大豆PLMT基因的克隆及在盐、碱胁迫下的表达分析     

王爽  徐华祥  张加凡  李红丽  袁学顺  崔喜艳 《分子植物育种》2018,(15)

为了探明GmPLMT在大豆盐、碱胁迫中的作用及变化趋势,本研究从吉育72号大豆中克隆了GmPLMT基因的cDNA,设置3种不同NaCl、NaOH条件对大豆进行胁迫,分别处理24 h、48 h、72 h、96 h,复水处理24 h,以未处理的大豆材料为对照,测定大豆叶片GmPLMT的相对表达。实验结果表明:成功克隆GmPLMT全长627 bp c DNA序列,包含完整504 bp ORF阅读框;经NaCl、NaOH胁迫处理后,GmPLMT的表达水平均明显增加,经50 mmol/L NaOH胁迫处理96 h并复水处理24 h后,GmPLMT相对表达水平达到最大值0.223 1,是对照的1.13倍。磷脂酰胆碱是植物生长发育的重要代谢物,也是植物细胞膜主要脂质组分。大豆磷脂酰甲基转移酶(GmPLMT)是卵磷脂合成的关键酶,有研究表明PLMT与植物的盐、碱胁迫有关,为大豆GmPLMT功能的深入研究提供理论帮助。  相似文献   

大豆GmAAP 基因的克隆、生物信息学分析及亚细胞定位     

王俊皓  谢五洋  徐华祥  袁学顺  周莹  崔喜艳 《中国油料作物学报》2019,41(5):705

本研究以大豆Williams 82为实验材料，采用RT-PCR技术克隆到了GmAAP 基因，其开放阅读框长度为1440 bp，编码479个氨基酸。生物信息学分析表明，GmAAP蛋白分子量为53.286 kD，理论等电点为8.93，不稳定指数为34.04，属于稳定的蛋白结构；其二级结构中α-螺旋、β-折叠、β-转角、无规卷曲分别占据47.18%、15.66%、2.71%、34.45%；跨膜区与疏水性分析显示其含有10个跨膜区，且构成跨膜区的氨基酸多为疏水性氨基酸；GmAAP与野生大豆AAP6亲缘关系最为相近，且序列比对的一致性为100%，可能为大豆AAP6 基因。构建融合表达载体，利用PEG-Ca2+介导法转化拟南芥原生质体进行亚细胞定位分析，结果显示GmAAP定位在质膜上。AAP能提高豆科植物对外源氮的吸收与利用率，进而增加种子内贮藏蛋白含量，提升大豆品质。本研究的结果可为GmAAP 功能 的进一步研究奠定基础，同时也为氮素的高效利用提供候选基因。  相似文献