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重组羊奇异变形杆菌ompA乳酸乳球菌的构建及其在小鼠体内的定植规律检测 总被引:1,自引:0,他引:1
构建了含羊奇异变形杆菌外膜蛋白A(ompA)编码基因的重组载体pNZ8149-ompA,并将其电转入乳酸乳球菌NZ3900中。利用Westen blot检测目的蛋白的表达,流式细胞仪及间接免疫荧光技术检测目的蛋白在乳酸乳球菌中的定位。将重组乳酸乳球菌灌胃BALB/c小鼠,分别于口服后1,2,3,4,5,6,7d取其十二指肠、空肠、回肠、盲肠的肠道冲洗液,通过平板菌落计数法检测乳酸乳球菌在肠道的定植情况。Western blot检测到目的蛋白于49 000处出现特异性条带;流式细胞仪检测到重组乳酸乳球菌表面荧光强度明显强于空质粒对照组;间接免疫荧光试验检测到重组乳酸乳球菌菌体表面出现绿色荧光。灌服小鼠后,重组乳酸乳球菌在小鼠各肠段的定植比例不同,定植能力于口服后6d达到高峰,7d后在重组菌在十二指肠、空肠、回肠和盲肠的定植率分别占第1d的15.23%,24.19%,48.57%,40.07%。本试验证明羊奇异变形杆菌ompA能够稳定表达于乳酸乳球菌表面,且重组乳酸乳球菌在小鼠肠道内具有良好的定植能力,其定植能力为回肠盲肠空肠十二指肠。这为研究乳酸乳球菌作为羊奇异变形杆菌口服疫苗抗原递送载体提供了试验基础。 相似文献
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1.猪流感主要发生在初冬及冬末春初季节,病猪主要症状表现为发呛、流涕、打寒颤、体温突然上升到40℃,甚至42℃,小便发黄、精神不振、食欲废绝。防治:1大蒜(或葱白)100克,捣碎加水一次喂给。2冰糖200克,谷子250克,大葱50克,水煮1次喂给,每天1次,连喂3天。3紫苏50克,杏仁25克,茅草根75克,薄荷50克,水煎1次灌服,每天1次,连 相似文献
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肠套叠是指一部分肠道及其肠系膜直接进入或套入紧接着的远端肠管,导致远端肠管闭塞及肠系膜循环障碍,主发于十二指肠和回肠与盲肠交界处。肠阻塞是由于肠管的运动机能和分泌机能减弱而发生障碍,致使大量肠内容物停滞并失去水分,从而引起肠管的扩张和阻塞(中兽医称为结症)。1病因奶牛肠套叠是由于肠道内寄生虫的侵袭或过度饥饿或与患部肠腔中的肿瘤及炎性肿胀有关。 相似文献
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2014年7月上旬,淮安区一养殖户饲养的22日龄、2100只雏鸭发生以精神沉郁、食欲减退、头颈歪曲、叫声嘶哑、腹泻为主要症状的疾病,业主曾先后使用强力霉素、氟哌酸等药物进行治疗,未见疗效,已有251只病鸭死亡。笔者根据临床症状和病理变化,并结合实验室检验结果,确诊为大肠杆菌与弓形虫混合感染。现将该病例的诊治情况报告如下:(一)临床症状病鸭精神沉郁,食欲减退甚至废绝,羽毛松乱无光,两翅下垂,排灰白色稀粪,结膜苍白,眼睑凹陷,外型消瘦,全身呈脱水样,不能站立和走动,多卧地蹲伏,驱赶时病鸭表现出跛行,腿麻痹,后期出现 相似文献
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近年来,我县保护地蔬菜发展较快,越冬大棚栽培因生产季节较长,往往一次性施入大量的畜禽粪肥和化肥作基肥,当冬春季出现连续晴暖天气时,常常发生氨气中毒的生理障碍。 相似文献
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试验旨在构建能表达牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)E2抗原蛋白的重组乳酸乳球菌(Lactococcus lactis),为进一步研制BVDV乳酸菌口服活载体疫苗奠定基础。将BVDV E2基因克隆后测序,根据乳酸乳球菌的密码子偏嗜性进行优化,再将优化的基因片段插入表达载体pNZ8148中,并电转化乳酸乳球菌NZ9000感受态细胞,构建重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000,经1 ng/mL乳链菌肽诱导表达后,对菌体物进行了SDS-PAGE和Western blotting分析。将重组乳酸菌pNZ8148-E2/NZ9000口服免疫6~12月龄健康犊牛,在免疫后不同时间点采集血液样品并分离血清,用间接ELISA方法检测抗体水平。结果显示,PCR扩增到了1 149 bp的目的片段,乳酸菌密码子偏嗜性优化后,GC含量从45.28%变为34.30%。重组质粒pNZ8148-E2经酶切鉴定插入片段与预期大小相符,在菌体裂解物中出现大小约42 ku的条带,与预期蛋白大小一致,且该蛋白可与BVDV E2抗体反应。在免疫犊牛的血清中检测到特异性抗BVDV E2蛋白的抗体。本研究结果表明,表达BVDV E2蛋白的重组乳酸菌口服免疫可诱导犊牛产生特异性的体液免疫反应,该重组菌具有较好的免疫原性。 相似文献
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