白喉毒素DAB_(389)-αMSH重组毒素的构建及表达     

李泽鸿  刘文涛  李昌昊  张国利 《中国兽药杂志》2010,44(9):7-9,37

利用含有白喉毒素N端序列的基因作上游引物、含有αMSH全序列作下游引物,以pET28a/DAB389-EGF为模板,PCR扩增DAB389-αMSH基因片段,用限制性内切酶EcoR I和NcoI酶切,并插入原核表达载体pET28a的相应位点,构建了重组表达载体pET28a/DAB389-αMSH,在大肠杆菌中表达重组融合蛋白DAB389-αMSH,转化菌经1 mmol/L IPTG、30℃诱导5 h,用SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的重组毒素。结果表明扩增的片段与理论值一致,重组质粒的DNA序列分析正确;SDS-PAGE表明重组毒素相对分子量为43.76 KD,且表达量达菌体总蛋白量的31.6%。Western blot分析显示,重组毒素能特异性地与抗白喉抗体结合,表明已成功构建表达了重组DAB389-αMSH的工程菌株,并获得表达蛋白。  相似文献   

会泽林业综合行政执法初探     

李昌昊 《中国林业》2011,(22):36-36

为了巩固和保护好来之不易的造林绿化成果，云南省会泽县林业局审时度势，及时将林业工作的重点转移到森林资源的保护上来，不断健全林业行政管理和执法体系，努力创新林业行政执法机制，构筑了一个机动、灵活、高效的林业综合行政执法“1221”运行模式。  相似文献