狸猫α-干扰素全基因的克隆及生物信息学分析     

朱前磊  王亚丹  崔保安  陈红英  魏战勇  王子馨  段廷云 《安徽农业大学学报》2012,39(1):55-60

根据猫α-干扰素基因核苷酸序列,设计并合成了1对引物,PCR扩增狸猫α-干扰素全基因,并克隆、测序。用DNAStar软件及在线分析方法对克隆的IFN-α基因核苷酸及其推导氨基酸序列进行分析,并与人和其他种动物的IFN-α基因进行同源性和进化分析。结果表明,获得了狸猫α-干扰素全基因序列,其大小为631 bp,编码194个氨基酸的多肽,推导氨基酸序列有1个潜在的N-糖基化位点和7个潜在的O-糖基化位点。IFN-α基因存在种属的差异性,亲缘关系越近,同源性越高。狸猫IFN-α基因的成功克隆为进一步研究猫IFN-α基因表达、生物学活性和应用奠定基础。  相似文献   

伪狂犬病病毒Min-A株gD基因的克隆及其真核表达质粒的构建   总被引：1，自引：0，他引：1  

胡涛  崔保安  王岩  祁小乐  王丽娟 《中国预防兽医学报》2004,26(1):25-27

参考GeneBank收录的伪狂犬病病毒gD基因的序列设计了一对引物,对PRV Min-A株进行了PCR扩增,扩增产物克隆于pGEM-T Easy载体.对重组质粒PGTE-gD进行限制性内切酶分析和基因测序,证实了克隆片段的可靠性.测序结果表明目的片段包含一个1203bp的开放性阅读框(ORF),编码400个氨基酸组成的多肽.将gD基因亚克隆至真核表达载体pcDVA3.1-的CMV启动子下游,构建了真核表达质粒pcDNA-gD,为下一步基因免疫奠定了基础.  相似文献   

伪狂犬病病毒gD、gE基因的克隆及转移载体的构建   总被引：3，自引：0，他引：3  

胡涛  崔保安  杨明凡  王学斌  张素梅  王岩 《中国预防兽医学报》2004,26(2):149-151

利用PCR扩增了伪狂犬病病毒Min-A株gD、gE基因,扩增产物克隆于pGEM-T Easy载体.将gD、gE基因连接于质粒pUC18获得pUgDgE,缺失质粒pUgDgE的BamHI和BstEII位点间391bp的片段.在此缺失位置插入来自质粒pcD-NA3.1-的一段含hCMV启动子、多克隆位点和Neo报告基因的片段,构建了通用转移载体pgD-M-gE.该转移载体缺失了伪狂犬病病毒gI基因和gE基因ORF5'端363bp的碱基,有11个酶切位点可供外源基因的插入,上下游侧翼分别为1.25bp和1.42bp.这为开发以伪狂犬病病毒为载体的多价基因工程疫苗提供了有力工具.  相似文献   

猪流感病毒DNA疫苗接种剂量、途径及与猪白介素-6 DNA联用对猪抗流感病毒感染的作用   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘占通  陈红英  崔保安  王川庆 《上海畜牧兽医通讯》2004,(3):26-28

多年来，古典的H1N1流感病毒感染一直是猪呼吸道疾病的一种常见病因。但是最近，H3N1、H1N2和H4N6病毒在北美猪群中已经出现。猪流感病毒感染常见特征是暴发急性呼吸道疾病，伴有发热、嗜睡、流鼻涕、咳嗽和呼吸困难等症状，随之而来的厌食和体重下降使上市时间推迟。因此，猪流感也是农场主关注的一个经济问题。流感病毒与猪繁殖呼吸综合征病毒混合感染时增加病死率，促进猪呼吸道疾病复合症的发生。  相似文献   

分泌抗猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒单克隆抗体杂交瘤细胞株的制备与鉴定     

王莉娟  祁小乐  崔保安 《中国畜牧兽医》2005,32(4):43-45

用纯化的猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)免疫Balb／c小鼠，应用淋巴细胞杂交瘤技术．取脾细胞与NSn骨髓瘤细胞融合，经间接ELISA筛选，3次有限稀释法克隆，得到1株能稳定分泌抗猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒单克隆抗体的杂交瘤细胞株：6Pg。经鉴定，该单抗为IgG1亚类，杂交瘤细胞的平均染色体数目为99条，杂交瘤细胞培养上清及小鼠腹水单克隆抗体的ELISA效价分别为1：256和1：20480。经Western-blot鉴定为针对N蛋白的单抗。6Pn株单克隆抗体与伪狂犬病毒、猪瘟病毒、猪细小病毒均不发生交叉反应，显示出良好的特异性。连续培养20代后能稳定分泌抗体。此单克隆抗体的获得为PRRSV的研究及快速诊断方法的建立奠定了基础。  相似文献   

