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应用RT-PCR方法快速诊断猪繁殖与呼吸综合征的研究 总被引:3,自引:1,他引:2
参照国内外已发表的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的ORF5基因序列设计1对引物,建立检测PRRSV的RT-PCR方法,并对长春周边不同地区10个猪场送检的20份病料进行检测。特异性试验、敏感性试验和重复性试验结果表明,此方法可以用于临床检测PRRSV。应用该方法从3个猪场的4份病料检出PRRSV,证实长春周边地区存在PRRSV感染。 相似文献
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为了优化银翘天甘含药血清的制备工艺,在单因素试验的基础上,选取采血时间、给药次数及给药浓度为自变量,以小鼠血清中绿原酸和连翘苷含量的综合评分为响应值,采用响应面分析方法,研究各自变量及其交互作用对综合评分的影响。利用Design-expert软件分析得到二次多项式回归方程的预测模型,并确定了银翘天甘含药血清最佳制备工艺条件为:采血时间30 min、给药次数4次、给药浓度0.02 g/mL,理论计算综合评分为95.62%,小鼠血清中绿原酸浓度为33.65 μg/mL,连翘苷浓度为193.86 μg/mL。该研究为银翘天甘含药血清的制备奠定了基础。 相似文献
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为探究复方中草药四味穿心莲益生菌发酵产物(FPSCS)对鸡大肠杆菌的作用,采用微孔-平板法测定其对O2型鸡大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),以O2型鸡大肠杆菌半数致死量(LD50)感染SPF雏鸡制备病理模型,随机分为FPSCS高、中、低剂量组,硫酸新霉素组,四味穿心莲散组,益生菌组及对照组,统计总有效率、治愈率;ELISA试剂盒检测各组动物外周血液中炎症因子的含量。结果显示:FPSCS体外对O2型鸡大肠杆菌的MIC和MBC均为31.25 mg/mL,口服FPSCS剂量为0.1~0.5 g/(次·只)的总有效率为73.33%~83.33%、治愈率为70%~80%,均显著高于四味穿心莲散组和益生菌组(P <0.05),且治疗初期可显著降低促炎因子TNF-α、IL-1β、IL-6的含量(P <0.05),显著升高IFN-γ的含量(P <0.05)。由此表明,FPSCS可通过抑杀O2型鸡大肠杆菌和降低鸡外周血促炎因子的含量而发挥较好的抗菌活性。 相似文献
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猪传染性胸膜肺炎的治疗李立山周铁忠(辽宁省锦州畜牧兽医学校,121001)猪接触传染性胸膜肺炎是一种呼吸道传染病,气温较低的冬季、早春晚秋多发病,并且多发生在20~50kg阶段的猪,夏季很少出现此病。在临诊及剖检上表现肺炎和胸膜炎特征性症状和病理改变... 相似文献
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1 水生动物饲料中鱼粉替代的必要性采用配合颗粒饲料对水产养殖是一个有效的增产措施 ,蛋白质是饲料中最为重要的营养组分 ,同时也是配合饲料中成本最高的部分。鱼粉作为水产饲用蛋白的优质供体 ,其使用成本会占到整个养殖成本的 4 0 %~ 6 0 % ,因其蛋白含量较高 ,具有氨基酸 相似文献
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采用重组RTB蛋白刺激RAW264.7细胞,对iNOS、IL-6和TNF-αmRNA表达及IκB-α和NF-κBp65磷酸化蛋白表达进行分析,探讨重组RTB蛋白对巨噬细胞活化及对NF-κB信号通路的影响。结果显示,重组RTB蛋白组RAW264.7细胞iNOS、IL-6和TNF-αmRNA的表达显著高于对照组(P<0.01),并呈现时间和计量依赖性;加入NF-κB抑制剂BAY后,iNOS、IL-6和TNF-αmRNA表达降低(P<0.05或P<0.01)。随RTB刺激RAW264.7时间的延长,IκB-α蛋白的磷酸化程度增强,NF-κBp65磷酸化蛋白表达逐渐增高,表明重组RTB蛋白具有促进巨噬细胞活化及活化NF-κB信号通路的功能。 相似文献
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运用荧光定量PCR方法确定细菌细胞壁的组成成分脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)、病毒模拟物聚肌苷酸-聚胞苷酸(poly(i:c))对BV-2小胶质细胞中高迁移率族蛋白B1(HMGB1)核质穿梭影响的最佳作用质量浓度和时间;免疫荧光方法观察BV-2小胶质细胞活化的特异性标志物IBA-1以此确定LPS、poly(i:c)能否激活BV-2小胶质细胞;Western blot方法检测LPS、poly(i:c)诱导BV-2小胶质细胞中促炎细胞因子(IL-1β、TNF-ɑ、NLRP3和iNOS)的蛋白表达量变化;分离细胞核、细胞质蛋白分别检测细胞质和细胞核组分中的HMGB1。结果显示,终质量浓度为10μg/L LPS、50 ng/L poly(i:c)、刺激时长6 h时能够显著增加促炎因子蛋白表达量;免疫荧光结果显示在LPS、poly(i:c)刺激下,BV-2小胶质细胞激活;核质分离结果显示BV-2小胶质细胞被LPS、poly(i:c)刺激后,HMGB1细胞质移位增加。结果表明,细菌或病毒感染都能够使BV-2小胶质细胞内的HMGB1由细胞核向细胞质移位。 相似文献
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从辽宁某鹅场无菌采集病死雏鹅肝脏、肾脏等病料,通过鹅胚接种、核酸检测、电镜观察等方法进行病原的分离鉴定,并对所分离的毒株进行遗传变异分析和抗原表位预测。经过接种病料鹅胚的病变特征观察、病毒PCR核酸扩增和序列分析以及透射电镜形态鉴定,确认成功分离到1株GAstV(goose astrovirus),暂命名GAstV/LN/202101(简称LN202101)。针对编码衣壳蛋白保守结构域N和P2 Capsid domain的核苷酸序列对该毒株进行遗传进化树和同源性分析,结果显示该毒株与江西株JX01(MZ576222.1)等近2年发现的毒株亲缘关系较近,在同一簇分支,且属于GAstV-Ⅱ型;但同源性已表现出差异。以HAstV(human astrovirus)已验证表位为参考,依据抗原抗体结合模型,结合生信方法推测以下4段序列可能为GAstV的抗原表位:453~467aa(PQADSRSRYNANITF)、508~513aa(VCNTLA)、525~553aa(TAVLRVNTSTTSTGGQITELRNRLNIADG)和585~597aa(DSNPGETFQSFKM)。结果表明,GAs... 相似文献