牛病毒性腹泻病毒非结构蛋白NS3的研究进展     

侯佩莉  孙涛  何洪彬 《中国畜牧兽医》2012,39(5):68-72

非结构蛋白NS3是致细胞病变型牛病毒性腹泻病毒的分子标记蛋白,它具有多种生物学功能。研究结果表明,NS3在病毒非结构蛋白的加工、成熟、基因组复制与转录过程中以及宿主细胞致细胞病变效应的产生中起重要作用。文章总结了NS3的生物学特性及其相关功能,为阐明NS3的致细胞病变作用机理奠定基础。  相似文献   

绿脓杆菌焦磷酸测序检测方法的建立     

张太翔  孙军  赵晗  李秀勇  孙涛  刘文鹏  田国宁  韩亮 《中国畜牧兽医》2012,39(8):53-56

本试验旨在利用绿脓杆菌的序列信息分析和焦磷酸测序技术,建立一种快速、简单检测绿脓杆菌的方法。从培养的绿脓杆菌中提取DNA,PCR扩增目的基因片段,采用焦磷酸测序技术(pyrosequencing technology,PSQ)针对保守核苷酸区段的测序分析。通过焦磷酸测序后获得的序列信息与已知的目的基因的序列比对,能进一步确证毒株的序列信息为绿脓杆菌。利用焦磷酸测序能快速获取核酸的序列信息,可为毒株及早确证奠定基础。  相似文献   

牛Nramp1基因启动子的克隆及其活性分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

王洪梅  张利博  侯明海  王长法  王玲玲  孙涛  何洪彬  仲跻峰 《中国农业科学》2011,44(5):1022-1028

 【目的】牛Nramp1基因是主要的抗病候选基因,但其转录调控的分子机制尚不清楚。本研究欲确定牛Nramp1基因的启动子区域,找到启动子核心序列和主要的调控区,探索Nramp1基因表达机制。【方法】采用基因克隆、DNA测序、半定量RT-PCR和荧光素酶报告基因系统等技术手段,构建牛Nramp1基因5′侧翼区长片段及固定3′端的不同节段的pEGFP-N1和/或pGL3重组质粒,分别转染293T和RAW264.7细胞,并进行脂多糖(LPS)诱导,对不同片段的启动子活性进行定性和定量测定。【结果】牛Nramp1基因5′侧翼区长片段具有较强的启动子活性,+58—-89区域具有基本的启动子功能,+58—-1 748启动子活性最强。进一步研究表明,-89—-205 bp区域、 -278—-1 495 bp区域存在着正调控元件,在-205—-278 bp区域内存在着负调控元件;另外,LPS能显著增强启动子活性,其诱导牛Nramp1基因的表达具有细胞特异性和剂量依赖性。【结论】成功构建了含推测的牛Nramp1基因启动子片段的重组报告基因载体, 确定了启动子核心区域和主要的调控区域。  相似文献   

C60-肌肽衍生物的制备及其抗氧化性研究     

孙涛  孙斐  巢骏  谢晶  周冬香 《湖南农业科学》2011,(21):71-75

通过控制反应物C60以及肌肽的量,合成了三种水溶性C60-肌肽衍生物.采用红外、紫外、核磁共振、元素分析等手段对其结构进行了表征;同时考察了它们对超氧阴离子自由基、羟基自由基的清除能力、还原能力及金属螯合能力.结果表明:随着反应物中肌肽含量的增多,制得C60-肌肽衍生物的抗氧化能力增强,这可能与-NH基的供电效应有关.  相似文献   

抗旱剂对勐海地区茶叶芽芯数量及产量的影响     

陈学文  江谷驰弘  胡国庆  张绍茹  孙涛 《现代化农业》2018,(2)

正勐海县地处云南省西南部,其中山区面积93.45%,坝区面积仅有6.55%,日温差大,年均降雨量1341mm,多雾,气候条件较好,有利于茶树的自然生长,因此盛产普洱茶。然而近年来,云南省连续遭遇干旱天气,雨水缺乏对于茶叶的生长有一定的影响。抗旱剂是一种新型的复合高效吸水树脂,它具有吸水速度快、保水性强、适应范围广、能够保苗、促根、改良土壤等特点。"碧霖"牌抗旱剂利用纳米  相似文献   

