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大麦黄矮病毒(BYDV) cDNA的合成、克隆及初步应用 总被引:6,自引:0,他引:6
以大麦黄矮病毒二叉蚜和麦长管蚜专化株的病毒核酸为模板,以小牛胸腺DNA为引物,合成cDNA的第一条链,再用缺口翻译法合成第二条链,然后采用加装BamH1人工接头的方法将ds-cDNA插入到质粒载体pUC8中,重组质粒于大肠杆菌JM—83中进行克隆,以克隆的颜色变化选择含有外源DNA的克隆,再用病毒核酸制备的探针筛选真正病毒cDNA插入的克隆。重组质粒中ds-DNA的插入长度在300—1600bp之间。用缺口翻译法制备质粒DNA分子探针检测同源病毒液,反应灵敏度在100pg-1ng之间。应用cDNA探针检测不同病毒和病毒株系,从中筛选出黄矮病毒株系专化克隆系,黄矮病毒专化克隆系和黄矮病毒组专化克隆系. 相似文献
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我国不同地区小麦梭条斑花叶病毒的比较鉴定 总被引:4,自引:2,他引:4
河南、四川、陕西、江苏、浙江等地发生的小麦土传病毒经SDS-琼脂双散扩及间接ELISA法测定,在血清学上是强相关的,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳测定其外壳蛋白分子量均为36.6kd.以上比较研究结果,结合已有的研究资料,初步澄清了我国豫、川、陕、江浙等地发生的小麦土传病毒为小麦梭条斑花叶病毒。 相似文献
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应用基因工程创造抗黄矮病毒转基因小麦新种质 总被引:5,自引:0,他引:5
应用花粉管通道法和基因枪法将大麦黄矮病毒GPV株系外壳蛋白基因导入小麦栽培品种,获得了抗大麦黄矮病毒GPV株系的转基因小麦株系(文献检索证明世界上无任何其它抗病毒转基因小麦报道)。转基因植株经PCR、Southern检测,证明CP基因可稳定遗传到T3代;经Western测定,证明CP基因在转基因小麦中已经得到表达;经带毒蚜温室和田间人工接种试验,获得了一些抗病性明显的后代,并得到了ELISA验证 相似文献
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用 ELISA 法鉴定了小麦近缘种赖草属(Leymus)、披碱草属(Elymus)、鹅冠草属(Roegneria)3个属的21个种,其中17个种抗 BYDV。21145份小麦品种中筛选到症状轻、病毒含量高的耐病品种忻县冬麦、江西早等29份。3604份大麦品种中筛选到症状轻、病毒含量低的抗病品种C13208、小麦近缘种(Agropyronintemedium)和普通小麦杂交的异源八倍体中4无芒,中5,远中7,陇远45、46,远中1001,忻4079以及附加系 L1。现已获得抗 BYDV 的以中4无芒、L1为亲本的杂交后代。 相似文献
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