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HC-Pro基因片段介导的高抗TuMV 总被引:1,自引:0,他引:1
芜菁花叶病毒(turnip mosaic viruses,TuMV)是侵染重要经济作物的主要病毒之一,寄主范围十分广泛,尤其是对十字花科作物的危害最为严重。为了获得对TuMV持久稳定的高度抗性,本研究以TuMV HC-Pro基因的453 bp保守序列为靶标,构建了植物表达RNAi载体pBBBTu-HC-Pro,并转化了TuMV的天然宿主拟南芥。对转基因拟南芥用北京地区流行的TuMV强致病株BJ-C4进行了抗病接种鉴定。鉴定的13个单拷贝转基因株系中有4个对TuMV的BJ-C4株表现出高度抗性,抗性比对照提高约80%以上,且抗性可以稳定遗传。经半定量和荧光定量PCR方法检测,在高抗转基因植株体内几乎检测不到病毒的累积,抗病效果明显。该载体在利用基因工程抗TuMV育种中具有广阔的应用前景。 相似文献
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为了探明芦笋对烟粉虱Bemisia tabaci (Gennadius) 的抗性机制, 为芦笋抗性品种的选育及烟粉虱的综合防治提供理论依据,本研究以收集的16份芦笋品种为材料, 于苗期人工释放烟粉虱后测定各品种抗性相关指标叶绿素a、叶绿素b、POD、SOD、可溶性蛋白、可溶性糖、游离脯氨酸、丙二醛、单宁、类黄酮、总酚和表皮蜡质等的含量, 利用“隶属函数法”“虫量比值法”和“表型观察法”对其抗虫性进行鉴定并研究其抗性机制。结果表明, 释放烟粉虱后不同时间, 品种间烟粉虱数量存在显著差异, 不同芦笋品种对烟粉虱诱集能力不同;各生化指标在烟粉虱为害下变异程度较大, 变异系数变幅在24.46%~47.43%;16个芦笋品种中, ‘浙丰1号’‘阿特拉斯’和‘紫色激情’的抗虫能力相对较强。12个生化指标降维为5个主成分, 累计贡献率达84.136%;相关分析表明:芦笋抗虫性与单宁、表皮蜡质含量呈极显著正相关, 与POD活性、总酚、可溶性糖含量呈显著正相关, 与丙二醛含量呈极显著负相关, 与其他性状无明显相关性。选育单宁、总酚、表皮蜡质和可溶性糖含量高、POD活性高、丙二醛含量低的品种, 可提高芦笋对烟粉虱的抗性。 相似文献
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在农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)介导的植物遗传转化中,常常需要用到植物表达双元载体。为便于基因工程操作并能在获得转基因植物后方便将标记基因删除,我们构建了植物表达双元载体pYBA100,以满足用于生产安全转基因植物的需要。本研究通过融合PCR方法,尽可能去除所有非必需的序列,将pYBA载体最小化。pYBA载体在大肠杆菌中为多拷贝,骨架为3.69kb。我们构建的含NptⅡ植物筛选标记基因的载体pYBA100仅为5.37kb,多克隆位点为22个,方便基因工程操作。载体pYBA100的T-DNA植物筛选基因表达框两侧预留有LoxP-FRT融合位点,方便在获得转基因植物后通过Cre或FLP重组酶将植物筛选标记基因删除。pYBA100载体能于大肠杆菌和农杆菌中自我复制,并成功转化了拟南芥,符合农杆菌介导的植物转基因要求。离体删除实验结果证明,载体pYBA100能经Cre重组酶删除植物标记基因表达框。 相似文献
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五云冬瓜是从江西赣县当地农家传统种植的冬瓜中,选择早熟变异单株,经多代连续自交选育所获得的品种。该品种生长势强,早熟,主蔓第1雌花节位为第18节。全生育期160 d;叶长26 cm,叶宽32 cm,果实长圆筒形,长79.3 cm,横径34 cm,果肉厚7.8 cm,单瓜质量38.5 kg;成熟果表皮覆盖一层白粉,果形美观,品质佳,耐贮运,商品性好;高抗疫病和枯萎病;一般每667 m~2产量在12 000 kg左右,高产可超过15 000 kg;在赣南和赣中等地都表现为早熟丰产,适宜在我国长江流域地区保护地早熟栽培和露地丰产栽培。 相似文献
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双边栝楼具有较高的食用价值和药用价值,针对高品质籽用双边栝楼种苗市场供应严重不足的现状,研究双边栝楼的快繁技术体系具有重要意义。本研究选用优质、健壮皖楼20号带腋芽茎段为外植体,使用不同灭菌剂和灭菌方法,调节各时期激素种类与水平,以微型扦插的方式研究栝楼的无性快繁技术。结果表明,外植体的灭菌使用75%酒精30 s+无菌水冲洗2~3次+0.1%HgCl2 10 min+无菌水冲洗3~4次效果较好,其污染率为26.3%。交替灭菌的平均总污染率为35.7%,单一灭菌剂的平均总污染率为71%。因此,在实践中可以采取交替灭菌和多次灭菌相结合的方式,以达到灭除杂菌的目的。双边栝楼组织培养体系的建立,适宜芽初代诱导的培养基为:MS+6-BA 0.1 mg/L+NAA 0.05 mg/L,茎段腋芽萌发率为79.4%;增殖培养基为:MS+6-BA 0.6 mg/L+NAA 0.1 mg/L,增值系数为6.75;生根培养基为:MS+NAA 0.6 mg/L+IBA 0.6 mg/L,生根率为88.6%。炼苗移栽至混合蚯蚓土和育苗基质(1∶1)中,成活率高达86.7%,为实现籽用双边栝... 相似文献
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为了获得对芜菁花叶病毒(TuMV)高度稳定的抗性,选取TuMV的外壳蛋白(CP)基因近3′端保守区共377 bp的核苷酸序列,构建了抗TuMV的发卡结构RNAi载体,并转化了TuMV的天然宿主拟南芥。转基因植株用北京地区TuMV主要流行的强致病株系BJ-C4人工接种。鉴定的8个转基因株系中有3个株系表现出对TuMV的高度抗性。定量PCR结果显示,高抗转基因株系体内几乎检测不到病毒的积累。 相似文献