鱼类病毒性出血性败血症病毒诊断胶体金免疫层析方法的建立     

孙涛  高瑞刚  孙明君  王群  雷质文  岳志芹 《中国动物检疫》2017,34(12):92-97

为建立一种快速检测鱼类病毒性出血性败血症病毒(Viral haemorrhagic septicaemia virus,VHSV)的胶体金免疫层析方法(GICA),采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,以标记纯化的VHSV G蛋白单克隆抗体(MAb)10A7为捕捉抗体,将纯化的抗VHSV N蛋白的MAb 10EN单克隆抗体和羊抗鼠IgG抗体包被在硝酸纤维素膜上,作为检测带与质控带,经试验条件优化,组装形成胶体金免疫层析试纸条。用本试验研制的胶体金试纸条检测VHSV感染的CHSE细胞培养物。结果显示:在检测线和质控线均呈现红色条带,而健康的CHSE细胞培养物对照仅在质控线呈现红色条带;试纸条检出病毒培养物的病毒量最低限为10~(4.0) TCID_(50);随机挑取3个不同批次的试纸条,对阳性样品和阴性样品进行重复试验,未发现差异。特异性试验表明,该试纸条与传染性造血器官坏死病毒(IHNV)、传染性胰坏死病毒(IPNV)、鲤春病毒血症病毒(SVCV)、牙鲆弹状病毒(HRV)、草鱼呼肠孤病毒(GCRV)无交叉反应。将同一批次的试纸条在4℃条件下保存不同时间后进行检测,发现保存6个月的试纸条仍具有良好的稳定性。本试验研发的胶体金诊断试纸条具有良好的特异性、灵敏性和重复性,在快速辅助检测方面具有推广应用价值。  相似文献   

传染性造血器官坏死病毒焦磷酸测序检测技术的建立     

尹伟力  刘瑶  倪杨帆  张四化  岳志芹  孙涛 《动物医学进展》2017,38(3)

根据传染性造血器官坏死病毒(IHNV)基因序列,设计了IHNV最为保守的指纹序列,以及测序引物,建立了IHNV焦磷酸测序检测方法。对所构建的IHNV焦磷酸检测方法进行特异性试验和灵敏度检测。结果表明,所建立的方法特异性好,在8种鱼类病毒中能够特异性检测出目的病毒,检测方法灵敏度高,最低检出核酸量为10pg/μL。对建立的焦磷酸测序检测方法进行了实际应用研究,选取国内采集与进口的鱼类样本共计80批次进行IHNV检测。结果显示,焦磷酸测序检测方法可以有效的检出常规RTPCR不能检出的假阴性样本和弱阳性样本,该方法的灵敏度和特异性可以满足水生动物疫病检测的需要。  相似文献   

喀斯特炭疽菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法的建立     

孙涛  孔德英  滕少娜  邓朝晖 《贵州农业科学》2017,45(2)

为寻求喀斯特炭疽菌的快速检测方法,利用TaqMan探针实时荧光定量PCR技术,以喀斯特炭疽菌基因组中的ACT基因为靶序列设计并筛选特异性引物探针,通过特异性、灵敏度、重复性试验建立喀斯特炭疽菌TaqMan探针实时荧光PCR检测方法。结果表明:建立方法的特异性较强、灵敏度较高、重复性稳定性较好,最低检测限为0.2pg DNA/反应,标准曲线的线性关系良好,相关系数为0.998。该方法操作简便,可用于进出境口岸喀斯特炭疽菌的检疫。  相似文献   

动物源血液中三聚氰胺的液相色谱质谱联用检测方法的建立     

夏明星  黄均艳  李光满  陈忠祥  孙涛  李应国 《安徽农业大学学报》2017,44(3):392-397

为建立不同动物源血液中三聚氰胺的质谱联用检测方法,通过研究不同提取溶剂提取效率和不同固相萃取柱净化能力,进行回收率、精密度和检出限等技术要素评价。分析得到,以甲醇:水:乙酸溶液(49.5:49.5:1)作为提取试剂,MCX柱作为净化固相萃取柱,各种动物源血液样品中三聚氰胺回收率为90.0%~110%,精密度RSD为0.96%~4.64%,方法定量限为10μg·kg~(-1)。试验表明此方法灵敏度高,稳定性好,适用于动物血液样品中三聚氰胺有机物含量的检测。  相似文献   

心痛泰对冠心病大鼠肾素-血管紧张素-醛固酮系统及血管重塑的调控作用          下载免费PDF全文

李雅  郭志华  郭慧芳  孙涛  唐云 《勤云标准版测试》2017,37(9):943-946

目的 从肾素-血管紧张素-醛固酮系统切入,探讨心痛泰对冠心病血管重塑的调控作用。方法 将95只SD大鼠随机抽取17只为正常组,其余78只采用喂饲高脂饲料并腹腔注射垂体后叶素的方法制备冠心病大鼠模型。将造模成功的大鼠随机分为模型组,心痛泰低、中、高剂量组和卡托普利组。各组分别予相应的药物灌胃,正常组和模型组以同等体积的蒸馏水灌胃,每日1次,连续28 d。采用HE染色观察大鼠冠状动脉病理变化,ELISA法检测大鼠血浆肾素（PRA）、血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、醛固酮（ALD）的含量。结果 治疗4周后,与冠心病模型组比较,心痛泰低、中、高剂量组和卡托普利组心脏指数、左心室质量指数、右心室质量指数降低,冠状动脉管壁变薄,管壁厚度/管腔直径、管壁面积/管腔面积降低,血浆PRA、AngⅡ、ALD水平下降（P<0.05）。心痛泰中、高剂量组和卡托普利组各项指标组间比较,差异无统计学意义（P>0.05）。结论 心痛泰可调节肾素-血管紧张素-醛固酮系统,延缓甚至逆转心血管重构,从而改善冠心病大鼠心肌供血和心功能,且心痛泰中、高剂量组疗效优于低剂量组。  相似文献