过表达ZmIBH1-1提高玉米苗期抗旱性     

朱芳芳  董亚辉  任真真  王志勇  苏慧慧  库丽霞  陈彦惠 《中国农业科学》2021,54(21):4500-4513

【目的】干旱是严重影响玉米生长发育进程的一个重要因素。挖掘玉米抗旱相关基因,通过转基因功能验证和转录组分析,解析关键基因在响应干旱胁迫过程中的分子调控机制,为抗旱分子育种和遗传改良提供理论依据。【方法】以玉米自交系B104（WT）为背景材料,利用农杆菌介导方法构建过表达ZmIBH1-1转基因株系（ZmIBH1-1-OE）;通过对转基因植株进行草铵膦抗性筛选、标记基因和目的基因PCR检测,以及运用实时荧光定量PCR检测目的基因的表达情况,鉴定阳性植株和株系;以WT和ZmIBH1-1-OE转基因株系为材料,通过干旱处理（20% PEG6000）,进行表型鉴定和耐旱生理生化指标测定,验证ZmIBH1-1的抗旱功能;通过对干旱胁迫下玉米4叶期转录组的比较分析,鉴定出差异表达的基因（differentially expressed genes,DEGs）;结合DAP-seq（DNA affinity purification sequencing）分析,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的下游靶基因,利用基因组可视化软件IGV（integrative genomics viewer）分析ZmIBH1-1蛋白结合候选靶基因的位置,然后通过Dual-Luciferase试验验证ZmIBH1-1蛋白与靶基因的调控关系。【结果】通过玉米遗传转化获得12个转化事件;T₃代中,能同时检测到标记基因Bar和目的基因ZmIBH1-1的植株有458个,实时荧光定量PCR检测结果表明,ZmIBH1-1-OE中ZmIBH1-1的表达量显著高于WT,株系3和株系8表达量最高,将其自交获得T₄代转基因株系用于后续试验。在干旱胁迫条件下,ZmIBH1-1-OE株系存活率、叶片相对含水量、叶绿素含量、可溶性蛋白含量及其生理生化指标（超氧化物歧化酶、过氧化物酶、过氧化氢酶活性）均显著高于WT,说明玉米中过量表达ZmIBH1-1赋予玉米更高的耐旱性。转录组分析结果表明,WT与ZmIBH1-1-OE株系在干旱胁迫下有1 214个差异表达基因;Gene Ontology（GO）功能富集分析结果表明,差异表达基因主要涉及生物过程、细胞组分和分子功能,如在生物过程中主要涉及到光合作用、应激响应、脱水响应等;KEGG富集分析表明,差异表达基因主要参与植物激素信号传导、新陈代谢等过程。结合转录组显著差异表达基因和DAP-Seq分析所得到ZmIBH1-1蛋白的靶基因,初步确定ZmIBH1-1蛋白直接调控与抗旱相关的11个候选靶基因,包括2个钙信号相关基因、3个半胱氨酸代谢相关基因、1个bHLH转录因子、1个应激响应蛋白、1个谷胱甘肽转移酶、1个氧化还原过程蛋白和2个乙烯响应因子;基因组可视化结果显示ZmIBH1-1蛋白可以结合靶基因启动子区;随后通过Dual-Luciferase试验进一步表明,ZmIBH1-1蛋白可以直接作用于11个候选靶基因,其中,ZmIBH1-1蛋白可以促进ZmCa-M、ZmSYCO、ZmbHLH54、ZmGlu-r1、ZmCLPB3和ZmP450-99A2的表达,抑制ZmAGD12、ZmCYS、ZmCYSB、ZmERF-107和ZmEIN3的表达。此外,在干旱胁迫下NAC、WRKY、MYB等转录因子在ZmIBH1-1-OE和WT株系中也存在差异表达。【结论】ZmIBH1-1的过表达可以增强玉米苗期的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控乙烯信号通路中的ZmERF-107和ZmEIN3的表达提高玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白通过直接调控钙信号相关基因ZmCa-M和ZmAGD12增强玉米的耐旱性;ZmIBH1-1蛋白可能通过间接调控NAC、WRKY、MYB等转录因子响应干旱胁迫。  相似文献   

