我省板栗主栽品种(无性系)RAPD反应体系的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

翁尧富  陈源  郑康乐  赵勇春  张建忠  廖石水 《浙江林业科技》2001,21(3):16-18

在RAPD反应中,有许多影响结果的稳定性和准确性.本项研究采用浙江省8个板栗主栽品种(无性系),对RAPD各种反应条件进行了探索,结果表明,板栗理想的反应体系为20μl反应体积含有100mmol/LTris-Hcl,500mmo1/LKCl,20mmol/LMgCL2,0.01%Gelatin,dATP、dTTP、dCTP、dGTP的量各为100μmol/L,50~200ng引物,0.75～1.0单位Taq酶,2～10ng模板DNA.反应条件为94℃预变性2min,再94℃30s、40℃30s、72℃1.5min扩增38个循环;最后在72℃延伸7min.应用上述反应体系进行板栗RAPD反应,扩增产物在1.0%琼脂糖凝胶中电泳,经EB染色后在紫外灯下观察照相,可获得满意的DNA指纹图谱.  相似文献   

板栗优良品种（无性系）苗木分子标记鉴别研究）   总被引：17，自引：2，他引：15  

翁尧富  陈源  郑康乐  赵勇春  黄少甫 《林业科学》2001,37(2):51-55

利用ＲＡＰＤ标记对浙江省林木良种审定委员会审定（认定）和通过省级鉴定的８个板栗品种及无性系进行指纹分析，鉴别出各板栗品种（无性系），实验过程中对６８４个随机核苷酸引物进行了重复筛选，经筛选共获得９个稳定的ＲＡＰＤ标记，构建了板栗的ＮＤＡ指纹图谱，经过大量的实验，确定了鉴别板栗优良品种（无性系）的较为理想的程序，获得了ＲＡＰＤ良好的重复性，建立了较完整的板栗ＲＡＰＤ分析的技术体系，用大田苗进行步验证，结果可靠。  相似文献   

板栗叶片的DNA提取   总被引：2，自引：0，他引：2  

翁尧富  陈源  郑康乐  陆军  赵勇春 《浙江林业科技》1999,(3)

板栗叶片是一种多糖和次级混合量均较高的植物材料,DNA提取的关键步骤是使用十六烷基三甲基溴化铵（CTAB）和聚乙烯吡咯啉酮（PVP）。经本文所描述的方法得到的DNA,完全能满足随机扩增多态性DNA（RAPD）分析。  相似文献