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布鲁氏菌检测技术的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
布鲁氏菌病是一种人畜共患的传染病.目前,在世界范围内流行较广的是:羊布鲁氏菌(B.melitensis),主要引起绵羊、羊及人的布鲁氏菌病;牛布氏杆菌(B.abortus),主要引起牛的布鲁氏菌病;猪布鲁氏菌(B.suis),主要引起猪的布鲁氏菌病.被感染的动物主要表现流产和不孕不育症状,此病已经使世界各国遭受了巨大的经济损失,更重要的是布鲁氏菌能引起人的感染发病,威胁着公众健康,被一些西方国家列为生物战剂之一.所以对布鲁氏菌的检测一直受到世界各国科学家的关注. 相似文献
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[目的]用B.melitensis16M提纯的LPS和O链抗原作为检测抗原,研制出针对B.melitensis16M的单克隆抗体(McAb),将其标记胶体金,建立一种诊断布病的胶体金免疫层析方法。[方法]B.melitensis16M全菌免疫Balb/C小鼠,采用杂交瘤细胞技术制备McAb,测定免疫球蛋白亚类及亲和力。用HiTrapProteinGHP亲和层析纯化抗体并用胶体金标记,建立胶体金免疫层析方法。选择最佳反应模式组装成试纸条,对其特异性、敏感性、稳定性、阳性病料试验。[结果]筛选出能稳定分泌抗B.melitensis16M的种特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株2D10、3C6、1E10,单抗亚类分别为IgG2a、IgG1,亲和常数(k)介于1×10-8 ̄2.6×10-10。根据配对实验,以3C6为最佳包被抗体,2D10为最佳金标抗体。抗体IgG标记浓度为30μg/ml时,检测效果最佳。同时,与B.melitensis16M多抗IgG作为包被抗体、2D10为金标抗体的检测体系对比,两种包被方法组装的试纸条最低检出量为5.0×103CFU/ml,且不与其它菌发生交叉反应,保持期≥100d。以荧光定量PCR为参照,试纸条检测80份阳性病料,检检出率为100%。[结论]建立的胶体金免疫层析方法检测B.melitensis16M快速、简便、可靠,有望开发成为布病快速诊断试剂盒。 相似文献
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目的 用B.melitensis 16M提纯的LPS和O链抗原作为检测抗原,研制出针对B.melitensis 16M的单克隆抗体(McAb),将其标记胶体金,建立一种诊断布病的胶体金免疫层析方法。方法 B.melitensis 16M全菌免疫Balb/C小鼠,采用杂交瘤细胞技术制备McAb,测定免疫球蛋白亚类及亲和力。用HiTrap Protein G HP亲和层析纯化抗体并用胶体金标记,建立胶体金免疫层析方法。选择最佳反应模式组装成试纸条,对其特异性、敏感性、稳定性、阳性病料试验。结果 筛选出能稳定分泌抗B.melitensis 16M的种特异性单克隆抗体杂交瘤细胞株2D10、3C6、1E10,单抗亚类分别为IgG2a、IgG1,亲和常数(k)介于1×10-8~2.6×10-10。根据配对实验,以3C6为最佳包被抗体,2D10为最佳金标抗体。抗体IgG标记浓度为30μg/ml时,检测效果最佳。同时,与B.melitensis 16M多抗IgG作为包被抗体、2D10为金标抗体的检测体系对比,两种包被方法组装的试纸条最低检出量为5.0×103CFU/ml,且不与其它菌发生交叉反应,保持期≥100d。以荧光定量PCR为参照,试纸条检测80份阳性病料,检检出率为100%。结论 建立的胶体金免疫层析方法检测B.melitensis 16M快速、简便、可靠,有望开发成为布病快速诊断试剂盒。 相似文献
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禽螺旋体病是一种以波斯锐缘蜱(A.persicus)和鸡刺皮螨(D.gallinage)传播、由螺旋体科的鹅包柔氏螺旋体(Boneliaanserina)引起的鸡、火鸡、鸭、鹅败血性传染病,该病最初于1891年在前苏联外高加索地区的鸡群发现,接着迅速在世界各地发现此病。我国首次发现此病是1983年在新疆石河子地区,之后相继在甘肃、内蒙、山西、吉林等地有报道。鹅发生该病报道很少,2005年8月内蒙古通辽市一养鹅户暴发了疑似鹅螺旋体病,现将诊疗情况报告如下。 相似文献
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牛布鲁菌O链A抗原的提纯鉴定及种特异性单克隆抗体的研制 总被引:1,自引:0,他引:1
应用热酚法提纯牛布鲁菌544A的O链,经Sephades G-50纯化后,琼脂糖凝胶免疫扩散和SDS聚丙烯酰胺凝胶进行电泳鉴定,用牛布鲁菌544A株全菌体免疫BALB/c小鼠,用纯化的O链筛选出4株针对O链表面A抗原的种特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株4B8、1C9、1G9和1E2,4株单克隆抗体均不与羊布鲁菌16 M、大肠杆菌O157、小肠结肠炎耶尔森菌O9、鼠伤寒沙门菌、放线杆菌发生交叉反应,具有高特异性,其中4B8的亲和常数达到了8.99×108M-1,适合用于鉴定牛种布鲁菌的研究。 相似文献
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布鲁氏菌表面抗原研究进展 总被引:5,自引:2,他引:3
布鲁氏菌表面最主要的抗原是脂多糖(LPS)和外膜蛋白(OMPs),R-LPS是R型布鲁氏菌主要的表面抗原,S型布鲁氏菌的S-LPS已被证明是一个主要的毒力因子,它的O链部分含有布鲁氏菌表面绝大多数的抗原位点,是一个很重要的保护性抗原;OMPs被认为是布鲁氏菌表面潜在的抗原结构,在光滑型布鲁氏菌表面,由于OMPs受到了LPS-O链的干扰,致使它的抗原性没有充分地表现出来,但在绵羊布鲁氏菌表面却出现了不同的情况。未来几年,对OMPs的研究将成为该领域的热点,尤其是对Omp25突变体的研究。 相似文献
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布鲁氏菌病是一种人畜共患的传染病。目前,在世界范围内流行较广的是:羊布鲁氏菌(B.melitensis),主要引起绵羊、羊及人的布鲁氏菌病;牛布氏杆菌(B.abortus),主要引起牛的布鲁氏菌病;猪布鲁氏菌(B.suis),主要引起猪的布鲁氏菌病。被感染的动物主要表现流产和不孕不育症状,此病已 相似文献
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根据现场布置和设计图纸,进行电气施工布线方案制定,内容涉及到预埋管、电线电缆管的铺设以及设备安装等;做好单位预算,总体布置的数量以及综合布线的数量等;同时做好材料、人力以及设备工具的周转与安排,做到"高速度、高质量、高效益"。 相似文献
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