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大豆孢囊线虫4号生理小种侵染大豆根系诱导表达的cDNA分析 总被引：1，自引：0，他引：1
大豆孢囊线虫(Heterodera glycines Ichinohe；Soybean Cyst Nematode，SCN)是一种土传的专性内寄生线虫。SCN的二龄幼虫侵入到大豆幼嫩的根组织中，导致大豆根内的细胞变形并与之形成“合胞体”。合胞体在形态上和生理上的变化是SCN直接诱导大豆基因表达的结果。本研究以高抗SCN的灰布支黑豆为材料，用大豆孢囊线虫二龄幼虫直接接种大豆的根系，应用DDRT—PCR技术及RDB(Reversedot—blotting)杂交鉴定，获得6个阳性cDNA克隆，分别是SCN侵染后5天的A32克隆(GenBank登录号为B1173978)；侵染后10天的B12克隆(GenBank登录号为B1173979)、B71克隆(GenBank登录号为B1173980)；侵染后15天的Cll克隆(GenBank登录号为B1173981)、CPl2(GenBank登录号为B1173982)克隆和CP32克隆(GenBank登录号为B1173983)。序列的同源比较表明，6个cDNA均与Shoemaker构建的大豆基因表达库中的cDNA序列有非常高的同源性，证明这些cDNA是大豆基因表达的产物。其中A32克隆的序列与控制拟南芥下胚轴生长的MYB转录因子、营养元素缺失诱导的番茄根的表达文库中的一个cDNA及番茄抗假单胞杆菌表达文库中的一个cDNA有较高的同源性。 相似文献
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PCR技术及实用方法 总被引：50，自引：16，他引：50
本文系统介绍了PCR技术的原理，反应组分、反应程序及PCR产物的电泳检测方法。这些实用的：PCR方法大都来源于国内外一些著名的实验室并经海南省农作物分子育种重点实验室改进而成。这些方法作为分子植物育种实验室的技术平台具有非常好的实用性，能满足常规的分子生物学及生物工程技术研究的要求。 相似文献
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基因表达文库构建和筛选技术是80年代初发展起来的用于筛选和克隆基因的基本手段。表达文库中含有大量基因表达信息，使其成为广大实验室优先建立的文库之一。迄今为止，表达文库的构建方法在传统方法的基础上不断被改善，针对各种类型的目的基因克隆的要求，可以选择不同的载体和方法来构建适当的基因表达文库。本文详细介绍了多种构建基因表达文库的方法，比较它们的构建方法的优点和不足之处，并对它们在实际应用中的作用作了较为全面的分析。 相似文献
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大豆孢囊线虫与寄主植物的相互关系及抗性基因克隆策略 总被引：2，自引：3，他引：2
本文概述了大豆孢囊线虫与寄主植物相互作用过程中病原与寄主的相互识别，寄主植物的防御反应的分子机理，提出了克隆大豆孢囊线虫抗性基因的分子策略。 相似文献
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籼型光敏核不育水稻Hs—1可育和不育幼穗mRNA差异表达分析 总被引：8，自引：1，他引：8
本研究利用DD－PCR技术分析了光酶核不育籼稻Hs-1可育和不育幼穗mRNA的表达差异，结果表明：在148个DD－PCR反应中，10个反应可扩增出有差异且可重复的cDNA片段，其中4个反应可扩增出1－4条差异片段，6个反应可护增出4个以上的差异片段，且这些差异处段可只出现在可育幼穗中或同时出现在可育和不育幼穗中，共获得43个差异cDNA片段，其中21个可能与光敏核不育性相关，本研究认为，寻找光敏核不育基因在可育和不育条件下差异表达的起始发育时期是从mRNA水平分离这一基因的关键。光敏核不育基因的表达可能会引起其它一些mRNA的合成，从而产生较多的差异片段，进一步鉴定这些差异片段与不育的关系十分重要。 相似文献
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一张含有227个SSR标记的大豆遗传连锁图 总被引：12，自引：0，他引：12
利用由大豆主栽种晋豆23和农家种灰布支(ZDD2315)杂交培育的F10代大豆重组自交系群体Jinf,共474个家系作为作图群体。依据1999年Cregan等发表的大豆“公共图谱”,选用441对SSR引物,建成了含有227个SSR座位的大豆SSR连锁图,该图覆盖大豆基因组1900cM,两个相邻标记的平均间距为8．3cM,归属于20个大豆连锁群,与Song等2004年发表的公共图谱相比,所有标记都被定位于相同的连锁群,且排列顺序大致相同,具有很好的线性关系。 相似文献
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基因表达文库构建和筛选技术是80年代初发展起来的用于筛选和克隆基因的基本手段.表达文库中含有大量基因表达信息, 使其成为广大实验室优先建立的文库之一. 迄今为止, 表达文库的构建方法在传统方法的基础上不断被改善, 针对各种类型的目的基因克隆的要求,可以选择不同的载体和方法来构建适当的基因表达文库.本文详细介绍了多种构建基因表达文库的方法,比较它们的构建方法的优点和不足之处,并对它们在实际应用中的作用作了较为全面的分析. 相似文献
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用AFLP标记饱和大豆SSR遗传连锁图 总被引：5，自引：0，他引：5
本研究将52个AFLP标记整合到由宛煜嵩等(2005)构建的含有227个SSR标记的大豆遗传连锁图上,绘制成一张基于SSR-AFLP标记的大豆遗传连锁图,总遗传图距为2512cM,相邻标记间的平均距离为9．0cM。AFLP标记的整合使得图谱的总图距增长了32％。在Dla、E、F、G、K连锁群上,AFLP标记主要整合在连锁群的末端,其中G连锁群尤为明显,末端增加了19个AFLP标记,使得G连锁群的长度由原来的121．2cM增加到259．1cM,相邻标记间的平均距离由原来的7．129cM变为7．197cM;在．A2、B1、C2、D2、H、J、L、N、O连锁群,由于加入了AFLP标记使得这些连锁群的标记密度有所增加,改善了标记分布的均匀性。A2连锁群上添加了1个AFLP标记,消除了1个间隙;D2连锁群上添加了2个AFLP标记,提高了原来的一个超过40cM的区间(Satt301和Satt186)标记密度;J连锁群上添加了2个．AFLP标记,消除了2个间隙。AFLP标记整合后,大多数连锁群上的SSR标记的顺序和遗传图距几乎与宛煜嵩等(2005)构建的大豆遗传连锁图上的顺序和图距一致,只有M、N和O3个连锁群上的SSR标记顺序发生了一些变化,如M连锁群上的Satt590、Satt20l和Sattl50及O连锁群上的Satt241和Satt479发生换位;N连锁群上的几个SSR标记的位置发生随机换位。我们认为构建一张理想的遗传图谱,需要来源于不同遗传背景的多种群体、多种类型的遗传标记配合。AFLP标记并非是遗传连锁图构建中常见的大区间、间隙及标记成簇分布等问题的完全解决方案,且认为AFLP标记是构建高密度的遗传连锁图的理想分子标记的看法也值得商榷。 相似文献
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