tTS真核表达载体构建及稳定转染HepG2细胞系的建立     

帅丽芳  赵勇  张若霜  银涛  唐博恒 《山西农业大学学报(自然科学版)》2010,30(4)

为了构建tTS真核表达载体,转染HepG2细胞,建立稳定转染的HepG2细胞系,采用PCR方法,以质粒pTet-tTS为模板扩增tTS基因的编码区序列,利用DNA重组技术将其定向插入到真核表达载体pApoE-rtTA-Neo,经酶切和测序鉴定后,用脂质体转染法转染HepG2细胞,通过G418筛选,建立稳定转染的HepG2细胞系,用RT-PCR、Western blot法检年测tTS的表达,成功构建了pApoE-rtTA-tTS-Neo真核表达载体,并建立了稳定转染的HepG2细胞系,成功地表达目的基因。真核表达载体成功构建和稳定转染HepG2细胞系的建立为进一步研究tTS的功能奠定良好的实验基础。  相似文献   

国外食源性疾病防控研究现状及启示   总被引：1，自引：0，他引：1  

帅丽芳  赵勇  银涛  唐博恒 《农业科学与技术》2013,(11):1661-1663

食源性疾病是一大类全球范围的常见疾病,平均每年有超过十亿人次患病,而我国每年发生食源性疾病暴发事件甚至达数十万起之多。食源性疾病的防控重在预防。从美国、欧盟等发达国家和地区的食品安全监管体制、食品安全法律及监测预警系统等方面进行综述,希望从中借鉴其成功经验,探讨适应我国现有发展阶段施行的食源性疾病监管及防控模式。  相似文献   

蛹虫草菌丝体培养研究     

银涛  罗学刚 《中国农学通报》2011,27(31):120-125

为了获取优质高产的蛹虫草,菌丝体生长速度和生长是否健壮是最主要的影响因素。笔者通过单因素试验找出了菌丝体的最适生长指标,采用均匀试验优化培养基中各种成分添加量。研究得出,乳糖和蛋白胨为菌丝体培养的最佳碳氮源。优化后的培养基组分为：蛋白胨2.5 g/L,乳糖39.9 g/L,磷酸二氢钾0.5 g/L、硫酸镁3.2 g/L和氯化钙0.3 g/L;适宜温度是15~28℃,最适为25℃;适宜pH范围为5~9,最适为7.5;无机盐对菌丝体生长速度影响不大,但对菌丝生长势有一定的影响,光照会抑制菌丝体的生长,以暗培养为宜。在此条件下通过试验证明,菌丝体长速可达到4.0 mm/天,且菌落菌丝呈现出浓密、洁白、粗壮有光泽。  相似文献