作为包被抗原建立间接ELISA方法,敏感性检测表明该方法比3ABC-ELISA具有更高的敏感性;同时检测猪圆环病毒、猪繁殖和呼吸障碍综合征病毒、猪瘟病毒标准阳性血清均无交叉反应。批内和批间重复性试验显示,OD450nm值的变异系数小于9%。采用该方法检测不同背景的临床样品,并与3ABC-ELISA及进口试剂盒比较,总符合率分别为98.5%和90%。结果表明,该ELISA检测方法具有更高的敏感性和良好的特异性、重复性。  相似文献   

轴流螺旋滚筒式食用向日葵脱粒装置设计与试验   总被引：3，自引：3，他引：0  

连国党  魏鑫鑫  马丽娜  周国辉  宗望远 《农业工程学报》2022,38(17):42-51

针对食葵脱粒过程中籽粒表皮划伤严重及未脱净率高等问题,该研究设计了一种轴流螺旋滚筒式食葵脱粒装置。脱粒元件为外径32 mm的螺旋管,对物料在脱粒空间的运移过程进行运动学与动力学分析,确定脱粒元件螺旋管螺旋升角为63°,螺距为2 800 mm。以葵花3638为对象进行台架试验,通过单因素试验探索喂入量、滚筒转速及脱粒间隙对籽粒未脱净率和破损率的影响,根据单因素试验结果,以喂入量、滚筒转速、脱粒间隙为影响因素,未脱净率和破损率为响应指标,进行二次回归正交旋转组合试验,利用Design-Expert软件建立响应指标与影响因素之间的数学模型,基于响应面法进行参数优化,获得脱粒装置在喂入量1.4 kg/s,滚筒转速300 r/min,脱粒间隙35 mm的参数组合下脱粒效果较好,此时未脱净率为0.55%,破损率1.76%。以优化参数组合进行验证试验,结果表明,未脱净率为0.59%、破损率为1.77%,与模型预测值的相对误差均小于5%。该装置未脱净率与破损率均低于现有向日葵脱粒机,满足向日葵机械化收获标准。该研究为食葵机械化收获装备的研制提供理论参考。  相似文献   

进境水果安全风险分级评价及管理措施研究     

杜智欣  陈展册  陈应超  周国辉  周平  李俊  陈玲娜 《植物检疫》2022,(1)

面向口岸一线进境水果监管工作的实际需求,针对进境水果"事前"主要风险要素开展风险评估。通过建立半定量的评估方法,将口岸截获等反馈数据与专家评判相结合,以二维矩阵确定进境水果检验检疫风险因子评价等级,最终划分进境水果风险等级,提出相应风险分级管理措施。其主要目的在于实现进境水果"事中"查验环节在有效防控风险的前提下重点突出、提升效率,进而压缩通关时长。  相似文献   

双重一步法RT-PCR同时检测兰花上的两种主要病毒   总被引：6，自引：0，他引：6  

周国辉  陈晓琴  李梅辉  周洁浪  唐添华  冯盛祥  郭丽晶  张旺 《农业生物技术学报》2004,12(6):743-744

兰花栽培主要通过分株或组织培养进行无性繁殖，所以兰花病毒病具快速远距离传播和逐代加重的特点。对种苗及贸易商品(盆花及组培瓶苗)进行病毒检测是兰花病毒病防治的根本性措施。在兰花上分离到的病毒超过25种，但危害最重和分布最广的是建兰花叶病毒(Cymbidium mosaic virus,CyMV)和齿兰环斑病毒(Odontoglossum ringspot virus,ORSV)。目前兰花病毒检测通常采用血清学方法，  相似文献   

高质量龙眼DNA快速抽提技术   总被引：1，自引：0，他引：1  

周国辉  李华平  费继锋 《农业生物技术学报》2001,9(4):325

龙眼树(Dimocarpus longana Lam.)组织含有大量的酚类、单宁等,DNA抽提纯化非常困难,常规方法提取的DNA往往严重褐变,杂质含量高,不适于作PCR模板;通过氯化铯密度梯度离心或柱层析作进一步纯化,费用昂贵,操作繁琐,不适用于一般实验室.本实验试用了多种抽提方法,发现SiO2微粒吸附法可快速简便地获取高质量的龙眼DNA.  相似文献   

转基因植物及其应用   总被引：16，自引：0，他引：16  

周国辉  李华平 《热带作物学报》2000,21(3):70-76

综述了目前转基因植物的种类及其应用现状,介绍了有关转基因植物安全性的一些思考,对我国转基因植物的研究现状及其发展方向提出了一些看法。   相似文献   

茶扦插苗刺腐霉病菌在中国的发现及其生理特性   总被引：2，自引：0，他引：2  

赖传雅  周国辉  李复新  赖传碧 《植物保护学报》2000,27(2)

茶扦插苗根腐性苗枯病在广西各地苗圃普遍发生,造成死苗。经鉴定,Pythium spinosum Sawada是该病重要病原菌之一。生理测定表明,该菌生长温度范围7～35℃,最适温度25～30℃,高湿度下生长良好,最适pH7.0～8.2,CA基质有利于繁殖体形成。对光照无特异需求,紫外灯照射生长减缓。这是刺腐霉对茶扦插苗致病性的首次报道。  相似文献   

新疆红花白粉病初步研究     

陈卫民  周国辉  王雪薇 《新疆农业大学学报》1994,(3)

近年新疆红花白粉病发生逐年加重，在伊犁霍城县调查株发病率达１０～２７％。本文对该病的症状、病原、发病规律进行了初步描述。鉴定该病由菊白粉菌为害所致。这是菊白粉菌为害红花在我国的首次报道。  相似文献   

表达小反刍兽疫病毒F基因重组腺病毒的构建及对小鼠的免疫原性     

王芳  周国辉  曹丽艳  李一经  于力 《中国预防兽医学报》2011,33(4)

为构建表达小反刍兽疫病毒(PPRV)F蛋白的重组腺病毒,本实验合成密码子优化的PPRV F基因,将其克隆至腺病毒穿梭载体pShuttle-CMV中,并以Pme I线性化后转化含有人5型腺病毒骨架的BJ5183感受态细胞,通过细菌内同源重组构建表达PPRV F蛋白的重组腺病毒质粒pAdV-F,经Pac I线性化后转染AD-293细胞,获得重组腺病毒rHAdV-F.经PCR和Dot-ELISA鉴定,F蛋白在AD-293细胞中获得表达.该重组腺病毒与野生型腺病毒复制能力相近,但病毒滴度略低.间接ELISA方法检测显示rHAdV-F可以诱导小鼠产生抗PPRV特异性体液免疫应答.  相似文献