3 株鸡传染性喉气管炎病毒TK基因的克隆与序列分析     

陈红英  崔保安  李新生  杨明凡  赵丽  管倩 《中国兽医杂志》2008,44(2):21-23

鸡接种传染性喉气管炎病毒（ILTV）弱毒疫苗是预防传染性喉气管炎（ILT）的主要措施,但由于目前使用的弱毒疫苗对雏鸡仍有一定毒力,可引起潜伏性感染及疫情扩散,毒力易于返强,强弱毒无法鉴别诊断等不足,因而缺失毒力基因而保留抗原性的基因工程疫苗等新型ILT疫苗的研制势在必行。研究表明,TK基因是疱疹病毒增殖非必需基因和主要的毒力基因,在神经组织感染与潜伏性感染中具有重要作用。利用基因技术敲除掉病毒的TK基因,可使病毒毒力下降,但不改变其免疫原性,  相似文献   

体外鉴定的禽流感病毒T细胞表位的免疫效果研究     

李新生  陈红英  高凤山  夏春  崔保安 《畜牧兽医学报》2008,39(4):460-465

为验证来源于禽流感病毒的、可与鸡MHCI类分子结合的九肽KILTIYSTV和LLLAIVSLV的免疫原性,使用TIGECPKYV、LLLAIVSLV和KILTIYSTV3条多肽免疫BALB／c小鼠,加强免疫时和加强免疫1、2、3、4、5周后分别采血,流式细胞术测定免疫前后小鼠外周抗凝血中CD8^＋淋巴细胞的变化情况;加强免疫后14d进行MTT试验;首次免疫3周后进行DTH试验;ELISA检测免疫前后小鼠分泌IFN-γ的变化情况。结果表明,KILTIYSTV、LLLAIVSLV、TIGECPKYV免疫后分别引起CD8^＋T淋巴细胞4．2％、4．0％和0．2％的额外增殖。KILTIYSTV和LLLAIVSLV免疫组的IFN7的增长和迟发型变态反应均显著高于对照组。简言之,与重建的MHCⅠ类分子结合的多肽KILTIYSTV和LLLAIVSLV可以刺激小鼠产生特异性CTL反应,而不结合的多肽TIGECPKYV刺激小鼠未产生特异性CTL反应。  相似文献   

河南省主要致病性鸡埃希氏大肠杆菌血清学分型初探   总被引：4，自引：0，他引：4  

崔保安  佗文举 《中国畜禽传染病》1992,(6):6-7

  相似文献   

河南省主要养鸡地区鸡大肠杆菌病病原分离及并发感染初析     

崔保安  卢中华  毛春生  李新生  赵星灿 《中国预防兽医学报》1993,(5)

对郑州、洛阳、濮阳、漯河等8个地市几十个鸡场进行了大肠杆菌病调查。在病理剖检拟诊为大肠杆菌病的病鸡中,大肠杆菌分离的阳性率为63.3%;分离菌对氟哌酸.庆大霉素最敏感;对药物敏感性与血清型无直接相关性。多数病例继发感染传染性法氏囊病、鸡新城疫、鸡败血支原体病及鸡霍乱。防治鸡大肠杆菌病,除搞好环境卫生外,对发病鸡群及时进行药敏试验,筛选敏感药物进行治疗,同时用大肠杆菌苗进行免疫接种,亦可收到较好的效果。  相似文献   

表达鸡白细胞介素18重组禽痘病毒的构建及其表达产物生物学活性的检测     

陈红英  黄青云  崔保安  李新生  管倩  刘金朋 《华北农学报》2008,23(6)

为构建表达鸡IL-18的重组禽痘病毒，将含痘病毒启动子IP2EP2驱动的鸡，IL-18基因插入到禽痘病毒转移载体pSY681中，获得重组转移载体pSY681／ChIL-18。将pSY681／ChIL-18转染已感染亲本禽痘病毒S-FPV-017株的鸡胚成纤维细胞，使其在鸡胚成纤维细胞内与禽痘病毒基因组发生同源重组，产生表达鸡IL-18的重组禽痘病毒rFPV-ChIL-18。在含有X—gal的营养琼脂培养基上进行蓝斑筛选后，对重组病毒rFPV-ChIL-18又进行了多次蚀斑克隆。以重组禽痘病毒DNA为模板，利用鸡IL-18基因特异引物进行PCR，扩增出1条约0．6kb的带。收集含鸡IL-18蛋白的细胞上清液进行MTT试验，表达的产物能明显提高鸡淋巴细胞的转化率。  相似文献