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风信子ISSR-PCR体系的优化及引物筛选 总被引：1，自引：0，他引：1
以风信子基因组DNA为ISSR-PCR扩增模板,采用单因素试验方法,对影响PCR扩增体系中Mg2+浓度、dNTPs、模板DNA及引物浓度、Taq酶的用量5个因素进行研究,建立了风信子ISSR-PCR扩增最佳反应体系,即:20μL反应体系中分别加入2μL10×Buffer、1.4μL Mg2+(25mmol/L)、1.5μL dNTPs(2.5mmol/L)、1.5μL引物(10pmol/μL),0.2μLTaq酶(5U/μL),1.2μL模板(30ng/μL),ddH2O补足体积。并以此体系对110条引物进行筛选,最终获得了多态性高,重复性好的引物12条。 相似文献
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风信子DNA不同提取方法的效果比较 总被引：1，自引：0，他引：1
采用简易CTAB法、改良CTAB法、SDS-CTAB法、高盐法和CTAB-硅珠法等5种方法对风信子花蕾、叶片和鳞片基因组DNA进行提取.比较DNA纯度、电泳、得率等指标,结果表明:CTAB-硅珠法没有获得DNA,其他方法均可提出DNA;在纯度方面,简易CTAB法＞SDS-CTAB法＞改良CTAB法＞高盐法;在得率方面,简易CTAB法＞改良CTAB法＞高盐法＞SDS-CTAB法.简易CTAB法提取的DNA纯度较高,OD260/OD280为2.01,OD260/OD230为2.33,浓度为406.8ng·μL-1,得率为175.95ng· μL-1.花蕾、叶片适合风信子基因组DNA的提取. 相似文献
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现代栽培的所有园艺风信子都是由原种风信子(Hyacinth orientalis)培育驯化而来,其遗传基础相对较窄,但经过几个世纪栽培选育,已经发生很大变化。为研究风信子品种之间的遗传关系,本研究利用12条引物对29个风信子品种进行ISSR分子标记研究,扩增获得109条谱带,多态性条带有103条,占条带总数的94.5%,表明风信子具有较高的遗传多样性。29个风信子品种的遗传距离范围为0.018 5~0.820 1,平均遗传距离为0.449 8。其中‘Atlantic’与‘Gipsy Queen’遗传距离最大为0.820 1,亲缘关系最远;‘Blue star’与‘Delf Blue’遗传距离最小,两品种之间相似度较大,亲缘关系最近。使用软件NTSYS-pc(2.10e版)获得UPGMA聚类树形图,以相似系数0.635为阈值,29个风信子品种可聚为两大类。聚类分析发现相同色系的品种几乎聚为一类,说明同色系风信子品种亲缘关系较近。因此,在杂交育种时可选择不同花色的品种作亲本,进行新品种的选育。 相似文献
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园艺风信子品种染色体倍性变异丰富,染色体倍性高的品种杂交更易获得杂种后代,致使其杂种后代真实性鉴定较为困难。本研究利用3条引物对风信子3个杂交组合(‘Ostara’בFondant’,‘Sky Jacket’בFondant’,‘White Pearl’בBlue Jacket’)的杂种后代进行ISSR分子标记研究,以鉴定各杂交组合杂种后代的真实性。结果表明:‘Ostara’בFondant’组合中12个杂种后代为真实杂种,真实杂种率为92%;‘Sky Jacket’בFondant’杂种后代中7个为真实杂种,真实杂种率为41%;‘White Pearl’בBlue Jacket’14个杂种后代均鉴定为真实杂种,真实杂种率为100%。研究结果显示ISSR分子标记方法可以用于风信子杂种后代真实性的鉴定,将为开展风信子品种间大量杂种后代的快速鉴定和早期选择提供理论依据和实践方法。 相似文献
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