春兰根状茎增殖与分化培养   总被引：8，自引：0，他引：8  

褚云霞  张永春  靖相密  陈建林 《上海农业学报》2007,23(3):82-85

以10种培养基进行了春兰根状茎增殖培养研究,结果表明,不同培养基对增殖率有明显影响,以White NAA 5 mg/L培养再转入1/2 MS NAA 5 mg/L培养基,可获得较高的平均生长速度,但获得的根状茎总量以2号培养基最多。春兰根状茎的最适增殖条件为:1/2 MS为基本培养基,不加或添加少量NAA,60 d为1个增殖周期;5种培养基分化培养结果表明,根状茎分化受BA浓度影响较大,当BA浓度达3 mg/L时,经45 d培养平均每g根状茎可分化出20个芽,每芽重约0.15 g。活性炭的存在会抑制分化。  相似文献   

蜡梅ISSR反应体系的优化     

褚云霞  汤庚国  张永春  靖相密 《北方园艺》2007,(10):161-163

通过不同浓度Mg2 、dNTP、模板DNA、引物的组合试验、及不同浓度引物、Taq DNA聚合酶的单因素试验,筛选蜡梅最佳ISSR反应体系为:每20μL中含1×PCR buffer、2.5 mmol·L-1 MgCl2、0.2 mmol·L-1 dNTP、0.3μmol·L-1引物、30ng模板DNA、1U TaqDNA聚合酶;同时通过梯度PCR试验确定了不同引物的适宜退火温度.  相似文献   

不同保存方法对蜡梅总DNA提取效果的影响及ISSR-PCR验证   总被引：2，自引：0，他引：2  

靖相密  褚云霞  汤庚国  张永春  刘忠  张慧 《分子植物育种》2008,6(2):387-392

本文以蜡梅新鲜成熟叶片为对照,比较了真空冷冻干燥、硅胶干燥、压标本干燥、45℃烘干、75℃烘干5种叶片干燥方法和4℃保鲜、-20℃冻存、-70℃冻存法对蜡梅总DNA提取效果的影响.结果表明硅胶干燥的样品提取的DNA完整无降解,纯度高,DNA得率为鲜叶的1/3多,压标本干燥的样品可以提到完整的DNA,DNA得率与硅胶干燥的样品相近,提取的DNA含多酚,纯度低.真空冷冻干燥样品的DNA在冷冻干燥过程中小部分受到损伤,DNA得率较鲜叶稍有下降.45℃烘干的样品可以提取到完整的DNA,纯度高,DNA得率约为鲜叶的1/2,75℃烘干的样品的DNA全部降解.ISSR扩增结果表明75℃烘干的样品提取的DNA没有获得扩增产物,其他4种干燥方法提取的DNA的扩增结果与鲜叶相同.鲜叶可在4℃冰箱保鲜存放6 d,在-20℃冰箱中冷藏半月,可在-70℃超低温冰箱中长期放置而不影响总DNA的提取质量和ISSR扩增结果.  相似文献   

春兰离体根状茎辐射及EMS诱变方法建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

褚云霞  张永春  靖相密 《北方园艺》2009,(1)

以野生春兰茎尖培养所得根状茎为材料,用10、20、30、40 Gy 60Coγ-射线进行辐照,以不经辐照为对照.处理材料培养在1/2MS+NAA 5 mg/L上进行增殖,经30 d后统计重量及生长点数,同时转入1/2MS+NAA 0.2 mg/L+BA 3mg/L进行分化培养,经45 d后统计分化出的苗数.结果表明:随着辐照剂量增大,根状茎的增殖特别是新生长点的形成受抑制,苗分化均略有促进,但未达显著水平,高剂量(30 Gy)将严重抑制增殖与分化,20 Gy应为春兰根状茎辐照诱变的最适剂量.EMs处理分别以0.6%、0.8%浸泡6 h和8 h,以磷酸缓冲液浸泡为对照,结果表明,处理与对照差异显著,随着浓度的增大,根状茎的死亡率明显提高,0.8%浸泡6 h与8 h之间差异不显著.  相似文献