湖南省湘西自治州动物疫病预防控制机构发展现状及建议     

王成 《中国动物检疫》2021,38(9):53-56

为了解湖南省湘西自治州动物疫病预防控制机构发展现状,采用实地走访及问卷调查方式收集数据,对兽医实验室相关人员、主要动物疫病监测经费投入、实验室检测量等情况进行分析,发现湘西州动物疫病预防控制机构存在业务工作衔接不顺畅、专业技术人员缺乏、经费不足、生物安全体系有待完善等问题。针对存在的问题,结合当地实际对湘西州动物疫病预防控制机构的建设、管理等提出了建议,以期为动物疫病预防控制机构的改革发展提供参考。  相似文献   

城市花粉、飞絮飞毛等植源性污染特征及其防治   总被引：1，自引：0，他引：1  

王成 《中国城市林业》2018,(1)

近年来植物产生的花粉过敏、飞毛飞絮等植源性污染问题日益突出,给城市环境、居民生产生活和身体健康带来不利影响。文章依据前期对北京、成都、合肥、广州等城市开展的调查,以及北京主要树木、草本植物花粉飘散规律的观测研究成果,对花粉、飞毛飞絮、气味等几种常见的植源性污染的基本特征、影响因素进行了系统总结,分析了北京近年来飞絮污染问题突出的原因,并在此基础上,从树种选择、群落配置、绿地管理、应急处理、预测预报、科学研究等方面提出了20条植源性污染防治对策。  相似文献   

中兽医五行归类土行脉象季节新论（中）     

王成 《四川畜牧兽医》2001,28(7):52-52

（接上期） “代”作“软而弱”讲，首见《素问》现在通行全本《重广补注黄帝内经素问》（唐·王冰次注）“脾脉代”之注，《素问直解》（清·高世 ）、《内经选读》（全国高等医药院校试用教材，北京中医学院主编，上海科技出版社1978年12月）、《黄帝内经素问译释》（南京中医学院医经教研组编，上海科技出版社第二版1981年11月）等书也引用了王冰注文，此注是否与“长夏胃微 （同软）弱曰平（《平人气象论篇》）”之义相关，待考。 为什么说“软而弱”是“脾脉濡”的来源呢？这可能起自“濡”即“软”的解释。《脉决汇辩》（清·李延 ）…  相似文献   

红松与色赤杨混交林改土效果显著     

王玉江  初晓丽 《新农业》2009,(11):47-47

红松阔叶混交林是长白植物区系顶级群落，由于长期受到人为采伐等非自然因素的干扰，现存量极少，代之形成了大面积红松、落叶松纯林和生产力低下的杂木林。红松人工纯林由于树种单一，导致林分的土壤肥力逐年下降。近年来，通过营造阔叶红松混交林、人工诱导阔叶红松林等措施，培育了大面积红松阔叶混交林，其中色赤杨与红松混交林是较为成功的一种混交林分，现将草河口地区红松与色赤杨混交林改土效果总结如下。  相似文献   

一年六茬蔬菜栽培法     

张玉玲  王成 《农民致富之友》2009,(7)

一、品种选择越冬甘蓝宜选用京丰1号,越冬菠菜选用尖叶菠菜,春黄瓜选用津研4号、津春4号,夏白菜选用夏阳50等,早秋萝卜选用中秋红.  相似文献   

拖拉机维护保养及常见故障的排除     

李云霞  张书丽 《农民致富之友》2009,(18)

拖拉机是大家非常熟悉的农用机械,我国也是拖拉机的使用大国.然而近几年来.拖拉机使用故障频繁发生,严重影响了拖拉机的寿命,阻碍了农村经济的发展为使拖拉机经常处于良好的技术状态,必须设法防止和减少故障的发生.除坚持按照使用说明书的规定维护保养外,在农闲时期的保养与维护也是预防拖拉机发生故障的重要措施之一.  相似文献   

商品虾的运输技术     

杨朱森  周丽彬 《农村实用科技》2004,(1):39-39

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长白山区植物区系特点     

杨野  牛丽君 《长白山自然保护》1996,(1):14-17

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赴鄂尔多斯市、巴彦淖尔盟等地学习治沙工作的考察学习报告     

李亚荣  边丽琴 《内蒙古草业》2005,17(1):19-21

通过对毛乌素沙地，库布齐沙漠，穿沙公路，城防林建设，麻黄基地和治沙新技术及发展沙产业的学习考察，体会到：改善生态环境必须按照自然规律和经济规律进行统筹规划，分步实施。要处理好眼前利益和长远利益，局部利益与全局利益的关系，处理好治理、保护、利用的关系，处理好建设与管理的关系，以充分调动社会各方面参与生态建设的积极性，伊盟在治沙方面的一些做法和经验是值得我们学习借鉴的。  相似文献