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脂肪组织RNA提取的三种方法比较与改进 总被引:1,自引:0,他引:1
脂肪组织单位体积细胞数少,且单位细胞富含脂类RNA含量相对较少(Mersmann,2002),这增加了从脂肪组织提取RNA的难度.本研究以脂肪组织为材料,比较了几种商品化的总RNA提取试剂盒,优化和改进某些提取步骤,从而得到了符合实验要求的总RNA. 相似文献
2.
SQ RT-PCR检测不同品种猪脂肪组织SOCS-3基因表达 总被引:1,自引:0,他引:1
取4月龄八眉猪和大白猪背部皮下脂肪组织,提取总RNA,根据大鼠细胞因子信号转导抑制因子-3基因(Suppressor Of Cytokine Signaling-3,SOCS-3)设计并合成引物,以猪β-actin基因作为内参,优化反应条件和体系,半定量(Semi Quantitative,SQ)RT-PCR单管扩增猪SOC93基因,经琼脂糖凝胶电泳分离后,Dolphin-DOC凝胶图像分析软件分析,测定各条带的光密度值,检测八眉猪和大白猪脂肪组织中SOCS-3基因mRNA的表达差异。结果表明:八眉猪脂肪组织SOCS-3 mRNA的表达丰度极显著高于大白猪(P〈0.01)。这种差异可能是2种经济类型猪脂肪沉积能力不同的主要原因之一。 相似文献
3.
PPAR-γ在八眉猪不同组织中的表达差异 总被引:2,自引:0,他引:2
以八眉猪为试验材料,提取其内脏脂肪、皮下脂肪、肌肉、肾脏、肝脏、心脏、肺脏和脾脏总RNA和总蛋白质,设计合成PPAR-γ1和PPAR-γ2基因的引物,以猪β-actin基因为内参,用半定量(Semi-Quantitative,SQ)RT-PCR检测PPAR-γ1和PPAR-γ2 mRNA在以上各组织中的表达;用免疫印迹技术(Western Blot)检测以上各组织中PPAR-γ1和PPAR-γ2蛋白的表达。结果显示,PPAR-γ1 mRNA及蛋白在以上各组织均表达,在内脏脂肪和皮下脂肪组织中表达水平显著高于其他组织,在肺脏中表达水平最低;PPAR-γ2 mRNA和蛋白质高表达于内脏脂肪、皮下脂肪、脾脏和心脏,而在肺脏、肾脏、肝脏、肌肉中表达水平很低。结果提示,PPAR-γ在不同组织的表达差异,可能与其在不同组织中的功能有关。 相似文献
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