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为揭示牛核移植胚胎(SCNT)异常甲基化模式,选择配子期、S期、2-cell、8-cell和桑葚胚5个发育阶段的早期牛核移植胚胎作为试验组,以相应阶段的体外受精胚胎(IVF)作为对照,对核移植胚胎中呈母源印记的PWS/AS基因簇ICR区进行BSP测序,分析了SCNT和IVF胚胎不同发育时期SNRPN启动子区域甲基化水平的总体变化模式,并对该区域内的5个甲基化位点分别进行比较,筛选敏感位点。结果表明:SCNT胚胎PWS-IC甲基化水平,各期均无显著性差异(P0.05),一直维持在较高水平;SCNT胚胎二细胞期PWS-IC甲基化水平极显著低于同期的IVF胚胎(P0.01);该区域第1个和第5个甲基化位点是去甲基化抑制机制的易感位点。因此,PWS-IC区域甲基化模式改变,导致了SCNT胚胎母源DNA的高甲基化,推测与SCNT胚胎发生过早甲基化重建相关。研究结果可为提高SCNT胚胎克隆成功效率提供理论借鉴。 相似文献
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为建立牛弓形虫抗体间接ELISA检测方法,根据弓形虫MIC10基因序列设计合成引物,应用PCR技术扩增MIC10基因,将其克隆至pET-22b载体,构建重组质粒pET-22b-MIC10,将其转化至E.coli BL21(DE3),经IPTG诱导,SDS-PAGE及Western-blot分析表明,该重组蛋白能与弓形虫阳性血清发生特异性反应。重组蛋白经NiNTA纯化,应用牛弓形虫阳性、阴性血清建立了ELISA检测方法,抗原最佳包被质量浓度为5mg/L,二抗稀释倍数为1∶20 000,封闭液为含5%脱脂奶粉的PBST溶液。该方法重复性好、特异性强、敏感性高,为牛弓形虫流行病学调查奠定基础。 相似文献
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为提高柳生金针菇多糖产量,通过装液量、接种量、培养温度和培养箱转速单因素实验及正交优化试验,对其发酵培养条件进行优化。选取浸提时间、浸提温度及液料比3个因素,以菌丝体多糖提取率为指标,采用正交试验设计确定多糖提取的最佳工艺。结果表明,适宜柳生金针菇深层发酵的培养条件为:装液量120 m L/250 m L、接种量10%、培养温度23℃、培养箱转速150 r/min。菌丝体多糖提取的最佳工艺条件为:浸提时间2 h,液料比50∶1,浸提温度90℃,最佳工艺路线为:热水浸提2 h,过滤,合并3次提取液,旋转蒸发仪浓缩发酵液至原体积的1/10,4倍体积无水乙醇4℃醇沉24 h,3500 r/min离心5 min,去上清,-80℃预冻过夜,真空冷冻干燥,称重,再次溶解多糖,离心去沉淀,上清液醇沉,再次干燥,得菌丝体多糖,多糖提取率为74.39%。 相似文献
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红小豆不同密度、播期、施肥量对产量性状的影响 总被引:3,自引:0,他引:3
本文通过对不同密度、施肥量、播期小豆的3因素2水平试验研究结果表明:产量最高的是0.8万×10kg×5月20日组合,产量是172kg/667m2。小豆产量与密度、施肥量、播期之间的关系方程为:y=-26+0.6x1-2.3x2+6x3-7x1^2-2.4x2^2-7x3^2-0.4x1x2+0.5x1x3+8x2x3。经过显著性测验,达到了显著水平。 相似文献
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100.
针对森工企业的现状,在详细介绍层次分析法及在确定企业员工绩效评价中权重的同时,以某森工企业为例,确定了其员工绩效评价过程中指标的排序问题,明确了每位员工绩效评价的重点,指明了管理方向和目标。 相似文献