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青刺果促腋芽分枝快繁及生根诱导 总被引：1，自引：1，他引：1
研究青刺果的快繁技术。通过腋芽丛生方式对青刺果组织培养中种子的灭菌,腋芽丛生,壮苗培养,生根诱导等进行了研究,得出适合青刺果离体培养的培养体系。培养基MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L的激素搭配较适合青刺果的腋芽诱导,平均每个外植体可得到6~10个丛生芽。培养基MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 0.1 mg/L明显促进茎的增粗和叶片的扩展。适宜的生根培养基为改良的1/2MS+IBA 1.0 mg/L,生根率可达85%。生根苗经炼苗处理后移栽到蛭石∶营养土(1∶1)的花盆中,成活率达80%以上。青刺果带腋芽的茎段丛生增殖效果好。在培养基中添加不同种浓度的各种生长素对再生芽进行培养之后生根效果较好,移栽成活率也较高。 相似文献
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犬细小病毒病是危害养犬业的重要传染病之一,患病犬难以治愈。单克隆抗体治疗此病效果明显,本文介绍了制备抗CPV-2a单克隆抗体的方法。用纯化的犬细小病毒（canine parvovirus,CPV）2a型分离株免疫新西兰大白兔和Balb/c小鼠制备抗CPV-2a多克隆抗体及单克隆抗体。经亚克隆得到1H9、2B5、2B7和2C7共4株单抗,Western blotting鉴定单抗的免疫反应性;间接ELISA方法检测单抗的特异性。为了快速对犬细小病毒病作出诊断,建立了CPV-2a双抗夹心ELISA方法。兔多抗作为捕获抗体,鼠单抗作为示踪抗体,辣根过氧化物酶标记羊抗鼠IgG作为检测系统;捕获抗体和示踪抗体最佳稀释度分别为1：800和1：2000;检测系统最佳稀释度为1：4000。结果表明：所得4株单抗与pET-32a-VP2蛋白发生特异性反应,且与狂犬病毒（RV）、犬温热病毒（CDV）不交叉反应;建立的双抗夹心ELISA方法对病毒的最低检出量为4.375μg/mL,与美国RB试剂盒相比,符合率为95%。单抗制备为犬细小病毒病的治疗奠定了基础;双抗夹心ELISA方法的建立为疑似粪便样本提供了简单、快速和可靠的检测手段。 相似文献
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犬细小病毒生物学特征及检测技术研究进展 总被引：3，自引：0，他引：3
犬细小病毒(CPV)所引起的疾病在世界范围内流行,临床主要表现为犬的肠炎和心肌炎。CPV属于单股负链的自主复制的细小病毒属成员,其基因组可编码两种结构蛋白和两种非结构蛋白。CPV的主要检测方法有分子生物学检测方法和免疫学检测方法,其中分子生物学检测方法包括常用的PCR检测技术、核酸杂交检测技术及近年发展起来的LAMP检测技术及NASBA检测技术。免疫学检测方法主要包括ELISA检测技术、胶体金检测技术、血凝试验、免疫荧光检测技术及未来可用于CPV检测的生物条形码检测技术。新技术的应用必将为临床控制CPV找到更为有效的检测方法。 相似文献
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小反刍兽疫病毒H基因的原核表达与鉴定 总被引：1，自引：0，他引：1
根据GenBank中已发表的小反刍兽疫病毒(PPRV)Nigeria 75/1株的H基因序列,设计上下游引物并添加BamH I酶切位点,以含有小反刍兽疫病毒H基因的Topo-PPRVH质粒为模板进行PCR扩增,扩增产物克隆于pEASY-T载体中,用BamH I单酶切后将目的片段连接到原核表达载体pET-32a(+)中,核酸序列分析证明.成功构建了PPRV H原核表达质粒pET-32a-H.将pET-32a-H重组质粒转化大肠杆茵 BL21(DE3)进行融合表达.经SDS-PAGE电泳,可见H蛋白获得了高效表达,融合蛋白的分子量约为87 Ku,表达产物以包涵体的形式存在,其表达量达到茵体总蛋白的38%,占包涵体蛋白的80%以上.Western blot鉴定表明,所表达的重组蛋白能被抗组氨酸单抗、抗PPRV标准阳性羊血清及抗PPRV疫苗的羊血清所识别,具有良好的免疫原性. 相似文献
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