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通过分子生物学方法,克隆得到锯缘青蟹（Scylla serrata）精氨酸激酶（Arginine Kinase,AK）开放阅读框基因序列.测序结果显示：该开放阅读框基因的序列长度为1 071 bp,编码356个氨基酸残基;该序列登录Genbank（GQ：851626）,序列比对结果显示,锯缘青蟹精氨酸激酶与凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）精氨酸激酶的氨基酸序列同源性高达94%,与岸蟹（Carcinus maenas）、中华绒鳌蟹（Eriocheir sinensis）等甲壳类动物的精氨酸激酶也有较高的同源性,均高于90%;将克隆得到的锯缘青蟹精氨酸激酶基因与pGEX-4T-3载体连接,转化大肠杆菌BL21,经IPTG诱导得到分子质量为65 ku的融合表达蛋白（GST-AK）,经兔抗锯缘青蟹精氨酸激酶多克隆抗体的免疫印迹分析证实,GST-AK具有抗原性. 相似文献
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本文依据《NY525—2012有机肥料》标准,选取以芝麻饼渣和牛粪为原料的2种有机肥料,测定2种有机肥料的pH值、电导率、水分含量、有机质(TOC)、C、N、C/N、P、Ca、K、Mg、Zn、Mn及重金属Pb、Ni、Cd、Hg、Cr(VI)等理化指标。通过对比2种有机肥料的理化指标发现,芝麻饼肥中有机质与营养元素的含量比牛粪肥高,肥力更好,施以较少的量就可以满足植物生长所需要的营养。但芝麻饼肥的pH值为9. 19,明显呈碱性,超过有机肥料pH5. 5～8. 0的范围标准,同时芝麻饼肥中的重金属含量高于牛粪肥,因此在碱性土壤中施用芝麻饼肥时一定要注意平衡pH值,控制施用量,避免重金属污染和土壤酸碱化。 相似文献
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日本鳗鲡胶原蛋白和小清蛋白的过敏原性 总被引：2，自引：0，他引：2
以日本鳗鲡皮与肌肉组织为研究对象,采用碱溶、酸溶、盐析、冻干等方法纯化得到胶原蛋白,采用加热、饱和硫酸铵分级盐析、DEAE-Sepharose阴离子交换层析等方法纯化得到两种亚型的小清蛋白(PV-Ⅰ和PV-Ⅱ),纯化的目标蛋白经动物特异性抗体的免疫印迹实验确证。酶联免疫吸附测定和免疫印迹分析结果显示,纯化的胶原蛋白和小清蛋白分别与鱼类过敏患者阳性血清发生特异性反应,且二者之间无免疫交叉反应。体外模拟胃液消化实验和SDS-PAGE分析结果显示,胶原蛋白和小清蛋白均具有较高的消化稳定性。结果提示,日本鳗胶原蛋白和小清蛋白具有较高的消化稳定性和免疫原性,二者可引发不同患者的IgE介导特异性超敏反应。 相似文献
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鲫和鳜主要过敏原小清蛋白的基因克隆及序列分析 总被引：1，自引：0，他引：1
小清蛋白(parvalbumin, PV)是鱼类的主要过敏原, 为分析淡水鱼PV的序列及结构特征,采用RT-PCR方法, 从鲫和鳜肌肉中分别克隆得到2种小清蛋白的基因序列。生物信息学分析结果显示, 4种基因的序列长度均为330 bp, 编码109个氨基酸残基, 推导分子量在11.6 ku左右, 等电点为4.45~4.69。氨基酸序列分析表明, 克隆得到的这4种PV序列均含有丙氨酸-14、亮氨酸-16、半胱氨酸-19、苯丙氨酸-67、谷氨酰胺-69以及苏氨酸-79等β型PV特征性残基序列, 表明克隆的目的基因均为β型PV。鲫的2种PV序列相似性为80.73 %, 鳜的2种PV的序列相似性为83.49 %。对克隆得到的PV序列进行空间结构分析显示, 这4种PV序列均含有3个螺旋-松弛-螺旋结构, 即EF-手型结构, 其中靠近C端功能域的两个手型结构为Ca2﹢结合位点。 相似文献
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嗜热真菌对蘑菇促生机制的研究 总被引：2，自引：0，他引：2
嗜热真菌是蘑菇堆肥二次发酵后培养阶段的主要微生物类群。它们在堆肥中的数量及活性与蘑菇的产量有很大的相关性。本文综述了近年来，国外以嗜热色串孢（Ｓｃｙｔａｌｉｄｉｕｍｔｈｅｒｍｏｐｈｉｌｕｍ）为典型种，研究其对蘑菇菌丝促生作用的生物机制的主要成果，国外主要研究了嗜热色串孢在堆肥中的分布、数量，生长动力学特性以及呼吸机制等，同时发现嗜热色串孢的呼吸作用形成适宜的ＣＯ２浓度可使得蘑菇菌丝尽早占料，获取生态优势，本文还介绍了国内有关嗜热真菌的研究及应用。 相似文献
