伪结核棒状杆菌的分离鉴定及病原性研究     

李基棕  李文良  毛立  郝飞  杨蕾蕾  张纹纹  江杰元 《江苏农业科学》2018,(4)

从疑似羊干酪性淋巴结炎的肩前淋巴结脓肿中分离到1株细菌,经革兰氏染色为无芽孢的阳性棒状杆菌;伪结核棒状杆菌特异性引物进行PCR扩增测序表明,该细菌的序列与伪结核棒状杆菌同源性达99.0%以上,确定其为伪结核棒状杆菌。用15种常用抗生素纸片进行药敏试验,结果显示,该菌对青霉素、头孢曲松、左氧氟沙星和氟苯尼考高度敏感;对链霉素、丁胺卡那霉素、环丙沙星、林可霉素和大观霉素耐药。致病性试验发现,腹腔注射小白鼠的半数致死量为1×10-6.0CFU/m L;皮下注射小白鼠2 d后出现大小不等的脓肿;分别用2×108、2×106CFU/m L 2种剂量皮下注射羊后出现体温持续升高,接种部位和周边的浅表淋巴结出现脓肿,切开后有干酪样脓汁,并从病变器官和脓汁中分离到细菌。组织病理学观察显示,皮肤和肌肉层有坏死灶及肉芽肿形成,肌纤维断裂坏死,淋巴细胞浸润,淋巴结出现化脓灶,并有大量上皮样细胞和成纤维细胞增生。本研究为伪结核棒状杆菌疫苗研制及致病机理研究奠定了基础。  相似文献   

山羊疱疹病毒Ⅰ型的分离鉴定与致病性     

郝飞  毛立  李文良  李基棕  杨蕾蕾  张纹纹  孙敏  钟纯燕  刘茂军  江杰元 《畜牧兽医学报》2018,(8)

为了查明引起2013—2014年江苏多地育肥羊出现呼吸道症状为主的疾病的病因,通过采集发病羊场鼻拭子,采用细胞接毒分离培养、病毒蚀斑纯化、病毒形态结构观察和病毒核酸鉴定,分离到一株山羊疱疹病毒Ⅰ型(caprine herpesvirus 1,CpHV-1),命名为JSHA1405;并对其进行了致病性试验。分离鉴定结果表明:病料接种MDBK细胞后,盲传至第3代时产生明显细胞病变;电镜下可见直径约100nm有囊膜的病毒粒子;gB全基因测序表明其为CpHV-1,序列比对显示JSHA1405株与CpHV-1瑞士分离毒E/CH株相似性最高,为99.2%。致病性试验表明,JSHA1405分离株可导致山羊发热持续一周以上,体温最高可达41.8℃。山羊感染后临床症状明显,表现为精神沉郁、流浆液性或脓性鼻涕,可通过鼻腔/粪便排毒。山羊感染后第7天出现中和抗体,第28天达到最高。这是国内首次报道CpHV-1的分离鉴定及致病性,分离毒JSHA1405具有较强的致病性,为CpHV-1病原学及防控技术研究提供依据与参考。  相似文献   

绵羊肺炎支原体和小反刍兽疫病毒双重RT-PCR检测方法的建立     

霍晓丽  李文良  毛立  杨蕾蕾  刘茂军  张纹纹  李基棕  孙敏 《江苏农业科学》2020,48(19):185-189

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边界病病毒RT-PCR检测方法的建立和应用     

毛立  张纹纹  李文良  杨蕾蕾  孙敏  程子龙  李基棕  郝飞  刘茂军 《中国兽医学报》2022,(9):1786-1789+1816

边界病(border disease)由边界病病毒(border disease virus, BDV)引起,导致绵羊和山羊持续感染和繁殖疾病,2012年在国内首次报道,但目前尚无特异的RT-PCR方法对该病原进行检测。本研究通过比对黄病毒科瘟病毒属病毒的全基因组序列,以3′-UTR基因为靶基因,设计了特异扩增BDV的引物。通过构建重组质粒pMD18-T-BDV,以其作为标准品建立了BDV的RT-PCR检测方法。进一步优化该方法的反应条件,并进行特异性、敏感性及临床样品检测。结果显示,该方法在退火温度48～60℃时均可特异扩增BDV,通过检测牛病毒性腹泻病毒1型(BVDV-1)、牛病毒性腹泻病毒2型(BVDV-2)和猪瘟病毒(CSFV)提取的RNA,该方法可特异扩增BDV而对其他同属病毒检测均呈阴性,表明其特异性良好;同时,该方法具有良好的敏感性,最低检出限可达10¹拷贝/μL,敏感性极高。利用该方法检测BDV持续感染羊和人工感染羊,发现持续感染羊的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、淋巴结、卵巢、脑等器官均可检测到BDV,而人工感染羊只能在感染3～7 d的血液和淋巴结...  相似文献   

