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试验旨在构建鸡Prnp基因原核表达载体,并在大肠埃希菌中进行表达,为制备鸡朊蛋白单克隆抗体提供材料。根据GenBank已报道的鸡Prnp基因组序列和pET-28a质粒多克隆位点设计引物,以健康的鸡全血基因组DNA为材料,采用PCR的方法扩增鸡的Prnp基因,将目的基因片段与pET-28a载体连接,构建重组原核表达载体。重组菌转化到E. coli BL21(DE3)感受态细胞中,并用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(isopropyl-β-D-thiogalactoside,IPTG)进行诱导表达,十二烷基磺酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)鉴定表达的重组蛋白。结果表明,重组蛋白在诱导剂的终浓度为0.08 mmol·L-1,16 ℃,220 r·min-1诱导7 h,蛋白表达量最高。综上所述,本研究成功构建了pET-28a-ChPrnp重组表达菌株,为Prnp朊蛋白的结构、生理功能和致病机制研究提供方法。 相似文献
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膨化与非膨化鲤鱼育成料的养殖效果比较 总被引:3,自引:0,他引:3
近20年来,膨化技术在饲料加工中有长足的发展,被认为是一种先进的水产饲料加工技术,尽管有资金投入高、加工开支大、维生素损失等缺点,但优点仍是主要的,如膨化料在水中保形的时间长、营养成分的可消化率高、饲料系数低、养殖成本低、对水域的污染小等。由于上述认识多半是根据国外对叉尾鱼回,欧洲鳗、鲑鳟鱼类的研究作出的,对我国主养的鲤鱼及其它鲤科鱼类的了解还不充分,为此,我公司于1999年10月至2000年3月进行了非膨化的挤压硬颗粒料与膨化料的养殖效果试验。1 试验料11试验料及其制作试验料四种,其中挤压硬颗粒料一种,膨化料三种,使用… 相似文献
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发病情况2004年5月河北省灵寿县南宅乡李某养鸡3000羽,在20日龄出现发呆,毛逆立无光泽,拉白灰色稀粪,采食量下降,李某曾用过硫酸庆大霉素或病毒唑,1日发病20~30只,来我处就诊. 相似文献