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俺叫苏文金,今年54岁,家住太行山腰的河南省沁阳市西万镇校尉营村,干村电工已整整30个年头了.说老实话,俺当初并没有想到干电工.1965年俺从部队转业回来,正赶上村里掀起办电热潮.有一天晚上,村支书到家里找俺说: 相似文献
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试验通过考察不同添加比例的复合L-色氨酸发酵微生态制剂对土鸡生长性能和非特异性免疫的影响,验证了复合L-色氨酸发酵微生态制剂具有降低土鸡料肉比、提高非特异性免疫、促进肠道益生菌生长等生理作用,也为该制剂日后在生产实践中粗蛋白、纤维素等相关比例的调整提供了依据。通过相关指标的比较,确定添加5%制剂的混合日粮为最佳配方,能有效平衡日粮中的氨基酸、显著降低土鸡的料肉比(27日龄时,B、C、D 3组料肉比分别比对照组下降了19.4%、16.1%和15.5%)、提高非特异性免疫活性(3个试验组溶菌酶和免疫器官指数的下降程度均小于对照组)、有效促进肠道益生菌的生长(17 d2、7 d试验组B、C、D 3组的肠道和粪便中的大肠杆菌数均显著低于对照组,而乳酸杆菌数显著高于对照组),满足了微生态制剂对于提高生长性能、提高经济效益的基本要求。 相似文献
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鲢鱼骨骼肌过敏原小清蛋白的分离纯化及多克隆抗体制备与应用 总被引：1，自引：0，他引：1
小清蛋白是鱼类的主要过敏原,对该蛋白的研究不仅有利于过敏原检测方法的建立也可为低致敏性水产品的开发提供理论依据。通过组织捣碎、冷冻离心、热处理、Superdex75凝胶过滤等方法从鲢白色肉中纯化得到过敏原小清蛋白。Tricine-SDS-PAGE显示,在非还原条件下,该蛋白呈分子量分别为12ku、14ku、24ku的3个条带。而在还原条件下,仅有分子量为12ku的条带。Western-blotting分析表明,分子量为12ku、14ku和24ku的这3个条带都与小鼠抗蛙小清蛋白单克隆抗体(PARV-19)发生特异性反应,提示它们均为小清蛋白的不同形态。用纯化的小清蛋白制备多克隆抗体,经Protein A Sepharose亲和层析纯化得到高纯度的免疫球蛋白G(IgG)。Dot-blot检测发现,抗体稀释至1/51200时仍能与纯化的小清蛋白有显色反应。用制备的多克隆抗体进行Western-blotting分析,能特异地检测4种鱼(鲤、鲢、鲫、黄鳍鲷)中的小清蛋白。 相似文献
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蟹类原肌球蛋白基因的克隆与表达 总被引：4，自引：0，他引：4
原肌球蛋白是甲壳类动物的主要过敏原之一。本文通过分子生物学技术方法,分别克隆得到锯缘青蟹(Scylla serrata)、中华绒鳌蟹(Eriocheir sinensis)和三疣梭子蟹(Portunus trituberculatus)的原肌球蛋白基因序列。测序结果表明,三个基因的序列长度均为855 bp,编码284个氨基酸残基,三者氨基酸序列同源性为99.3%。三种蟹的原肌球蛋白基因序列与GenBank中其他甲壳类动物的原肌球蛋白具有很高的同源性。将锯缘青蟹的原肌球蛋白基因与pGEX-4T-3载体连接后,经IPTG诱导得到分子量约为61 kDa的融合表达蛋白。通过与甲壳类过敏患者血清的免疫印迹反应,证实融合表达的原肌球蛋白具有过敏原性,表明原肌球蛋白是蟹类的主要过敏原之一。该融合蛋白有望用于甲壳类食物过敏诊断试剂的开发与应用。 相似文献
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通过硫酸铵盐析、DEAE-Sepharose、Phenyl-Sepharose、Hydroxyapatite、Superdex75等方法,从南美白对虾消化腺中分离得到一种丝氨酸蛋白酶.SDS-PAGE结果显示,其分子质量约为28ku,最适pH值与最适温度分别为9.0和40℃,且pH值在7.0～10.0之间以及温度在40℃以下有较高的稳定性.底物特异性实验与抑制剂实验结果表明,该酶属于类胰蛋白酶的丝氨酸蛋白酶.动力学实验显示,以Boc-Phe-Ser-Arg-MCA为底物时,Km=0.69μmol/L,Kcat=0.33S-1,Kcat/Km=4.78×105（mol/L）-1S-1. 相似文献