牛星状病毒ORF2基因遗传进化分析及原核表达     

武琦  周金柱  钟纯燕  李基棕  李科茫  索朗斯珠  贡嘎  李彬 《畜牧与兽医》2022,(10):81-88

为了解牛星状病毒(bovine astrovirus, BoAstV)ORF2基因的遗传进化并获得原核表达的衣壳蛋白,从牛腹泻粪便中提取总RNA,扩增BoAstV ORF2基因,将ORF2基因克隆至pMD19-T载体中并测序,利用生物信息学软件分析基因的遗传进化。将位于BoAstV衣壳蛋白高度保守区的ORF2-1200基因克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,构建重组原核表达载体pET28a-ORF2-1200。将重组载体转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中诱导表达并优化诱导条件,经过超声破碎离心并鉴定蛋白可溶性,最后利用亲和层析镍柱对重组蛋白进行纯化和Western blot鉴定。结果表明：ORF2基因全长2 304 bp,编码768 aa, ORF2基因属MAstV-28基因型,与日本毒株Ishikawa24-6亲缘关系最近,与20个参考毒株的ORF2基因氨基酸同源性为53.2%～86.0%。试验成功构建了重组载体,经条件优化,在37℃,1.0 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导6 h情况下蛋白表达量最高,目的蛋白大小55 kDa左右,目的蛋白以包...  相似文献   

超级稻——再生稻高产栽培技术     

汤繁棕 《科学种养》2012,(8):14-14

近年来，为稳定粮食生产，福建省云霄县积极探索在双季稻作区推广超级稻一再生稻高产栽培技术，取得了显著的经济效益。现将其技术要点总结如下：  相似文献   

寒露风对晚稻危害及防御     

汤繁棕 《福建农业》2008,(10):11-11

在“寒露”季节前后，由于受北方强冷空气南下的影响，往往会出现连续3天以上日平均气温≤23℃，并伴随大风、干燥（有时阴雨）的天气，称为寒露风。寒露风是华南双季稻种植区晚稻生育期的一种主要气象灾害。  相似文献   

稻茬啤酒大麦高产优质群体质量指标及调控技术     

唐钧  蒋玉棕 《大麦科学》1998,(2):22-25

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新世纪梨优质丰产栽培技术     

林思棕 《福建农业》2004,(10):14-15

新世纪梨属砂梨系统,适合南方山区高温高湿地区栽植,树势较弱,树冠半开张,长枝少,短枝多,花芽极易形成,以短果枝及短结果群结果为主,果实近圆形,中大,一般单果重200克左右,果皮绿色,贮后变为黄色,果肉乳白色,细脆多汁,果心中大,味微香,可溶性固形物11％以上,口感好,品质佳,可贮藏。早熟(7月上旬可成熟)、早产、丰产、定植两年即挂果,三年平均每亩产量330公斤,5年开始丰产,每  相似文献   

九龙红茶初制加工技术要点     

林思棕  黄若展  林小端 《福建果树》2013,(3):56-57

德化县地处福建省中部,属亚热带季风气候,年均温18.6℃,年降雨量1 800～2 000 mm,境内海拔高低悬殊较大,且有温度垂直变化大、小气候突出的特点,是福建省乌龙茶主产区之一.原来种植的毛蟹等色种茶制出的乌龙茶茶叶香气不足、品质相对较差,价格不高,生产效益低,已不能适应当今乌龙茶市场需求.为提高毛蟹品种茶叶市场竞争力,提供市场适销对路的产品,提高茶叶综合效益,笔者与德化美湖九龙茶叶专业合作社进行毛蟹品种改制红茶的试验,初制的九龙红茶,红汤红叶,毫显香高,滋味醇厚鲜爽,市场畅销,经济效益成倍提高.现将九龙红茶初制加工技术总结如下.  相似文献