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高DBT降解力脱硫菌株的脱硫条件优化 总被引：1，自引：1，他引：0
本课题是从大庆油田土壤中分离得到一株专一性脱硫菌株HDBS-1,经鉴定,该菌种属为坂崎肠杆菌（Enterobacter sakazakii）,通过诱变筛选得到了一株脱硫能力最高的菌株HDBS-4。该微生物可以按照特异性脱硫途径将DBT转化为2-HBP（2-羟基联苯）。为提高脱硫力,本试验对HDBS-4的脱硫条件及培养基进行了优化。最终确定20mL/250mL为装液量,按6%接种量, 转速为300r/min,于30℃连续培养5d。当在上述最优脱硫条件下培养时,发酵液中2-HBP生成量可达6.1105mg/L,较优化前提高了2倍多,较原始菌株提高了12倍多。 相似文献
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米曲霉HDF-7固定化菌体发酵产蛋白酶条件的优化 总被引：1，自引：1，他引：0
为了在工业化生产豆酱的过程中,缩短发酵周期,提高原料利用率,并降低生产成本,保证产品质量,利用从传统豆酱中分离得到的米曲霉(Aspergilleas oryzae)HDF-7作为出发菌株,经过海藻酸钠包埋法固定后,对其最佳固定化菌球的发酵产蛋白酶条件进行了优化。结果表明,固定化菌球以3%的接种量接入到中性蛋白酶发酵培养液中增殖至168 h后,其蛋白酶酶活力最高,为18.49±0.65 U/mL,利用该增殖菌球单批次发酵到24 h时,其蛋白酶活力表现最高。并可以重复分批发酵7次而蛋白酶活力保持不变。本研究通过固定化米曲霉(Aspergilleas oryzae)HDF-7菌体并优化其发酵生产蛋白酶的条件,可以缩短发酵时间,提高菌体的利用效率,并保持酶活稳定。该研究为蛋白酶的规模化生产提供了试验基础。 相似文献
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昆虫细胞中表达eGFP基因的重组杆状病毒的构建 总被引：1，自引：1，他引：0
为构建表达增强型绿色荧光蛋白(eGFP)融合蛋白的昆虫杆状病毒转移载体。利用Sf-9细胞表达eGFP,用PCR法从重组Bacmid和pEGFP-C3质粒中扩增gp64SP、eGFP和VSVGED片段,利用一步法SOE-PCR将3个片段连接在一起。用Xba I和Hind III酶切融合片段与pFastBac PH,连接获得阳性质粒命名为pFB/LM-PH。转化E.coli DH10Bac,通过转座子Tn7的介导,获得重组杆状病毒Bv-LM-PH,感染Sf9昆虫细胞。结果表明：通过倒置荧光显微镜观察细胞形态及荧光表达情况,结果证实：感染的Sf9细胞可表达外源基因eGFP。重组pFB/LM-PH载体具备表达eGFP的能力,为分子生物学研究提供了一种新型可表达eGFP融合蛋白的昆虫杆状病毒表达载体。 相似文献
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